Мы описываем технику, в которой часть брюшной аорты от мыши пересаживается ортотопически чуть ниже почечных артерий в аллогенных и сингенных получателя. Эта техника может быть полезна в исследованиях, в которых трансплантация крупных артерий одинакового размера считается выгодным.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Ортотопической трансплантации аорты у мышей для изучения сосудистых заболеваний
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Сосудистые процедур, связанных с анастомозов у мыши, как правило, считается трудным и в значительной степени зависит от мастерства отдельных хирурга. В значительной степени это верно, но есть ряд важных принципов, которые могут уменьшить сложность этих процедур и повышения воспроизводимости. Ортотопической трансплантации аорты является отличной процедурой, в которой для изучения этих принципов, потому что она включает в себя только два конца в конец анастомоза, но требует хорошей техникой наложения швов и обработки судов для последовательного успеха. Эта процедура начинается с закупки длина брюшной аорты от донора животных, с последующим разделением родной аорты у получателя. Закупаются аорты помещается между разделенными концами получателя аорты и пришивается на место с помощью конца в конец анастомозов. Для достижения этой цели успешно требует высокой степени концентрации, хорошие инструменты, твердая рука, и понимание того, как легкососудистой мыши могут быть повреждены, в результате тромбоза. Изучение этих важных принципов является то, что занимает большую часть времени начинающих при изучении микрохирургии в мелких грызунов. На протяжении всего этого протокола, мы говорим об этих важных моментах. Эта модель может быть использована для изучения сосудистых заболеваний в различные экспериментальные системы 1-8. В контексте показанный здесь, это наиболее часто используется для изучения после трансплантации сосудистых заболеваний, общих долгосрочных осложнений твердых трансплантации органов, в которых гиперплазии интимы происходит в аллотрансплантата. Основным преимуществом модели является то, что она облегчает количественный анализ морфометрических и пересаженные судно лежит прилегающих к эндогенным судна, которое может служить в качестве дополнительного контроля 9. Техника показано здесь чаще всего используется для мышей весом 18-25 граммов. Мы накопили большую часть нашего опыта использования C57BL/6J, BALB / CJ, и C3H/HeJ штаммов.
Протокол
1. Предоперационной подготовки
- Хирургические процедуры, независимо от того, насколько тщательно сделано, приводит к значительному стрессу. Чтобы свести к минимуму последствия такого стресса и увеличить запасы, животные должны содержаться в виварии, по крайней мере 72 часа перед использованием 10,11.
- Хирургические инструменты, марля, и тампоны должны быть стерильными. Это не обязательно использовать стерильные перчатки обеспечение только кончики шва инструментов прикосновение или операционного поля.
- Для гемостаза, крайне важно, чтобы зажимное давление минимально необходимых. Повреждения судна из-за чрезмерного давления или гру....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
На рисунке 1 показана аортального протеза. Белые стрелки обозначают шов линии. Патент трансплантат покажем видимых импульсов. Рисунок 2 показывает типичный эксперимент, в котором получатель выживания последовало в течение 56 дней. Одна группа состояла из дикого типа (C57BL / 6 х FVB) получателя мышей пересаживают с BALB / с аортой. Другая группа, обозначенная "КО" состоит из получателей (C57BL / 6 х FVB), дефицитные по выражению гемоксигеназы-1, что приводит к тромбозу транс.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Мышь моделей аорты трансплантации обеспечивают ряд преимуществ, потому что мыши очень хорошо определены immunogenetically 9,12,13, и они могут быть легко манипулировать, чтобы изменять их экспрессии специфических генов, если это необходимо. Как отмечалось во введении, сосудистая хирургия у мыши гораздо сложнее, чем большинство моделей из-за размеров судов. Даже великий артерий, таких как аорта, как правило, не более 100-200 мкм, внутренний диаметр, так что манипулирование этих судов требует значительных навык.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Нет конфликта интересов объявлены.
Благодарности
Эта работа финансировалась за счет основного ресурса NIH P30 О'Брайен центр (DK 079 337).
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Пункт | Компания | № по каталогу | |
| Сосудистые зажимы | Средства изобразительных наук | 00396-01 (размер B-1) | |
| Дюмон щипцы | Средства изобразительных наук | 11293-00 | |
| 10-0 Needled microsuture | AROSurgical | TK-107 038 | |
| Прямо ножницами | Roboz Хирургические инструменты Ко | RS-5620 | |
| Низкая температура cauterizer | Бивер-Visitec Международного | 8441000 | |
| Самостоятельная сохраняя втягивающего | Инструменты Всемирной Precision | 14240 |
Ссылки
- Sun, H., et al. Improved surgical technique for the establishment of a murine model of aortic transplantation. Microsurgery. 18, 368-371 (1998).
- Dambrin, C., Calise, D., Pieraggi, M. T., Thiers, J. C., Thomsen, M. Orthot....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
