Канюляция сонной артерии у крысы

Аннотация

Источник: Trevaskis, N. L. et al., Модель крысы с канюлированным брыжеечным лимфатическим протоком: применение для оценки транспортировки кишечных лимфатических препаратов. J. Vis. Exp. (2015)

В этом видео мы демонстрируем хирургическую процедуру канюлирования левой сонной артерии на модели крысы.

Протокол

Все процедуры, связанные с животными, были проверены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным наблюдательным советом JoVE.

1. Канюляция сонной артерии

Канюляция сонной артерии может быть выполнена до или после канюляции брыжеечного лимфатического протока. Некоторые операторы предпочитают канюлировать сонную артерию перед канюлированием лимфатического протока, чтобы уменьшить потенциальное смещение лимфатической канюли при перемещении животного.

1. Нанесите отметку на канюлю сонной артерии на расстоянии 2,5 см от кончика скоса, чтобы определить часть трубки, которую следует ввести в артерию. Подсоедините другой конец канюли (т.е. без скоса) к игле 23 или 25-G, прикрепленной к шприцу, заполненному раствором антикоагулянта, и заполните канюлю раствором антикоагулянта, убедившись, что нет воздушных зазоров.
2. Чтобы облегчить канюляцию, поместите крысу под наркозом в положение лежа на спине, вытянув шею и направив голову в сторону оператора. Обратите внимание, что некоторые операторы предпочитают выполнять этот прием, когда хвост крысы направлен в сторону оператора.
3. Сделайте продольный разрез 1 - 1,5 см через слой кожи над левой частью трахеи в сагиттальной плоскости.
4. Рассеките подкожную соединительную ткань с помощью щипцов с тупым кончиком, чтобы обнажить подлежащие парные мышцы шеи.
5. Втяните мышцы шеи, чтобы открыть левую сонную артерию (расположенную на ~1 см ниже поверхности кожи и пульсирующую). Очистите вышележащую соединительную ткань от артерии путем тупого рассечения.
6. Осторожно изолируйте участок артерии длиной ~1 см с помощью тупых тканевых щипцов, стараясь не повредить прилегающий блуждающий нервный тракт. Выполняйте это, открывая и закрывая щипцы с тупым концом вертикально по обе стороны артерии, чтобы освободить ее от окружающих тканей и блуждающего нерва.
7. С помощью щипцов с тонким концом проденьте два шелковых шва под сонную артерию и поместите их на каждом конце изолированного участка артерии. Завяжите шовный материал, ближайший к оператору и наиболее удаленный от сердца и ключицы крысы (рисунок 1A).
8. Закупорьте кровоток по артерии, поместив пару прямых щипцов с тонким концом под артерию (Рисунок 1B).
9. С помощью ножниц с тонким концом радужной оболочки поместите небольшой разрез на верхней поверхности артерии (примерно на 1/3 пути вниз от верхней части изолированной области). Промойте пролитую кровь на поверхности артерии гепаринизированным физиологическим раствором и аккуратно протрите ватными наконечниками.
10. Введите кончик канюли в артерию с помощью пары щипцов с изогнутым наконечником. После установки удалите прямые щипцы с тонким кончиком, блокирующие кровоток, и продвинуте канюлю на 2,5 см внутрь артерии с помощью двух пар щипцов, одна из которых удерживает канюлю внутри артерии, чтобы остановить обратный отток крови, а другая — для введения канюли.
11. Используйте небольшой артериальный зажим, чтобы удерживать канюлю внутри артерии, и удалите прямые щипцы с тонким наконечником, которые были размещены ниже артерии на шаге 1.8, чтобы перекрыть кровоток.
12. Подтвердите проходимость канюли, введя в канюлю раствор антикоагулянта и откачав небольшое количество крови (рис. 1C). Затем промойте канюлю раствором антикоагулянта и запечатайте конец с помощью пламени зажигалки или пробки канюли.
13. Завяжите канюлю на месте двумя швами, наложенными под артерией на шаге 1.8.
14. Снимите артерный зажим и наложите третий шов вокруг артерии и канюли. Закройте рану на шее швами.

