Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Фармакологического Индукционная эпидермального меланина и защиту кожи от ожогов в модели Humanized Mouse

18.2K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/50670

⸱

7 сентября 2013 г.

 ,  ,  , 
1The Markey Cancer Center, University of Kentucky College of Medicine, 2Graduate Center for Toxicology, University of Kentucky College of Medicine, 3Department of Molecular and Biomedical Pharmacology, University of Kentucky College of Medicine, 4Department of Pediatrics, University of Kentucky College of Medicine

В этой статье

Краткое содержание

Эпидермального меланина индуцируется местного применения форсколином в мышиной модели справедливой кожей УФ-чувствительных человека. Фармакологическое воздействие уровня цАМФ в коже и эпидермиса затемнение сильно защищают от УФ-опосредованного воспаления (загара) как измеряется минимальной эритематозной дозы (МЭД) анализа.

Аннотация

Справедливость кожи, чувствительности УФ и риском рака кожи все коррелируют с физиологической функции рецептора меланокортина 1, в G с связью сигнализации белок, содержащийся на поверхности меланоцитов. MC1R стимулирует аденилатциклазу и производство цАМФ, который, в свою очередь, до-регулирует пигментные выработку меланина в коже. Для изучения механизмов, посредством которых сигнализация MC1R защищает кожу от УФ травмы, это исследование опирается на мышиной модели с "гуманизированной кожи" на основе эпидермиса выражение фактора стволовых клеток (SCF). K14-SCF трансгенных мышей сохранить меланоциты в эпидермис и, следовательно, обладают способностью осаждаться меланина в эпидермисе. В этой модели на животных, дикого типа Состояния MC1R в надежной осаждения черного Эумеланин пигмента и фенотипа УФ-защитой. В отличие от этого, K14-SCF животные с дефектной сигнализации MC1R способности демонстрируют красный / блондинка пигментации, очень мало эумеланин в коже иУФ-чувствительный фенотип. Рассуждая, что Эумеланин отложение может быть повышена за счет местных средств, которые имитируют сигнализации MC1R, мы обнаружили, что прямое применение экстракта форсколином к коже MC1R-неполноценного справедливой кожей мышей привело к надежной Эумеланин индукции и УФ защиты 1. Здесь мы опишем способ получения и применения форсколином содержащий природный экстракт корня к K14-SCF светлокожих мышей и сообщить метод измерения чувствительности УФ путем определения минимального эритематозные дозу (MED). Используя эту модель животного, можно изучить, как эпидермальный цАМФ индукция и меланизации кожи влияют физиологические реакции на УФ-облучения.

Введение

Заболеваемость меланомой, наиболее смертоносная форма рака кожи, резко возросло за последние несколько десятилетий в Соединенных Штатах, особенно среди светлокожих лиц. Сильный молекулярной и эпидемиологические данные подразумевает УФ-излучения в качестве основного причинного фактора окружающей среды 2-5. Увеличенная экспозиция УФ в виде солнечного воздействия и использования солярий, вероятно, будет ответственен за большую часть увеличения заболеваемости меланомой 6-7. Меланома риск кажется особенно связано с солнечных ожогов 8, особенно тех, в начале жизни 9-10. Риск загара связана не только с дозы и интенсивность ультрафиолетового облучения, но и наследственными факторами, которые влияют кожную реакцию на УФ-излучения. Пигментация кожи является одним из наиболее важных факторов, определяющих чувствительность УФ, риск солнечных ожогов и риском рака. Меланома встречается примерно в двадцать раз чаще у светлокожих людей по сравнению с темнокожей индивидовLs 11-13.

Меланин, пигмент производится меланоцитов в эпидермисе, является основным фактором, определяющим кожи лица. Меланин поставляется в двух основных вариантах: (1) Эумеланин, темно-коричневый / черный пигмент эффективно поглощает энергию УФ-излучения, и (2) феомеланин, красновато / блондинка пигментных менее эффективными в предотвращении проникновения ультрафиолетовых фотонов в кожу. Цвет кожи, чувствительность УФ и риск меланомы во многом определяются эпидермального Эумеланин содержания 14-15. Чем больше эумеланин в эпидермисе, тем меньше УФ фотоны могут проникать в кожу. Из-за низких врожденных уровнях эумеланин, светлокожие люди гораздо более склонны к острой и хронической воздействия УФ-излучения 16-18.

