Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Использование компьютерной томографии высокого разрешения для визуализации трехмерной структуры и функции сосудистой завод

20.8K просмотров

DOI:

10.3791/50162

5 апреля 2013 г.

В этой статье

Краткое содержание

Высокое разрешение рентгеновской компьютерной томографии (КТВР) является неразрушающим методом диагностики визуализации, которые могут быть использованы для изучения структуры и функции сосудистой завода в 3D. Мы показываем, как КТВР облегчает изучение ксилемы сети в широком диапазоне тканей растений и видов.

Аннотация

Высокое разрешение рентгеновской компьютерной томографии (КТВР) является неразрушающим методом диагностики визуализации с субмикронной разрешающей способности, которая сейчас используется для оценки структуры и функции растений сети ксилемы в трех измерениях (3D) (например, Brodersen и др. . 2010; 2011; 2012A, б). КТВР визуализации основана на тех же принципах, медицинских CT системы, но высокая интенсивность синхротронного источника рентгеновского излучения приводит к более высоким пространственным разрешением и снижение времени захвата изображений. Здесь мы покажем, в деталях, как синхротронное на основе КТВР (выполняется на Advanced Light Source-LBNL Беркли, Калифорния, США) в сочетании с Avizo программного обеспечения (VSG Inc, Берлингтон, штат Массачусетс, США) в настоящее время используется для изучения растений в ксилемы подакцизным ткани и живых растений. Этот новый инструмент визуализации позволяет пользователям выйти за рамки традиционного статические, 2D световой или электронной микроскопии и изучения образцов с использованием виртуальных последовательных секций в любой плоскости. Бесконечное количество кусочков в любой ориентации сбыть сделан на том же образце, особенность, которая является физически невозможным использование традиционных методов микроскопии.

Результаты показывают, что КТВР может быть применен как для травянистых и древесных видов растений, а также ряд органов растений (например, листья, черешки, стебли, стволы, корни). Цифры, представленные здесь поможет продемонстрировать, как ряд представителей анатомия сосудистых растений и типа подробно извлечены из КТВР данных, включая сканирование на побережье красного дерева (Sequoia sempervirens), грецкий орех (Juglans SPP.), Дуб (Quercus SPP.), Клен ( Acer SPP). саженцев деревьев на подсолнечник (Helianthus Annuus), виноград (Vitis SPP.), и папоротники (Pteridium aquilinum и Woodwardia Fimbriata). Вырезанные и сушат образцы древесных пород являются самыми легкими для сканирования и обычно дает лучшее изображение. Тем не менее, в последнее время улучшения (т.е. более быстрое сканирование и образцы стабилизации) сделали это ПОССible, чтобы использовать эту технику визуализации на зеленой ткани (например, черешков) и в живых растениях. В отдельных случаях некоторые усадки гидратированных зеленых тканях растений может привести к размытости изображения и методы, чтобы избежать этих проблем описаны. Эти последние достижения с КТВР обеспечить перспективное-новому взглянуть на заводе функцию сосудов.

Введение

Вода переносится из корней растения с листьями в сосудистой ткани, которая называется ксилемы - сеть взаимосвязанных трубопроводов, волокон и жизни, метаболически активных клеток. Транспортная функция завода ксилемы должна поддерживаться на поставку питательных веществ и воды на листья для фотосинтеза, роста, и в конечном счете выживание. Водный транспорт в ксилемы каналов может быть нарушен, когда ксилемы сеть будет скомпрометирована патогенными организмами. В ответ на такие растения инфекции часто производят гели, десен и tyloses в качестве средства для изоляции возбудителя распространения (например, McElrone и др., 2008; 2010). Засуха стресс также может о....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Протокол подробно описанные ниже, были написаны специально для работы в Advanced Light Source 8.3.2 beamline. Адаптации могут быть необходимы для работы на других объектах синхротрона. Правильное безопасности и радиационной подготовка необходима для использования этих объектов.

1. Подготовка проб для живых растений

  1. Выращивать растения в горшках ~ 10 см в диаметре, и убедитесь, что главный стебель (или часть растения, которые будут проверяться) такой, как в центре, как это возможно, и ориентированы вертикально в кастрюлю. Физические размеры прибора КТВР клетку в пределах Advanced Источник света растения живут до ~ 1 м в высоту. ....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Synchotron КТВР сканирования были успешно реализованы на самых разнообразных тканей растений и видов использования beamline 8.3.2 (рисунок 5), и дали новому взглянуть на структуру и функции растений ксилема на беспрецедентное разрешение в 3D. Визуализации и анализа возможностей, предоставляемых 3D реконструкции (как показано на рисунках 6-8 и фильмы 1-3) позволяет для точного определения местоположения и ориентации структур с ксилемы сетей на обоих вырезают образцы и жи.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Synchotron КТВР предоставляет завод биологи с мощным, неразрушающий инструмент для изучения внутренней работы завода сосудистую с невероятной детализацией. Эта технология была использована в последнее время для выявления ранее не описанных анатомических структур в виноградной лозе ксилемы, что дифференциально изменить подключение ксилемы сеть в различных видов виноградной лозы (Brodersen и др., 2012b, в печати.) - Это соединение может кардинально изменить способности сосудистой патогенов и эмболии расп.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Нам нечего раскрывать.

Благодарности

Авторы хотели бы поблагодарить S Castorani, AJ Eustis, GA Gambetta, CM Manuck, Z Насафи, и Зидан. Эта работа финансируется за счет: Департамент сельского хозяйства США, Служба сельскохозяйственных исследований Текущее финансирование информационной системы исследований (научно-исследовательский проект не 5306-21220-004-00; дополнительный источник света, при поддержке директора Управления науки, Управления Basic. Энергия наук, из Министерства энергетики США по контракту № DE-AC02-05CH11231). НИФА и особого культур исследовательская инициатива грант AJM.

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Смотрите перечисленные выше особенности оборудования на линии луча Advanced Light Source 8.3.2

Ссылки

  1. Brodersen, C. R., McElrone, A. J., Choat, B., Matthews, M. A., Shackel, K. A. The dynamics of embolism repair in xylem: in vivo visualizations using high resolution computed tomography. Plant Physiology. 154, 1088-1095 (2010).
  2. Brodersen, C. R., Lee, E., Choat, B., Jansen, S., Phillips, R. J., Shackel, K. A., McElrone, A. J., Matthews, M. A.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

3DAvizo8 3 0 2