Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.
Исследование проводилось на шести трехмесячных самцах и самках свиней (немецкий ландрас) весом около 40 кг. Животные были доставлены в учреждения по уходу за животными не менее чем за 7 дней до экспериментов и размещены в соответствии с рекомендациями по благополучию животных. Животные получали пищу и воду в неограниченном количестве, а состояние их здоровья регулярно оценивалось ответственным ветеринаром. До начала экспериментов поддерживалось время голодания в течение 12 часов. Вся процедура эксперимента и обращение с животными проходили под наблюдением ответственного ветеринарного врача.
1. Индукция анестезии и поддержание анестезии
- Для индукции анестезии и поддержания анестезии животным проводят премедикацию и глубокую седацию с помощью внутримышечной инъекции с последующим внутривенным введением, при необходимости проводят эндотрахеальную интубацию. После этого индуцировать и поддерживать анестезию с помощью комбинации летучего анестезиологического агента с непрерывным применением опиоидов, дополненным дополнительной болюсной инъекцией опиоидов.
- Выполняйте внутримышечные инъекции кетамина в дозе 20 мг·кг-1, азаперона 4 мг·кг-1 и мидазолама в дозе 0,1 мг·кг-1 для премедикации и седации.
2. Размещение щупа
- Поместите животное в правильное боковое положение и согните спину животного, чтобы расширить пространство между позвонками.
- Для чрескожного введения дренажа спинномозговой жидкости для измерения и контроля спинномозгового давления определите уровень L 4/5 или L 5/6, проколите кожу и подкожное пространство иглой для введения и удалите иглу вкладыша.
- Поместите шприц, наполненный физиологическим раствором, на иглу и осторожно введите иглу с постоянным давлением на наполненный жидкостью шприц.
- Как только потеря сопротивления будет ощущаться как свидетельство эпидурального положения, снова введите иглу вкладки и введите иглу на 2-3 мм дальше, чтобы проколоть твердую мозговую оболочку и удалить иглу вкладыша.
- Проверьте внутритекущее положение, быстро капнув прозрачный ликер. Введите дренаж глубиной до 20 см, прикрепите адаптер Luer-lock и проверьте положение путем тщательной аспирации щелока.
- Аккуратно зафиксируйте дренаж швами и соедините его с системой отвода спинномозговой жидкости.