Пигментации кожи, риск меланомы и способность "загар" после УФ-облучения все коррелируют с возможностью передачи сигналов от рецептора меланокортина 1 (MC1R), G с связью семь трансмембранных сПоверхность рецептор на меланоцитов 19-22. Когда MC1R связывает его родственный высокого сродства лиганда, α-меланоцит стимулирующий гормон (α-МСГ), происходит активация аденилатциклазы и производства вторичного мессенджера цАМФ 23. Нормальная физиологическая реакция кожи после воздействия УФ-излучения включает эпидермальный производство α-МСГ по кератиноцитов 24-29. Мы и другие предполагают, что кератиноцитов, полученных α-MSH связывается с MC1R на эпидермальных меланоцитов, инициируя вниз по течению производство вторичного мессенджера цАМФ через активацию аденилатциклазы 30. уровни цАМФ контролировать многие аспекты меланоцитов дифференциации, в том числе путей выживания, репарации ДНК и синтеза пигмента. Сигнализации MC1R и цАМФ четко вызывают уровни фермента пигментные и производство Эумеланин. Когда сигнализация MC1R не поврежден и меланоцитарных уровни цАМФ являются надежными, эумеланин производится и кожа темнеет. Однако, если сигнализация MC1R неисправен ицитоплазматические уровни цАМФ остаются низкими, феомеланин производится вместо 1. Синтез Эумеланин можно стимулировать фармакологически агентами, которые повышают уровни цАМФ 1,14,31-35.

Поскольку белок MC1R является главным регулятором риска меланомы у людей 36-46, мы заинтересованы в механизмах, с помощью которых MC1R защищает меланоциты воздействию ультрафиолетового излучения канцерогенеза. В качестве основы для наших исследований, мы получили трансгенного MC1R-вариант мышиной модели на чистом C57BL / 6 генетического фона 1. В этой модели, фактор клеток (SCF) стволовых конститутивно экспрессируется в базальных эпидермиса и эпидермиса интерфолликулярной меланоциты сохраняются в коже на протяжении всей жизни 47, в отличие от не-трансгенных мышей, в котором меланоциты локализуются в дерме в волосяных фолликулах. С трансген K14-Scf включены, эпидермис становится пигментированные с конкретным меланина пигментов характеристики пигменташтамм животного 1. К14-SCF мышей на генетическом фоне C57BL / 6 с дикого типа MC1R сигнализации были черные как смоль кожи характеризуется очень высоким уровнем Эумеланин пигмента. Не удивительно, что эти животные обладают высокой УФ-излучению. Напротив, генетически подобранные K14-SCF C57BL / 6 животных, которые укрывают мутантный неактивный MC1R почти не эумеланин в эпидермисе. Вместо этого, эти "Расширение" животные (MC1R э / е) есть справедливый характер кожи, вызванное отложением феомеланин пигмента (рис. 1А) и являются гораздо более УФ-чувствительных 48-49.

Фармакологические соединения с химическими свойствами, которые позволяют проникновению в кожу, как было показано мощно индуцировать эумеланин в расширении (MC1R е / е) K14-SCF модели животных путем непосредственного манипулирования уровни цАМФ в эпидермальных меланоцитов в коже. Меланин регуляция в этой модели был гeported путем активации аденилатциклазы 1, а также ингибирования фосфодиэстеразы 4 35. В этой статье мы покажем, подготовку и местное применение форсколином в расширении (MC1R э / э) K14-SCF животные, какая модель со светлой кожей УФ-чувствительных людей. Мы покажем, что два раза в день применение препарата способствует ускоренной меланизации, что кожа потемнение связано с эпидермального осаждения пигмента меланина и, что индуцированное эпидермального меланина защищает от УФ-индуцированной загара через измерение «минимального эритематозной дозы» (МЭР) 48.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

1. Подготовка Форсколин для местного применения из сырой экстракт корня от Plectranthus ЬагЬаШз (Cohleus Forskohlii) завод

