Удаление мигательной мембраны: хирургическая процедура по удалению мигательной перепонки из кроличьего глаза

Аннотация

Источник: Хонканен, Р. А., и др. Создание тяжелой модели сухого глаза с использованием полной дакриоаденальной эктомии у кроликов. J. vis. Exp. (2020).

В этом видео мы демонстрируем хирургическую процедуру по удалению мигательной мембраны из кроличьего глаза.

Протокол

Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.

1. Удаление мигательной мембраны

ПРИМЕЧАНИЕ: Для простоты техника для правого глаза описана ниже. Завершите эту процедуру на левом глазу идентичным образом. Удаляйте мигательную перепонку в двустороннем порядке в период акклиматизации (обычно в первую неделю).

1. Поместите кролика в ограничивающий мешок подходящего размера.
2. Введите подкожную инъекцию ацепромазина (1 мг/кг) через плечи с помощью шприца объемом 1 мл и иглы 26 г для успокоения кролика. Конечной точкой для этой легкой седации является ситуация, когда животное сохраняет расслабленное положение головы без обычных сканирующих движений, и его уши больше не полностью вертикально расположены.
3. С помощью микропипетки нанесите на глаз 25 мкл лидокаина (1%) без консервантов. Вставьте зеркало из проволочной крышки между веками.
4. Возьмитесь за мигательную мембрану на ее вершине с помощью 0,3 щипцов (или эквивалента) и натяните ее на поверхность роговицы. Введите 1% лидокаин с 1:100 000 адреналина в субконъюнктивальное пространство мигательной мембраны с помощью иглы 26 G. Введите примерно 0,3 мл, чтобы образовать пузырь небольшого размера над мигательной мембраной. Объемы инъекций более 1 мл находятся в пределах безопасного для кроликов диапазона доз (2−4 мг/кг).
5. Снимите проволочный зеркало. Подождите примерно 5 минут, пока лидокаин и адреналин подействуют. За это время проделайте ту же процедуру в ближнем глазу.
6. Установите на место проволочную крышку зеркала. Захватите и растяните мигательную мембрану по поверхности роговицы с помощью щипцов 0,3. Разрежьте мембрану у основания тенотомическими ножницами или их аналогичными.
   заметка: Кровотечение обычно минимально, но держите рядом высокотемпературный аккумуляторный блок прижигания и используйте его по мере необходимости, чтобы свести к минимуму кровотечение. Прямое давление на основание разреза мигательной мембраны также может быть использовано для остановки небольшого кровотечения, если оно происходит.
7. Снимите с проволочной крышки зеркало. Нанесите местную мазь с антибиотиком (неомицин, полимиксин, бацитрацин и гидрокортизон) на поверхность роговицы.
8. Выполните идентичную процедуру с другим глазом, как указано в протоколе.
9. Поместите животных обратно в отдельные клетки и дайте им зажить в течение как минимум одной недели или до тех пор, пока поверхность конъюнктивы полностью не заживет с клинической точки зрения, прежде чем проводить какие-либо дальнейшие анализы или вмешательств><а. заметка: На полное клиническое заживление указывает отсутствие какого-либо отека, инъекций или выделений с конъюнктивальных поверхностей. Животные должны держать глаза открытыми в норме, без наличия защитного птоза.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
ацепромазин, Aceproinj	Henry Schein Animal Health, Дублин, Огайо	NDC11695-0079-8	0,1 мл/кг подкожно для седации кроликов
Сумка для удержания животных	Henry Schein Animal Health, Дублин, Огайо	Джорвет J0170	Используйте сумку подходящего размера.
Устройство для прижигания, высокотемпературное, с питанием от аккумулятора	Медлайн Индастриз Инк, Нортфилд, Иллинойс	ССЫЛКА ESCT001	Держать под рукой на случай кровотечения, протокол 2.7
щипцы, 0,3	Bausch and Lomb (Storz), Бриджуотер, Нью-Джерси	ЭТ6319	Для удаления мигательной мембраны, протокол 2.5
крышка зеркало, проволока	Bausch and Lomb (Storz), Бриджуотер, Нью-Джерси	Барракер SUH01	Для удаления мигательной мембраны, протокол 2.4
лидокаин 2% с адреналином 1:100 000; смесь 50:50	Hospira Inc, Лейк-Форест, Иллинойс	НДЦ 0409-3182-02	Предварительная обработка перед удалением мигательных перепонок, протокол 2.4
лидокаин, без консервантов	Сигма-Олдрич, Сент-Луис, Миссури	Л5647	1% в PBS для анестезиологического средства, для нанесения на глаза, протокол 2.4
микропипетка	Эппендорф	Research Plus 100 мкл	Для применения лидокаина без консервантов для глаз, протокол 2.4
Наконечники для микропипеток	Медицинские товары по всему миру	41071052	Для применения лидокаина без консервантов для глаз, протокол 2.4
игла, 26 калибр	BD, Франклин Лейкс, Нью-Джерси	ССЫЛКА 305115	Для инъекций лидокаина/адреналина, протокол 2.3 и 2.5
кролик, Новозеландский белый	Лаборатория Чарльза Ривера, Уолтем, Массачусетс (Новая Зеландия)	2-3 кг	Подопытные животные
ножницы, тенотомия Уэсткотта	Медико-хирургический центр McKesson, Сан-Франциско, Калифорния	Милтекс 18-1480	Для удаления мигательной мембраны, протокол 2.7
шприц, 1 куб.см	BD, Франклин Лейкс, Нью-Джерси	ссылка 309659	Для инъекций лидокаина/адреналина, протокол 2.3 и 2.5