Окрашивание сафранином-О: метод визуализации структурной целостности и клеточности хряща

Аннотация

Источник: Zhao, Y., et al. Создание хирургически индуцированной модели у мышей для исследования защитной роли програнулина при остеоартрите. J. vis. Exp. (2014).

В этом видео мы демонстрируем процедуру окрашивания хрящей с помощью сафранина-апельсина. Этот метод помогает визуализировать хрящ и обнаружить любые повреждения.

Протокол

1. Окрашивание Safranin O

1. Начните со стеклянных стекол, содержащих последовательные сагиттальные срезы, охватывающие область от центра латерального мыщелка до центра медиального мыщелка усыпленной модели мыши с дестабилизированным медиальным мениском.
2. Затем депарафинизируйте предметные стекла в оксилене и увлажните их в этаноловом градиенте до дистиллированной воды. После этого предметные стекла окрашиваются раствором гематоксилина железа Weigert, 0,05% раствором Fast Green (FCF), 1% раствором уксусной кислоты и 0,1% раствором сафранина O. Монтируйте слайды с помощью смолистой среды.
3. Оцените слайды, окрашенные Safranin O, на основе потери протеогликана (красного цвета) в хряще и процента разрушения в структуре хряща, проведите статистический анализ для оценки гистологии.