Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Широкое поле флуоресцентной микроскопии и флуоресцентной проточной цитометрии изображений на сотовый телефон

22.6K просмотров

DOI:

10.3791/50451

11 апреля 2013 г.

В этой статье

Краткое содержание

Мы рассматриваем наши последние результаты по интеграции флуоресцентной микроскопии и обработки изображений инструментов проточной цитометрии на мобильный телефон с помощью компактной и экономически эффективных оптико-жидкостный вложений. Эти сотовый телефон основе анализа микро-устройства могут быть полезны для цитометрии, таких как выполнение различных задач подсчета клеток, а также для высокопроизводительного скрининга, например, пробы воды в условиях ограниченных ресурсов.

Аннотация

Флуоресцентная микроскопия и проточной цитометрии широко используемые инструменты в биомедицинских исследованиях и клинической диагностики. Однако эти устройства в целом относительно громоздкие и дорогостоящие, что делает их менее эффективными в условиях ограниченных ресурсов. Для потенциально преодолеть эти ограничения, мы недавно продемонстрирована интеграция широкого поля флуоресцентной микроскопии и обработки изображений инструментов проточной цитометрии на сотовые телефоны с использованием компактного, легкого и экономически эффективных оптико-жидкостный вложений. В нашей конструкции проточной цитометрии, флуоресцентно меченые клетки промыть микрофлюидных канала, который расположен над существующими сотовый телефон камеры. С питанием от батареи светоизлучающих диодов (СИД) являются стыковых связан с этой стороны микрофлюидный чип, который эффективно действует как многомодовый волновод плите, где возбуждающего света направляется к равномерно возбуждения флуоресцентного целей. В сотовом телефоне камера записывает фильм промежуток времени флуоресцентных клеток, протекающего черезмикрофлюидных канала, где цифровые рамки этого фильма обрабатываются для подсчета количества меченых клеток в рамках целевой решение интереса. Используя аналогичный оптико-жидкостный дизайн, мы можем также изображения этих флуоресцентно меченых клеток в статическом режиме, например, сэндвич флуоресцентные частицы между двумя предметные стекла и захватив их флуоресцентные изображения с помощью мобильного телефона камеры, которая может достичь пространственного разрешения, например ~ 10 мкм на очень большой поля-зрения ~ 81 мм 2. Этот сотовый телефон основе флуоресцентной проточной цитометрии изображений и микроскопии платформа может быть полезно, особенно в условиях ограниченных ресурсов, например, для подсчета CD4 + Т-клетки к мониторингу ВИЧ + пациентов или для обнаружения водного паразитов в питьевой воде.

Введение

Микроскопии и проточной цитометрии широко используются методы 1-12 в биомедицинских и научных исследований, а также клинический диагноз для подсчета и характеристика различных типов клеток. Однако, обычные микроскопы и проточной цитометрии инструменты являются относительно сложными и дорогостоящими, что ограничивает их использование в основном устоявшихся центральной лаборатории. Недавно мы разработали компактный и легкий флуоресцентные цитометрии изображений и микроскопии устройства интегрированы на сотовый телефон, 13,14, который показывает обещание экономически эффективно переводить флуоресцентной микроскопии, проточной цитометрии и связанные....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

В этом разделе мы рассмотрим экспериментальные протоколы для наших мобильных телефонов основе широкого поля флуоресцентной микроскопии 13 и оптико-жидкостной цитометрии изображений платформе 14. Мы будем использовать флуоресцентные шарики и флуоресцентно меченые белые клетки крови, чтобы проверить эти изображения платформ.

А. Подготовка сотового телефона основании Широкие поля флуоресцентного микроскопа и оптико-жидкостный поток изображений Цитометр

Сотовый телефон на базе широкого поля флуоресцентного микроскопа или проточной цитометрии состоит из двух основных частей: камеры телефона и ком....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

С нашей оптико-жидкостный накачки / возбуждение схеме (рис. 1С и 1D), флуоресцентно меченых клеток может быть непрерывно доставляется в микрофлюидных канала с помощью шприца в то время как сотовый телефон камера записывает покадровой флуоресцентные микроскопических фильм течет клеток. Эти флуоресцентные фильмы могут быть быстро проанализированы с помощью контура обнаружения и отслеживания алгоритмов 14,15 автоматически определить абсолютное число и плотность клеток, протекающ.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Мы представили наши последние результаты на сотовый телефон основе широкого поля флуоресцентной микроскопии и оптико-жидкостный изображений проточной цитометрии с использованием легкого и компактного оптико-жидкостный вложения в мобильный телефон камеры. Использование этой технологической платформы мы отображаемого флуоресцентных объектов, включая микро-частицы и надписью белых кровяных клеток в образцах цельной крови. Таким образом, этот компактный и экономически эффективный мобильный телефон на основе флуоресцентных и.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Доктор Озджан является основателем старт-ап компании, которая направлена ​​на коммерциализацию вычислительной визуализации и микроскопии инструментов.

Благодарности

А. Озджан благодарит за поддержку Президента Ранняя карьера премии для ученых и инженеров (PECASE), армии Research Office (ARO) премия для молодых следователь, Национальный научный фонд (NSF) КАРЬЕРА Award, Управления морских исследований (ОНР) премия для молодых следователь и Национального института здоровья (NIH) Новый Новатор директора премии DP2OD006427 из канцелярии директора Национального института здоровья.

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Сотовый телефонSonySony Ericsson Aino
Плоско-выпуклый объективEdmund Optics# NT45-302
Асферический объективThorlab# C230TME-A
ФильтрEdmund Optics#NT54-46
Синий LEDDigikey#365-1201-ND
АккумуляторDigikey#P032-ND
Полистирольная трубкаFisher Scientific#05-408-129
Буфер для лизинга эритроцитовSigma AldrichR7757
SYLGARD 184 НАБОР СИЛИКОНОВЫХ ЭЛАСТОМЕРОВDow Corning
Red флуоресцентные шарики (10 μ m)Life Technologies#F8834
Зеленые флуоресцентные шарики (10 μ m)Life Technologies#F8836
флуоресцентное мечение нуклеиновых кислот SYTO16Life Technologies# S7578

Ссылки

  1. Sklar, L. A. Flow Cytometry for BioTechnology. , Oxford University Press Inc. (2005).
  2. Nunez, R. Flow cytometry for research scientists: principle and applications. , Horizon Press. Wymondham, UK. (2001).
  3. Mertz, J.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги