Представляем основные материалы из выпуска журнала Journal of Visualized Experiments (JoVE) за октябрь 2012 года.
Grønlund и др. демонстрируют способ выделения и анализа специфических типов клеток в листьях растений, экспрессирующих зеленый флуоресцентный белок (GFP), с помощью метода сортировки клеток с помощью флуоресценции (FACS). Этот метод позволяет преодолеть влияние мешающей флуоресценции хлорофилла, содержащегося в листьях, и отличить экспрессирующие GFP протопласты от протопластов, не экспрессирующих GFP. В JoVE Neuroscience Babona-Pilipos и др. демонстрируют способ создания камеры для измерения гальванотаксиса, или миграции клеток в электрическом поле. С помощью таймлапс-визуализации и анализа изображений авторы изучают миграционное поведение нейральных клеток-предшественников в электрическом поле, что может привести к использованию электрической стимуляции для направления нейральных предшественников к местам повреждения или заболевания. Статьи, посвященные микрофлюидным платформам, составляют значительную часть публикаций в JoVE. Harris и др. выпустили три статьи, в которых описывается микрофлюидное устройство для отделения аксонов от тел нейронов. В этом месяце в JoVE Neuroscience Higashimori и др. используют данную микрофлюидную платформу для исследования взаимодействий между аксонами нейронов и глиальными клетками, которые имеют решающее значение для физиологической функции нервной системы. В JoVE Bioengineering две исследовательские группы демонстрируют новые биоадгезивные свойства хитозана — полимера, производного хитина, который содержится в клеточных стенках грибов или в экзоскелетах ракообразных и насекомых. Хитозан используется во многих промышленных и сельскохозяйственных целях, а биоинженеры также находят ему применение в хирургии. Foster и др. разработали активируемую лазером хирургическую пленку под названием Surgilux, которая сочетает в себе хитозан и индоцианин зеленый (ICG), фоточувствительный краситель. Эта хирургическая пленка после лазерного облучения прочно связывается с тканями, например с мышечной тканью. Lauto и др. разработали хирургическую пленку, сочетающую хитозан с фотоактивным красителем бенгальским розовым. Эта новая пленка также прочно связывается с тканями, например с кишечником, после облучения. Данные адгезивные пленки биосовместимы и потенциально могут быть использованы в различных хирургических процедурах вместо швов. В JoVE Clinical and Translational Medicine Fiema и др. демонстрируют высокопроизводительный метод валидации биомаркеров при реакции «трансплантат против хозяина» — распространенном и опасном для жизни осложнении при трансплантации клеток или тканей. Авторы используют коммерчески доступные методы ИФА (ELISA) для последовательного анализа нескольких белков. В JoVE Immunology and Infection Keyel и др. демонстрируют способ измерения кинетики иммунного ответа на бактериальные токсины в режиме реального времени с помощью высокоскоростной микроскопии живых клеток. Этот метод позволяет показать, как иммунные клетки реагируют на бактериальные токсины. В сочетании с высокоскоростной 3D-конфокальной микроскопией данный метод также позволяет визуализировать клеточный восстановительный ответ. В JoVE Applied Physics Borisenko и др. определяют электронную структуру сложных материалов с помощью фотоэлектронной спектроскопии с угловым разрешением на установке синхротронного излучения. Благодаря сочетанию последних достижений в области синхротронного излучения, физики поверхности и криогеники этот метод позволяет получить точное представление об энергии и импульсе электронов внутри твердого тела и ответить на ключевые вопросы в области физики конденсированного состояния. В данном обзоре кратко представлены лишь некоторые из наиболее значимых видеостатей, доступных в октябрьском номере JoVE за 2012 год. Для просмотра дополнительных видео, пожалуйста, посетите сайт www.jove.com.ønlund и др. демонстрируют способ изоляции и анализа специфических типов клеток в листьях растений, экспрессирующих зеленый флуоресцентный белок (GFP), с использованием метода сортировки клеток с активацией флуоресценции (FACS). Данный метод позволяет преодолеть влияние мешающей флуоресценции хлорофилла, содержащегося в листьях, и дифференцировать GFP-экспрессирующие протопласты от протопластов, не экспрессирующих GFP.
В JoVE Neuroscience Babona-Pilipos и соавторы демонстрируют, как сконструировать камеру для измерения гальванотаксиса, или миграции клеток в электрическом поле. С помощью тайм-лапс-визуализации и анализа изображений авторы могут изучать миграционное поведение нейральных клеток-предшественников в электрическом поле, что может привести к использованию электрической стимуляции для направления нейральных предшественников к местам повреждения или заболевания.
Статьи, посвященные микрофлюидным платформам, имеют значительную историю публикаций в JoVE. Harris et al. опубликовали три статьи, в которых описывается микрофлюидное устройство для отделения аксонов от тел нейронов. В этом месяце в JoVE Neuroscience Higashimori et al. используют эту микрофлюидную платформу для исследования взаимодействий между аксонами нейронов и глиальными клетками, которые имеют решающее значение для физиологической функции нервной системы.
В JoVE Bioengineering две исследовательские группы демонстрируют новые биоадгезивные свойства хитозана — полимера, производного хитина, который содержится в клеточных стенках грибов или в экзоскелетах ракообразных и насекомых. Хитозан применяется во многих промышленных и сельскохозяйственных целях, а биоинженеры также находят ему применение в хирургии. Фостер и др. разработали активируемую лазером хирургическую пленку Surgilux, которая сочетает в себе хитозан и индоцианин зеленый (ICG) — фоточувствительный краситель. Эта хирургическая пленка прочно прикрепляется к тканям, например к мышечной ткани, после лазерного облучения. Лауто и др. разработали хирургическую пленку, сочетающую хитозан с фотоактивным красителем бенгальским розовым. Эта новая пленка также прочно связывается с тканями, например с кишечником, после облучения. Данные адгезивные пленки биосовместимы и потенциально могут быть использованы в различных хирургических процедурах вместо швов.
В JoVE Clinical and Translational Medicine Fiema et al. демонстрируют высокопроизводительный метод валидации биомаркеров при болезни «трансплантат против хозяина» — распространенном и опасном для жизни осложнении при трансплантации клеток или тканей. Авторы используют коммерчески доступные наборы ELISA для последовательного анализа нескольких белков.
В разделе JoVE Immunology and Infection Keyel et al. демонстрируют способ измерения кинетики ответов иммунных клеток на бактериальные токсины в режиме реального времени с помощью высокоскоростной микроскопии живых клеток. Этот метод позволяет показать, как иммунные клетки реагируют на бактериальные токсины. В сочетании с высокоскоростной 3D-конфокальной микроскопией данный метод также позволяет визуализировать клеточный ответ при восстановлении.
В JoVE Applied Physics Борисенко и др. определяют электронную структуру сложных материалов с помощью фотоэлектронной спектроскопии с угловым разрешением на установке синхротронного излучения. Благодаря сочетанию последних достижений в области синхротронного излучения, физики поверхности и криогеники, этот метод позволяет получить точное представление об энергии и импульсе электронов внутри твердого тела и ответить на ключевые вопросы в области физики конденсированного состояния.
В данном обзоре представлены лишь некоторые из наиболее значимых видеостатей, доступных в выпуске JoVE за октябрь 2012 года. Чтобы посмотреть другие видео, пожалуйста, посетите сайт www.jove.com.