  1. Протоколы для мышиных экспериментов в соответствии с руководящими для этического поведения в уходе и использовании животных и были утверждены Комитетом Институциональная уходу и использованию животных в Университете Кентукки (Протокол № 00768M2004) на. Экстракт корня состоит в 40% масса / объем в стандартном дерматологической базе 70% этанолом, 30% пропиленгликоля.
  2. Взвесьте 200 г экстракта корня сырой форсколином и передать его в стакан. Чтобы 500 мл 40% (вес / объем) раствор, ресуспендируют 200 г экстракта корня сырой добавлением форсколина большинство, но не все из объема транспортного средства (70% этанол, 30% пропиленгликоль) и довести раствор до примерно 450 мл.
  3. Перемешивают в течение часа при комнатной температуре. Решение будет несколько вязким и может потребовать ручной агитацию «поднять» экстракта в раствор домешалку способен взять на себя.
  4. После часа перемешивании влить смесь в градуированный цилиндр и довести объем до 500 мл с помощью транспортного средства, которая была использована для "промыть" стакан, который был использован для перемешивания суспензии (для максимального восстановления форсколином от стакана) .
  5. Передача суспензии до 50 мл полипропиленовые центрифужные пробирки. Центрифуга (1500 XG, комнатная температура, 15 мин), используя настольный центрифуги. В этот момент нерастворимый материал будет достаточно уплотнен, что позволяет супернатант, чтобы быть легко сливают.
  6. Раствор фильтруют через ацетат целлюлозы мембраны 0,22 мкм, чтобы удалить остатки нерастворимого материала из экстракта. Мы используем систему бутылка-топ, предназначенный для культуры клеток, наряду с использованием фильтров предварительной очистки, которые приходят вместе с устройством для предотвращения преждевременного засорения мембраны от нерастворимых компонентов экстракта корня. При принятии больших объемов экстракта, отфильтровать около 100 мл за один раз, меняя предварительной очистки ставкуWEEN каждый добавил объем.
  7. При хранении при комнатной температуре, экстракт сохраняет биологическую активность на срок до одного года.

2. Подготовка C57BL / 6 К14-Scf мышей для местного лечения

  1. Удалить спинной мех у животных электрическим стрижки. Кратко обезболить животных с легочной изофлураном для облегчения стрижки спинной меха с электрическими ножницами оснащенных 0,25 мм хирургического подготовительной головы (Fisher Scientific). Предпочтительно использовать только один тип анестезии (например кетамин / ксилазина), чтобы минимизировать риск анестезии передозировки. Насыщенный ингаляции камера осуществляет профессионального риска при использовании вне вытяжной шкаф и поставляет неизвестные количество анестетика для животных. В идеале точность испаритель должен быть использован.
  2. Для удаления остатков стерни волос, лечить животных с химическим удаления волос. Администрирование анестезии животного с внутрибрюшинной инъекции кетамина 40 мг / кг и ксилазина 4 мг / кг
  3. После того, как животные адекватно наркозом (если судить по ног крайнем случае), нанесите пальца размера количество депиляции кремом для стриженой спинной кожи с помощью палец в перчатке. Натрите крем в кожу в течение 30-60 сек или до волоски можно ясно увидеть в креме, как это в настоящее время переехал вокруг. Оставьте крем на только для минимального количества времени, необходимого для удаления волос, как длительное воздействие приводит к химической жжения кожи, поломки эпидермиса и смерти от потери целостности эпидермиса.
  4. Протрите спинной кожи насыщенных водой марлевые прокладки, пока все сливки не была удалена. Сухие животные, использующие мягкие бумажные полотенца, и дать им возможность восстановить в теплом уединенном месте (например чистые клетки помещают на потепление площадку). Депилировать животных один за одним и внимательно следить на протяжении всей процедуры.

3. Актуальные администрация форсколина или управления транспортным средством

  1. Животные должны рассматриваться по одному. Кратко обезболить с вдохг изофлюран с помощью манипулятора мышь на вершине формы оборудованная нейлона воздухопроницаемой фильтр под который был разместила ИФ-насыщенный бумажное полотенце в изофлурана насыщенной веками ясной стеклянной банке в вытяжной шкаф. Защиту мышь, чтобы изофлуран в течение достаточного времени, чтобы подавить добровольных мышечных движений, но сохранить спонтанного дыхания (обычно 10-20 сек). Оставив животное в изофлураном слишком долго может привести к дыхательной подавления и смерти. Лучше ошибиться в сторону "собирается свет" и необходимости повторного подвергайте мышь кратко дополнительной изофлураном, а не к переэкспонировать животное до смерти наркотиками и риска.
  2. Снимите животное от изофлурана камеры и поместите на чистую абсорбирующего скамейке площадку.
  3. Использование 1000 мкл микропипетки оборудованием с одноразового наконечника полипропилена, составить 400 мкл 40% неочищенного экстракта форсколином (управления транспортным средством животные получат 70% этанола, 30% пропилена в одиночку гликоль).
  4. Трансфер выписку наЗадняя часть животного происхождения капает его на кожу, а затем, используя сторону кончика пипетки, намазать экстракта над кожу спины, пока вся кожа не была покрыта. Там нет необходимости, чтобы промокните кожу после применения.
  5. Вернуться мышь в клетку, и внимательно наблюдать, пока она не оправится от анестезии.
  6. Для того, что не-пигментные эффекты цАМФ не должны посрамить УФ экспериментов по оценке чувствительности, прекратить все актуальные лечения за 2 дня до ультрафиолетового облучения (пигмент эффект длится несколько дней за последний местного лечения).

