Ингибирование нейронной активности и ее выявление с помощью электрофизиологии у крысы

Аннотация

Источник: Lai, J., et al. Одновременная электрофизиологическая регистрация и микроинъекции ингибирующих агентов в мозг грызуна. J. Vis. Exp. (2015)

В этом видео демонстрируется основанная на микроинъекциях техника одновременной записи нейронов и ингибирования в верхнем колликулусе крысы. Процедура включает в себя стереотаксическое нацеливание, сверление черепа и введение инжектора, который доставляет ингибирующий нейромедиатор при записи нейронной активности. Световая стимуляция вызывает потенциалы действия, в то время как микроинъекции лекарств подавляют возбудимость нейронов. По мере снижения уровня нейротрансмиттеров активность нейронов возвращается к исходному уровню, что позволяет изучать как торможение, так и восстановление.

Протокол

Все процедуры, связанные с животными моделями, были рассмотрены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным советом JoVE.

1. Сборка пипетки для записи и впрыска

1. Потяните стеклянный капилляр длиной около 7 см (внешний диаметр 1 мм) с помощью съемника для пипетки.
2. Разломайте кончик капилляра и проверьте отверстие под световым микроскопом. Убедитесь, что внутренний диаметр составляет от 30 мкм до 40 мкм.
3. Вставьте серебряную проволоку длиной 7 см в стеклянный капилляр с примерно 1 см, выступающей из неконического конца стеклянной пипетки.
4. Согните лишнюю нить перпендикулярно стеклянному капилляру.
5. На....

Результаты

Рисунок 1: Схематическое изображение инжекторовой сборки. Микрошприц (А) прикреплен к пипетке для записи и инъекций, которая состоит из иглы для подкожных инъекций (В) массой 30 г, прикрепленной к серебряной п.......

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
Инъекционный насос (UltraMicroPump III)	WPI
Инъекционная консоль (контроллер Micro4)	WPI	#SYS-MICRO4
Шприц Hamilton	Hamliton	(80301) 701LT 10 μL SYR	Используемые шприцы от 5 до 10 μл Гель
цианоакрилатный адгезив	Krazy Glue	KG86648R	Гелевую форму легче наносить на стержень иглы для подкожных инъекций 30G
Стеклянные пипетки	WPI	#TW100F-4	Тонкие стенки, 1 мм OD, 0,75 мм ID с филаментными пипетками Используемые пипетки
720 Игла Пипетки Puller	Kopf	720
Silver wire	A-M Systems, Inc.	782500	Голый 0.010"

#UMP3