Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
4.4K просмотров
⸱
8 июля 2025 г.
Источник: Bascuas, T., et al. Выделение, культивирование и генная инженерия первичных пигментных эпителиальных клеток млекопитающих для невирусной генной терапии. J. Vis. Exp. (2021).
В этом видео мы показываем процедуру получения глазных пигментных эпителиальных клеток из модели кролика. Клетки полезны в разработке терапевтических стратегий для дегенеративных заболеваний сетчатки.
Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.
Новозеландские белые кролики были усыплены путем передозировки пентобарбитала (150 мг/кг), разведенного в 0,9% NaCl, введенного внутрибрюшинно, и глаза были энуклеированы сразу после жертвоприношения.
1. Перед подготовкой
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
| вид | Лечение трипсином | N° Ячейки IPE | N° ячеек RPE | Пластина для посева (100 000 ячеек/см2) |
| кролик | да | ~350,000 | ~2,500,000 | 24-луночные планшеты |
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 12-луночные планшеты | Корнинг | 353043 | |
| 24-луночные планшеты | Корнинг | 353047 | |
| Бетадин | Мундифарма | ||
| Боннские микрощипцы плоские | |||
| Щипцы Colibri (стерильные) | |||
| DMEM/Радиолюбитель F12 | Сигма-Олдрич | Д8062 | |
| Простыня (стерильная) | Mölnlycke Health Care | 800530 | |
| ФБС | Бруншвиг | П40-37500 | |
| Щипцы (разного размера) (стерильные) | |||
| Марлевый компресс | ПРОМЕДИКАЛ АГ | No 25403 | |
| NaCl (0.9%) | Лаборатория Dr. Bichsel AG | 1000090 | |
| Камера Нойбауэра | Мариенфельд-супериор | Номер 640010 | |
| Пипетка Пастера (огнеупорная) | Витег | 4100150 | |
| ПБС 1Х | Сигма-Олдрич | Д8537 | |
| Пенициллин/стрептомицин | Сигма-Олдрич | П0781-100 | |
| Пентобарбитал (Тиопентал Инреса) | Ospedalia AG | 31408025 | |
| чашка Петри | ThermoFisher Scientific | 150288 | |
| Скарпель No10 | Свон-Мортон | 501 | |
| Скарпель No11 | Свон-Мортон | 503 | |
| Остро-острый кончик изогнутых ножниц Extra Fine Bonn (стерильные) | |||
| Остро-острый кончик прямых ножниц Extra Fine Bonn (стерильные) | |||
| Трипсин 0,25% | ThermoFisher Scientific | 25050014 | |
| Пружинные ножницы Vannas изогнутые (стерильные) |
