Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.
1. Подготовка модели
- Содержание взрослого самца свиньи весом 50 кг в помещении для содержания животных за 1 неделю до операции для акклиматизации животного к условиям содержания и проводникам. Ускорение модели в течение как минимум 6 часов до начала анестезии.
- Обезболивайте модель с помощью внутримышечной инъекции кетамина (33 мг/кг), атропина (0,04 мг/кг) и бупренорфина (0,05 мг/кг), а также ингаляционного изофлурана (5%)9.
- Переместите модель в положение лежа на спине и распылите на голосовые связки лидокаин (1%) с целью профилактики ларингоспазма. Выполните прямую эндотрахеальную интубацию с помощью эндотрахеальной трубки с манжетой 6,5 Fr. Подтвердите правильное положение эндотрахеальной трубки с помощью капнографии.
- Введите 18G внутривенно в краевую ушную вену и начните инфузию лактата Рингера со скоростью 200 мл/ч. Нанесите мягкую мазь на глаза модели, чтобы предотвратить сухость во время общей анестезии.
- Отслеживайте частоту сердечных сокращений модели и насыщение кислородом с помощью пульсоксиметра, приложенного к хвосту модели. Проветривание модели с частотой 14 - 16 вдохов/мин с помощью аппарата искусственной вентиляции легких и дыхательного объема 5 - 10 мл/кг. Поддерживайте адекватную анестезию, нацеливаясь на минимальную альвеолярную концентрацию (МАС) изофлурана в диапазоне от 2 до 2,5.
- Перед началом операции подтвердите достаточную глубину анестезии, протестировав болевые рефлексы с защемлением пальца задней ноги. Переоценивайте болевые рефлексы через равные промежутки времени на протяжении всей операции.
2. Подготовка устройства
- Подготовьте воспламененный солевой/биполярный радиочастотный (SBRF; Рисунок 1) устройство в соответствии со спецификациями производителя.
- Откройте наконечник (биполярный уплотнительный наконечник 6.0) и подключите его к генератору.
- Установите для параметра Скорость потока физиологического раствора значение Низкий. Используйте 0,9% физиологический раствор для максимальной проводимости энергии.
- Установите настройку мощности радиочастоты на 160 Вт.
3. Хирургия: Лапаротомия
- Выполните длинный открытый лапаротомический разрез по средней линии с помощью скальпеля #10, проходящий от мечевидного кость до лобка и проходящий через все слои брюшной стенки.
- Обеспечьте адекватное воздействие на представляющие интерес солидные органы (например, печень, селезенку, почки), мобилизуйте другие структуры и при необходимости вставьте ретрактор.
заметка: Для простоты печень будет называться твердым органом, представляющим интерес в оставшейся части этого протокола. Этот протокол также будет включать создание повреждений аналогичной степени в почках и селезенке.
4. Хирургия: симулированная травма солидного органа
ПРИМЕЧАНИЕ: Описанные ниже травмы представляют собой ухудшающуюся иерархию травм. Травмы создаются опытным хирургом-травматологом, а гемостаз будет получен другим хирургом.
- Используя лезвие скальпеля #10, приложите абразивное усилие (вперед и назад) к капсуле печени, чтобы вызвать капсулярное кровотечение. Травма должна быть поверхностной (т.е. 1 - 2 мм) и размером2 см2. Затем размер травмы может быть увеличен с шагом 1 см2 по усмотрению оператора.
- Создавайте рваные раны солидных органов возрастающей степени тяжести с помощью непосредственного применения скальпеля. Длина рваной раны может простираться от 5 см до всей длины органа. Глубина рваной раны должна составлять 1 см, а затем увеличиваться с шагом 1 см по усмотрению оператора.
- Создавайте проникающие раны с помощью тупого устройства, такого как зажим Келли, с помощью колющих движений. Они могут быть частичной толщины (т.е. 50% органа) или полной толщины (т.е. полностью проходящими через орган).
5. Гемостаз
- Нажмите на кнопку наконечника, инициируя одновременный поток физиологического раствора и подачу биполярной радиочастотной энергии. Солевой раствор закипит в месте нанесения.
- Нанесите наконечник устройства непосредственно на поверхность печени, на поверхностные участки кровотечения или в пределах дефектов самой печени. Не колите орган концевым эффектором.
- При необходимости применяйте одновременную аспирацию из стандартной хирургической присоски, чтобы доставить нагретый физиологический раствор и энергию непосредственно в области продолжающегося кровотечения. Это также помогает визуализировать точное местоположение продолжающегося кровоизлияния.
- Нагрейте ткани примерно до 100 °C (термическая коагуляция без значительного обугливания) легкими движениями вперед и назад. Слуховой «хлопок» произойдет через 3-5 секунд и будет означать, что ожог завершен. Затем пользователь может организованно переместить прибор на следующий целевой сайт.
- При необходимости применяют точно направленную высоковольтную электрокаутеризацию совместно с применением SBRF и аспирационных устройств с целью получения гемостаза. Это может потребоваться при самом крупном и энергичном кровотечении.
6. Герметизация малых и средних желчных протоков
- Используя тот же метод, что и описанный выше, приложите наконечник инструмента к порезанному/поврежденному краю паренхимы печени, чтобы закрыть малые и средние желчные протоки.
