Методика создания адъювант-индуцированной модели мыши с артритом

Аннотация

Источник: Lu, Q., et al. Обнаружение миграции и инфильтрации нейтрофилов у мышей. J. Vis. Exp. (2020).

Это видео демонстрирует метод создания адъювант-индуцированного артрита на мышиной модели. Полный адъювант Фрейнда (КФА) вводится в голеностопный сустав мыши и околосуставные области. КФА активирует иммунную систему, что приводит к инфильтрации нейтрофилов и усилению воспаления.

Протокол

Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.

1. Индукция модели мыши, индуцированного адъювантным артритом (АА)

1. Суспендировать полный адъювант Фрейнда (КФА) путем вортекса не менее 5 с, затем втянуть 100 мкл суспензии в инъектор инсулина.
   заметка: Мы рекомендуем использовать в экспериментах совершенно новый CFA для обеспечения стерильности.
2. Обезболивайте мышей, как описано.
3. Отметьте выбранную лапу и введите 20 μL CFA в пространство голеностопного сустава. Введите 20 мкл суспензии в четыре околосуставные точки на выбранной лапе (всего 80 мкл).
4. Извлеките мышей из дыхательного блока и поместите обработанных мышей в новую камеру. Следите за мышами, чтобы убедиться, что они дышат до тех пор, пока не восстановят способность двигаться.
5. Каждые 3 дня оценивайте диаметр сустава, измеряя диаметр голеностопного сустава с помощью карманного толщиномера (Рисунок 1A).
6. Каждые 3 дня оценивайте тяжесть артрита по критерию оценки артрита (Рисунок 1C): 0, норма, без признаков эритемы и отека; 1, самый легкий артрит, эритема и легкий отек, ограниченный предплюсневыми или голеностопными суставами; 2, умеренный артрит, эритема и легкий отек, распространяющийся от голеностопного сустава до предплюсны; 3, тяжелый артрит, эритема и умеренный отек, распространяющийся от голеностопного сустава до плюсневых суставов; 4, Наиболее тяжелый артрит, эритема и сильный отек охватывают лодыжку, стопу и пальцы рук, или анкилоз конечности.

Результаты

Рисунок 1: Репрезентативные результаты модели мышей с адъювант-индуцированным артритом (АА). (A) Диаметр голеностопного сустава измеряли с помощью карманного толщиномера. (B) Отек сустава оценивали на основе диаметра голеностопного сустава (n = 7). (C) Фотографии каждой оценки артрита. (D) Тяжесть артрита оценивалась по шкале от 0 до...

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
Коническая полипропиленовая центрифужная трубка 15 мл	сокол	14-959-53А
Игла 23 Г x 1 1/4 дюйма	БД	305120 (Английский
Игла 26 г x 3/8 дюйма	БД	305110 (Английский
Игла 30 г x 1/2 дюйма	БД	305106
Полный адъювант Фрейнда, 10 мг/мл	сигма	1002036152
Микропробирки Eppendorf, 1,5 мл	сигма	Z606340
Циферблатный толщиномер	Митутоё	7301
Shu Rui U40 Одноразовая стерильная игла для инъекций инсулина 1 мл	БД	328421

) )