Результаты

Рисунок 1. Фотографии (А) сонной артерии, изолированной с помощью двух шелковых швов, с перевязанным ближайшим к оператору, (В) изолированной сонной артерии и перекрытием кровотока с помощью пары прямых щипцов с тонким концом, помещенных под артерией, и (В) сонной артерии с установленной канюлей и прохождением путем забора небольшого количества крови.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
Стерильный физиологический раствор	Здравоохранение компании «Бакстер»	AHB 1307	Можно использовать любую марку. Пример здесь - пакетики с солевым раствором Baxter 100 мл, коробка по 50 штук
70 % этанола в воде	любой		Можно использовать любую марку
Гепарин (35000 ме в 35 мл)	Сигма Фармасьютикалс	No 337220 (Английский	http://sigmaco.com.au/
Полиэтиленовая (ПЭ) канюля наружный диаметр 0,96 мм x внутренний диаметр 0,58 мм	Удлинители микротрубок	ПЭ8050	Можно использовать любую марку. Пример здесь - полиэтиленовая трубка 0,8х0,5 мм, 30 м
Полиэтиленовая (ПЭ) канюля наружный диаметр 0,8 мм x внутренний диаметр 0,5 мм	Удлинители микротрубок	ПЭ9658	Можно использовать любую марку. Примером здесь является полиэтиленовая трубка 0,96х0,58 мм, 30 м
линейка	любой		Можно использовать любую марку
Маркеры	любой		Можно использовать любую марку
прикуриватель	любой		Можно использовать любую марку
Иглы 23 калибра	Ливингстон Интернэшнл	DN23GX0.75ЛВ	Можно использовать любую марку. Примером здесь является одноразовая игла Livingstone, стерильная, 23GX0.75 дюйма, 100 / КОРОБКА. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT= 6&search=DN23GX0.75LV
Иглы 25 калибра	Ливингстон Интернэшнл	DN25GX1.0LV	Можно использовать любую марку. Примером здесь является одноразовая игла Livingstone, стерильная, 25GX1.0 дюйма, 100/BOX. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT=6&search= DN25GX1.0LV
1 мл шприц	Ливингстон Интернэшнл	T3SS01TA	Можно использовать любую марку. Примером здесь является шприц Terumo 1 мл Slip Tuberculin 100/Box. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT=6&search =T3SS01TA
Шприц 10 мл	Ливингстон Интернэшнл	T3SS10SA	Можно использовать любую марку. Примером здесь является шприц Terumo 10 мл Slip 100/Box. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT=6&search =T3SS10SA
Марлевые тампоны	Ливингстон Интернэшнл	ГСК075	Можно использовать любую марку и нарезать ее до нужного размера. Пример здесь – марлевые тампоны с ватным наполнителем 7,5х7,5 см, 8 слоев. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT=6&search =ГСК075
Ватные палочки	Ливингстон Интернэшнл	CTAST075DP	Можно использовать любую марку. В качестве примера можно привести хлопчатобумажный аппликатор Livingstone пластиковый с двойным наконечником. 75ММ. 100/ПК. http://www.livingstone.com.au/?PG=search_result&CAT=6&search<бр/> =CTAST075DP
Шелковый шов	Ливингстон Интернэшнл	DTSK163019F4
Лезвия скальпеля	Инструменты для точных научных исследований (FST)	10020-00	Можно использовать любую марку. Примером здесь является лезвие скальпеля FST #20. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=191
Рукоятка скальпеля	Инструменты для точных научных исследований (FST)	10004-13	Можно использовать любую марку. Примером здесь является ручка скальпеля FST #4. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=298&CategoryId=51
1 х Маленькие хирургические ножницы	Инструменты для точных научных исследований (FST)	14060-09	Можно использовать любую марку. Пример здесь - FST Fine Scissors, 9 см с режущей кромкой 21 мм, острые, прямые. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=40&CategoryId=17
2 х Щипцы с зубчатым изогнутым наконечником	Инструменты для точных научных исследований (FST)	11001-13	Можно использовать любую марку. Примером здесь являются щипцы стандартного шаблона FST 13 см с изогнутым наконечником 2,8x1,4 мм. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=405&CategoryId=32
1 х ножницы для иридэктомии	Инструменты для точных научных исследований (FST)	15000-08	Можно использовать любую марку. Пример здесь - пружинные ножницы FST Vannas - режущая кромка 2,5 мм, прямые. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=17&CategoryId=16
1 х Щипцы с прямым зубчатым наконечником	Инструменты для точных научных исследований (FST)	11650-10	Можно использовать любую марку. В качестве примера можно привести FST Graefe 10 см прямой с зубчатым наконечником 1 x 0,99 мм. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=390&CategoryId=32
1 х щипцы с гладким, острым, прямым, тонким кончиком	Инструменты для точных научных исследований (FST)	11251-10	Можно использовать любую марку. В качестве примера можно привести щипцы FST Dumont #5 прямые 11 см с наконечником 0,08 x 0,04 мм. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=335&CategoryId=29
1 х Щипцы с гладкими тонко изогнутыми щипцами	Инструменты для точных научных исследований (FST)	11063-07	Можно использовать любую марку. Примером здесь является FST Delicate Щипцы 9 см с гладким наконечником 0,4 х 0,3 мм. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=360
1 х Иглодержатель для швов	Инструменты для точных научных исследований (FST)	12001-13	Можно использовать любую марку. Примером здесь является иглодержатель FST 13 см Hasley с наконечником длиной 16 мм и шириной 1,9 мм. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=254&CategoryId=70
1 х Артерийный зажим	Инструменты для точных научных исследований (FST)	18050-28	Можно использовать любую марку. В качестве примера можно привести прямую конструкцию FST Bulldog Serrefines длиной 28 мм, размером губки 9x1,6 мм со средним зажимным прессом. http://www.finescience.ca/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=270&CategoryId=82

) гг. гг.