Методическая статья

Диффузная корреляционная спектроскопия для оценки мозгового кровотока на мышиной модели

8 июля 2025 г.

В этой статье

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Источник: Brothers, R. O., et al. Системный анализ нейровоспалительной и гемодинамической реакции на черепно-мозговую травму. J. Vis. Exp. (2022)

В этом видео мы демонстрируем технику спектроскопии диффузной корреляции для измерения мозгового кровотока на мышиной модели легкой черепно-мозговой травмы.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Все процедуры, связанные с животными моделями, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE

1. Оценка мозгового кровотока с помощью диффузной корреляционной спектроскопии

  1. Сбор данных DCS
    1. Удалите волосы на коже головы. Поскольку DCS лучше всего работает при отсутствии шерсти, необходимо удалить шерсть на голове до начала экспериментов. Как правило, эпиляцию делают за 1-3 дня до начала исследования.
      1. Индуцируйте мышам 4,5% изофлурана в 100% кислороде в течение 45 секунд и поддерживайте 1-2% изофлураном в 100% кислороде.
      2. Выбрейте голову между глазами и ушами. Затем используйте крем для депиляции, чтобы удалить шерсть на голове, как показано на рисунке 1.
      3. Дайте животному восстановиться после анестезии на согревающей салфетке, а затем вернитесь в клетку.
    2. Измерьте мозговой кровоток с помощью DCS. Чтобы свести к минимуму артефакты движения во время измерения, изучайте мышей под кратковременной изофлурановой анестезией.
      заметка: Визуальный мониторинг дыхания и реакции на защемление пальцев ног во время измерений и корректировка концентрации изофлурана по мере необходимости для обеспечения постоянной глубины анестезии. Значительные изменения в глубине анестезии могут изменить кровоток, учитывая известные вазомодулирующие эффекты изофлурана.
      1. Вводите 4,5% изофлураном в 100% кислороде в течение 45 секунд, а затем поддерживайте 1,0-1,75% изофлураном в 100% кислороде. Подтвердите достаточную глубину анестезии отсутствием реакции на защемление пальца ноги и нормальным дыханием (от ~60-80 вдохов в минуту).
      2. После 2-минутного периода стабилизации осторожно поместите датчик DCS на правое полушарие таким образом, чтобы верхний край оптического датчика совпадал с задней частью глаза, а сторона датчика располагалась вдоль средней линии (Рисунок 1). Положите руку на датчик, чтобы защитить его от света в помещении. Сбор данных за 5 секунд (захват 1 Гц).
      3. Переместите датчик над левым полушарием и получите данные за 5 секунд.
      4. Повторите 3 раза за полушарие, чтобы учесть локальные неоднородности под поверхностью ткани.
    3. выздоровление
      1. Извлеките мышь из наркоза и положите ее на греющую салфетку.
      2. После того как мышь восстановит свой рефлекс выпрямления, верните ее в клетку.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
Рисунок 1: Измерение мозгового кровотока с помощью диффузной корреляционной спектроскопии. (A) Оптический датчик вручную вручную удерживается над правым полушарием для измерения кровотока у мыши, находящейся под наркозом. (В) Репрезентативное размещение датчика в правом полушарии. Контур датчика представлен в виде пунктирного черного прямоугольника, а расположение волокон источника и...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Конфликт интересов не декларируется.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Крем для депиляцииамазонкаНаир
ДиГ2ОВВРVWRL0200-1000
Аппаратная плата автокоррелятораwww.correlator.comFlex05-8ch
Изофлуран 250 млМЕД-ВЕТ ИНТЕРНЕШНЛРКССО-250
Кимвайп (11,2 х 21,3 см)ВВР21905-026
Лабораторный вихревой смесительВВР10153-838 (Английский)
ЛабВьюНациональные инструментыЛабВЬЮ
Luminex 200, HTS, FLEXMAP 3D или MAGPIX с программным обеспечением xPONENTКорпорация Luminex
Язык программирования R
RStudiowww.rstudio.com
Ультразвуковой аппарат
Акриловая направляющая трубка длиной 1 мМакмастер-Карр49035К85
4-фотонный лавинный фотодиод с подсчетом фотоновПеркин-ЭлмерSPCM-AQ4C-IO
Многомодовое волокно с источником 400 мкмКомпания Thorlabs Inc.ФТ-400-ЭМТ
Болт 54 гАппаратное обеспечение AceОсновной диаметр туловища 0,95 см, диаметр головы 2 см, длина 10,2 см
Одномодовый детектор 780 нм оптоволоконныйКомпания Thorlabs Inc.780л.с.
Лазер с длинной когерентной длиной 852 нмTOPTICA ФотоникаСмарт iBeam

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Похожие статьи