Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Стекловаты фильтры для концентрирования водной основе вирусов и сельскохозяйственной зоонозных патогенов

17.7K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/3930

⸱

3 марта 2012 г.

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 

В этой статье

Краткое содержание

Фильтры из стекловаты были использованы для концентрации водных вирусов, ряд научно-исследовательских групп по всему миру. Здесь мы показываем, простой подход к построению фильтров стекловаты и продемонстрировать фильтры также эффективны в воде концентрации вирусных, бактериальных и протозойных патогенов.

Аннотация

Важным первым шагом в оценке уровня возбудителя при подозрении на загрязненной воды концентрация. Концентрация методы, как правило, специфичные для определенного возбудителя группы, например, охране окружающей среды США Метод 1623 для Giardia и Cryptosporidium 1, что означает несколько методов требуется, если выборка программа ориентирована на более чем одним возбудителем группы. Другим недостатком существующих методов является оборудование может быть сложным и дорогим, например, VIRADEL метод 1MDS фильтра для концентрирования вирусов 2. В этой статье мы расскажем, как построить фильтры стекловаты для концентрирования водных патогенов. После того, как фильтр элюирования, концентрат поддается второй этап концентрации, таких как центрифугирования, после чего возбудитель обнаружения и подсчета культурной или молекулярных методов. Фильтры имеют ряд преимуществ. Строительство легко и фильтры могут быть построены дляНью-Йорк размер для удовлетворения специфических требований отбора. Фильтр части стоят недорого, что позволяет собрать большое количество образцов, не сильно влияет бюджета проекта. Большие объемы выборки (100s до 1000 с L) может быть сосредоточено в зависимости от скорости засорения от образца мутности. Фильтры портативный и с минимальным оборудованием, таким как насоса и расходомера, они могут быть реализованы в области отбора проб готовой питьевой воды, поверхностных вод, подземных вод и сельскохозяйственных стоков. Наконец, стекловата фильтрации является эффективным для концентрации различных типов возбудителей это только один из методов не требуется. Здесь мы сообщаем о фильтре эффективность в концентрации водных человека энтеровирусы, S almonella enterica, Cryptosporidium parvum и вируса птичьего гриппа.

Протокол

1. Подготовка стекловаты

  1. До и после выполнения каждой серии фильтров, стерилизация рабочей зоны с 10% гипохлоритом натрия.
  2. Наденьте перчатки и халат. Стерилизовать ведро в автоклаве при 121 ° C и 15 фунтов на квадратный дюйм, по крайней мере 20 минут. Поместите стекловаты в стерильной ведро.
  3. Пропитайте стекловату с обратным осмосом воды и дайте впитаться в течение 15 минут.
  4. Слейте воду обратного осмоса из ведра.
  5. Пропитайте стекловату с 1 М HCl и пусть замочить на 15 минут.
  6. Слейте 1 M HCl из ведра.
  7. Промойте стекловату с обратной воды обратного осмоса.
  8. Тщательно перемешайте.
  9. Пров....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Фильтры из стекловаты были использованы несколько исследовательских групп 3,5,6 сосредоточиться человека кишечными вирусами из различных водных источников, таких как питьевая вода закончила 7, 8,9 подземные, поверхностные воды 10, морской воды 11, сточные воды 12 и сельскохозяйственные стоки 13. Здесь мы сообщаем о фильтрах, также эффективны в концентрации вируса птичьего гриппа, а также бактерий и простейших возбудителей сальмонеллы enterica (се.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Нет конфликта интересов объявлены.

Благодарности

Мы благодарим Уильям Т. Эккерта для повествующая видео. Разработка протокола стекловолокна была частью водного Висконсин и здоровье судебных для кишечных риски (WAHTER исследований), финансируемого США EPA ЗВЕЗДА Грант R831630. Аляска образцы, собранные А. Ривз, А. Реми, Б. Meixell при финансовой поддержке Геологической службы США. Любое использование торговых, продуктов и фирменных наименований для описательный характер и не означает одобрения со стороны правительства США.

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Название реагента или элемент Компания Номер по каталогу
Соляная кислота Fisher Scientific A144-500
Едкий натр Fisher Scientific BP359-212
Фосфатного буфера
Хлористый натрий
Калия фосфат двузамещенный
Калия фосфат однозамещенный

Fisher Scientific
Fisher Scientific
Fisher Scientific

BP358-212
BP363-500
BP362-500
Гипохлорит натрия, т. е. отбеливателя Clorox Ко
Тиосульфата натрия, безводный Fisher Scientific S 475-212
Мясной экстракт, высушенный Becton, Dickinson и компании 211520
Глицин Fisher Scientific G46-500
Пропитанная sodocalcic стекловолокна
Или
R-11 unfaced изоляция из стекловолокна
Isover

REF = "http://www.jm.com" целевых = "_blank"> Johns Manville
Bourre 725 QN


Полипропиленовые сетки Промышленные сетки xN4510
2 "x4" SCH 80 PVC резьбовой ниппель трубы Грейнджер 6MW35
2 "Sch 40 ПВХ крышка Грейнджер 5WDW3
Мужской установки нейлон Адаптер (1/2 "x1 / 2") США пластиковые корпорации 62178
Пример бутылки для элюата, 1 литр Fisher Scientific 03-313-4F
60 мл шприц "Http://www.fishersci.com" целевых = "_blank"> Fisher Scientific NC9661991
рН полосы Ватман 2614 991
Фильтр предварительной очистки, полипропилен, 10-дюймовый картридж, 10 мкм McMaster-Carr 4411K75
Префильтр жилья Коул-Parmer S-29820-10

Ссылки

  1. US Environmental Protection Agency. Method 1623: Cryptosporidium and Giardia in Water by Filtration/IMS/FA. EPA 815-R-05-002. , (2012).
  2. Cashdollar, J. L., Dahling, D. R. Evaluation of a method to re-use electropositive cartridge fil....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Концентрирование патогенов из водыдетектирование вирусовдетектирование бактерийдетектирование простейшихизготовление фильтраотбор проб в полевых условияхэлюция патогеновфильтрация больших объемовсельскохозяйственный сток