$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Все процедуры, связанные с животными моделями, были рассмотрены местным комитетом по уходу за животными и ветеринарным советом JoVE.
1. Подготовка моделей костной инфекции
- Содержать самцов новозеландских белых кроликов в возрасте 3 месяцев в индивидуальных клетках, в условиях контролируемого воздуха (20 ± 1 °C) и 12 ч/12 ч светлых и темных циклов освещения. Предлагайте регулярное питание и ежедневную воду из-под крана.
- Следите за тем, чтобы на момент операции кролик весил более 3 кг.
- Обезболивание кроликов путем внутрибрюшинного введения пентобарбитала натрия (3 мг на 100 г массы тела). Убедитесь, что кролики полностью обезболены из-за отсутствия реакции на щипок лапы. Закрепите кроликов на операционном столе во время процедуры.
ПРИМЕЧАНИЕ: Убедитесь, что продолжительность процедуры моделирования не превышает 1 часа.
- Брейте проксимальную область большеберцовой кости с помощью электробритвы против направления роста волос. Продезинфицируйте кожу, применив раствор повидон-йода.
- Отметьте ручкой и линейкой верхний конец большеберцовой кости и место сверления отверстия для инъекции S. aureus (расстояние до верхнего конца большеберцовой кости 1,5 см). Убедитесь, что отверстия для сверления отверстий находятся в середине плато большеберцовой кости горизонтально (рисунок 1A).
- Разрежьте кожу голени с помощью скальпеля No 11 и сделайте надрез 1 см в надкостнице (рисунок 1Б, В). Проделайте отверстие диаметром 2 мм в большеберцовой кости с помощью электрического сверла для кости (Рисунок 1D).
- Прижмите отверстия диаметром 2 мм в плато большеберцовой кости цилиндром из костного воска диаметром 2 мм и высотой 2 мм (рисунок 1E). Удалите запасной костный воск вдоль горизонтальной плоскости плато большеберцовой кости (рисунок 1F). Убедитесь, что отверстие диаметром 2 мм заполнено костным воском (Рисунок 1G).
заметка: Убедитесь, что отверстия заполнены костным воском, проверив отверстие с кровью или без него.
- Зашейте надкостницу и кожу рассасывающимся хирургическим швом в вертикальный шов матраса, чтобы животное не сгрызло швы (Рисунок 1H).
- Введите 1 x 108 КОЕ/мл растворов S. aureus (30 мкл на 100 г массы тела) с помощью асептического инжектора 1 мл (рис. 1I). Убедитесь, что иглы проникают в костный воск, и медленно вводите раствор S. aureus в костный мозг.
- Держите животное в теплых и чистых условиях, чтобы избежать потери тепла после моделирования. Следите за частотой дыхания и сердцебиения. После пробуждения размещайте кроликов в индивидуальных клетках со свободным доступом к еде и воде.
