$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.
1. Окрашивание толуидина в синий
цвет
- Приготовьте 1% раствор толуидина синего путем растворения 2 г бората натрия в 100 мл деионизированной воды, затем добавьте 1 г толуидина синего и размешайте до растворения. Отфильтруйте раствор с помощью фильтровальной бумаги (размер пор: 11 мкм) и выдержите раствор в непрозрачной бутылке при комнатной температуре до двух недель.
- С помощью пластиковой пипетки или микропипеттора добавьте каплю раствора толуидинового синего на верхнюю часть нервных участков и оставьте на 20-30 с.
- Смойте весь излишки раствора толуидина синего, осторожно опустив предметные стекла в банку с деионизированной водой, и повторите 3-4 раза, пока срезы не станут чистыми. Высушите стекла не менее 15 минут при температуре 60 °C или в течение ночи при комнатной температуре, а затем накройте секции покровным стеклом с использованием обычного монтажного материала. Осмотрите смонтированные предметные стекла сразу или храните при комнатной температуре.
- Рассмотрите под световым микроскопом. Для получения детализированных изображений, используемых для расчета коэффициента g, рекомендуется использовать масляный иммерсивный объектив 100X.