Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Трансплантация клеток-предшественников интернейронов человеческого происхождения в гиппокамп детеныша мыши

627 просмотров

7 августа 2025 г.

В этой статье

Аннотация

Источник: Gonzalez-Ramos, A., et al., Трансплантация ГАМКергических нейронов человека, полученных из стволовых клеток человека, в ранний постнатальный гиппокамп мыши для смягчения нарушений развития нервной системы. J. Vis. Exp. (2022)

В этом видео демонстрируется стереотаксическая инъекция клеток-предшественников интернейронов человеческого происхождения в гиппокамп генетически модифицированного детеныша мыши с уменьшенным торможением интернейронов с целью восстановления возбуждающе-тормозного баланса.

Протокол

Все процедуры, связанные с животными моделями, были рассмотрены местным институциональным комитетом по уходу за животными и ветеринарным советом JoVE.

1. Трансплантация клеток внутри гиппокампа

ПРИМЕЧАНИЕ: Все шаги в этом разделе выполняются за пределами капюшона для клеточных культур в помещении для животных. Раннюю постнатальную трансплантацию клеток в мозг проводили на Р2 с учетом Р0 в день рождения.

  1. Подготовьтесь к эксперименту по трансплантации, выполнив следующие действия.
    1. Автоклавируйте весь хирургический материал или, если это невозможно, стерилизуйте другим утвержденн....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

figure-results-1

Рисунок 1: Теотаксическая трансплантация у новорожденных мышей в P2. (A) Сцена, похожая на пластилин, используется для удержания тела щенка в нужном положении и перевернутых ушных планок (пурпурные стрелки). (.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
30 G иглаB Braun4656300
33 G игла для шприца HamiltonHamilton7762-06
B6.129(Cg)-Cntnap2tm1Pele/JJackson Laboratory17482Животная модель
C57BL/6JJanvier Labs Животная модель
Цифровой стереотаксKOPFМодель 940
ДоксициклинSigma-AldrichD98912 мкг/мл
ЭтанолSolveco 70%, 95%, 99,8%
H1 (WA01) ESCWiCellWA01Линия эмбриональных стволовых клеток человека в соответствии с соглашением MTA
Hamilton ШприцHamilton7634-015 мкл
Изофлуран BaxterApoteket AB
Мышиный адаптер к стереотаксуRWD68030
Пуромицин (дигидрохлорид)GibcoA1113803
ПинцетVWR

Теги

Стереотаксическая инъекциявозбуждающе-тормозный баланстрансплантация ГАМК-ергических нейроновгенетически модифицированный мышоноккоординаты гиппокампаметод изогнутой иглыпредотвращение рефлюкса клетокинтеграция в нейронную сеть