Method Article

Windowing куриные яйца целях развития исследований

DOI:

10.3791/306

October 1st, 2007

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Легкость доступа к эмбрион позволило эксперименты по карте ячейки судьбы, используя несколько подходов, в том числе куриных перепела химеры и координационные маркировке краской. В этой статье мы показываем, одно яйцо подготовки метод, который был оптимизирован в течение долгого времени выживания.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Изучение развития был значительно способствовало использование куриного эмбриона в качестве экспериментальной модели. Легкость доступа к эмбрион позволило эксперименты по карте ячейки судьбы, используя несколько подходов, в том числе куриных перепела химеры и координационные маркировке краской. Кроме того, оно позволяет для молекулярных возмущения нескольких типов, в том числе размещение белка покрытием бисером и введение плазмидной ДНК с использованием в ово электропорации. Эти эксперименты были получены важные данные о развитии центральной и периферической нервной систем. Для многих из этих исследований, необходимо, чтобы открыть яичной скорлупы и повторного его, не возмущающие роста эмбриона. Эмбриона могут быть рассмотрены на последующих стадиях развития путем повторного открытия яичной скорлупы. Хотя Есть несколько отличных методов для открытия куриных яиц, в этой статье мы покажем один метод, который был оптимизирован в течение долгого времени выживания. В этом методе, яйцо лежит на боку и маленькое окошко режется в оболочке. После экспериментальной процедуры, оболочка используется для покрытия яйца в течение всего срока его развития. Прозрачная пластиковая лента вышележащих яичная скорлупа защищает эмбрион и помогает сохранить увлажнение в течение оставшейся части инкубационного периода. Этот метод был использован, начиная с двух дней инкубации и позволило выживание через зрелые эмбриональных возрастов.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Удалить яйца из инкубатора

  1. Поддерживать при 37 ° С при относительной влажности установлен выше 60%.
  2. Удалить яйца; свою очередь, яйца 90 ° так, чтобы большая база лежит горизонтально.

2. Тампон яйца для стерилизации

  1. Пропитайте стек нестерильных марлевых с 70% этанола.
  2. Используйте 2:58 штук тампоном до 5 яиц. Отменить когда марли загрязнен.

3. Подготовка сайта белка удаления

  1. Вырезать и место 1 "х 1" кусок ленты 3М пластиковые только что вышли из базы для защиты района, где альбумин будет длительным.

4. Удаление белка....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Этот метод позволяет в течение долгого времени выживания следующих экспериментальных манипуляций. Например, краска маркировки исследования позволили выживание E10 или поздно в исследование судьбы отображения (1). Кроме того, он был использован для исследований в ово электропорации, которые обеспечивают изменение уровня экспрессии генов и развитие необходимых для перехода к поздних стадий развития (2-6). Это оконная техника может быть использована в сочетании с какой-либо процедуры, которая требует выживаемость после манипуляций с эмбрионом.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Вращающийся инкубатор ProfiMaintain на 37°С; Градусы с относительной влажностью выше 60%
70% EtOH
марля
3M пластиковая лента
10cc шприц 1/яйцо
18G иглы 1½ дюймовая игла, 1/шприц
Ножницы для вскрытия 4-дюймовые острые прямые лезвия
для оплодотворенных яиц

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Cramer, K. S., Fraser, S. E., Rubel, E. W. Dev Biol. 224, 138-151 (2000).
  2. Cramer, K. S., Bermingham-McDonogh, O., Krull, C. E., Rubel, E. W. Dev Biol. 269, 26-35 (2004).
  3. Cramer, K. S., Cerretti, D. P., Siddiqui, S. A. Dev Biol. 295, 76-89 (2006).
  4. Huffman, K. J., Cramer, K. S. Dev Neurobiol. 67, 1655-1668 (2007).
  5. Krull, C. E. Dev Dyn. 229, 433-439 (2004).
  6. Gerlach-Bank, L. M., Cleveland, A. R., Barald, K. F. Dev Dyn. 229, 219-230 (2004).
....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Chicken Egg WindowingEgg PreparationEmbryo ManipulationAlbumin ExtractionShell SealingTape ApplicationDevelopmental StudiesIn Ovo ProceduresEgg HandlingEmbryo Survival

Related Articles