Регулирование роста шванновских клеток in vitro с помощью метода наносекундного импульсного электрического поля

Аннотация

Источник: Han, J., et.al. Регулирование роста шванновских клеток с помощью наносекундного импульсного электрического поля для регенерации периферических нервов in vitro. J. Vis. Exp. (2024)

В этом видео демонстрируется применение метода наносекундного импульсного электрического поля (nsPEF) для модуляции роста шванновских клеток (SC). Быстрые электрические импульсы индуцируют переходные нанопоры в мембранах СК, способствуя притоку кальция, который активирует сигнальные пути, управляющие пролиферацией, дедифференцировкой и секрецией нейротрофического фактора СК. Эти клеточные реакции усиливают поддержку аксонов, выживаемость нейронов и потенциальную миелинизацию, что делает nsPEF многообещающим инструментом для восстановления нервов.

Протокол

1. Размораживание криоконсервированных клеток RSC96

1. : Разморозьте криовиал, содержащий 1 мл клеточной суспензии, быстро встряхнув его на водяной бане при температуре 37 °C, а затем добавьте его в центрифужную пробирку, содержащую 4-6 мл готовой питательной среды, и хорошо перемешайте.
2. Центрифугируйте при 1000 x g в течение 3-5 минут, выбросьте надосадочную жидкость и повторно суспендируйте клетки в 3 мл готовой питательной среды.
3. Клеточную суспензию добавить в культуральную колбу (или чашку), содержащую 6-8 мл полной питательной среды, и инкубировать при 37 °С в течение ночи.
4. На следующий день понаблюдайте за ростом и плотностью к....

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
Высоковольтный источник питания для nsPEF	Matsusada Precision Inc.	AU-60P1.6-L
Пипетка	Wuhan Xavier Biotechnology Co., LTD
RSC96 Schwann cells	Wuhan Xavier Biotechnology Co., LTD	STCC30007G-1
Сканер	3DHISTECH	Pannoramic MIDI
Специальный кабель для nsPEF	Times Microwave Systems	M17/78-RG217