4. Цвет кожи Измерение с помощью зеркальной колориметрии

  1. Кратко обезболить мышь с вдыхаемым изофлураном (см. выше).
  2. Калибровка колориметр Minolta, поместив портативный головой о стандартизированной белой поверхности, снабженной колориметра.
  3. Поместите портативный измерительную головку колориметра флеш с спинной кожи животного, обеспечивая, что круглый проема 1 см 2е полностью прижимают к коже. Взять хотя бы три отдельных измерений в различных областях спинного кожи.
  4. Рассчитать среднюю L * счет ± стандартное отклонение на одно животное и в группе лечения. Светоотражающие колориметрию можно сделать в любой момент в эксперименте.

5. Определение УФ Чувствительность по расчету "Минимальная Эритематозные дозы" (MED)

  1. Использование животных, которые были предварительно обрабатывают либо носителем или форсколина, как описано выше. Обезболить животных с внутрибрюшинной инъекции стандартной смеси кетамина и ксилазина (см. выше).
  2. Подготовьте кусок УФ-окклюзионной ленты для тестирования MED. Для создания отверстий в ленте используйте тяжелых дырокол с 1 см 2 круговой вырез (рис. 2A и B). Имея отверстия определенного размера и симметричным расположением в ленте облегчает признание изменений кожи после облучения. За каждое отверстие в ленте, нанесите небольшое, но легко съемный кусок ленты, которую можно снять в определенное время в течение ультрафиолетового облучения, чтобы позволить введение различных доз УФ.
  3. После того, как животные адекватно отключке, место ленту на поверхности спинного. Глаз смазка всегда должны быть использованы под наркозом.
  4. Включите УФ источника, состоящей из двух Westinghouse F15T8UV-B лампы с пиковой мощностью 313 нм, а также ряд 280-370 нм. Дайте лампе, чтобы уравновесить в постоянной мощностью УФ при измерении с помощью УФ-фотометра с датчиком UVB (как правило, занимает несколько минут для ламп, чтобы согреться).
  5. На основании скорости передачи ультрафиолетового как измерено УФ-фотометр, вычислять время экспозиции УФ для каждого требуемого дозы. Например, выходные меры UVB нашей лампы 2,4 мВт / см 2. Поэтому, чтобы управлять 5 кДж / м 2, кожа должны быть подвержены 208 сек (который является 3 мин и 28 сек) от УФ-излучения, рассчитанный ниже:
    upload/50670/50670eq1.jpg "/>
  6. Наведите седации животных (каждый с окклюзионной ленты в месте) брюшной поверхности вниз, чтобы гарантировать даже воздействие УФ лучей. Для администрирования выбранные дозы УФ-излучения, последовательно удалить небольшие окклюзионные лент, охватывающих отверстия, чтобы выставить 1 см 2 участки кожи на правильные доз радиации. Таким образом, в приведенном выше примере, если 40 кДж / м 2 является крупнейшим доза в эксперименте, то животное будет под лампой в течение 27 минут и 47 общей сек и кожи в 40 кДж / м 2 состоянии не будет иметь вышележащих ленту все время. Тем не менее, лента, закрывающая 5 кДж / м 2 состояние будет удален, когда есть 208 сек оставаясь в экспозиции. Сроки снятия ленты должно быть сделано таким образом, что каждое условие концов одновременно.
  7. После УФ-облучения, снимите ленту с спинной кожи осторожно, стараясь не разорвать кожу внезапных или чрезмерно силовых движений. Поместите животных в теплом тихом месте, чтобы позволитьвосстановление после анестезии.
  8. Монитор мышей в течение 24-48 часов, чтобы искать дискретных областей эритема (покраснение) или отек (отек), соответствующие анатомических объектах, подверженных конкретной дозы УФ-облучения. Документ выводы кожи фотографически.
  9. Значение MED соответствует минимальной дозы УФ, которое вызывает воспаление как определено эритема и / или отек всей открытой круга кожи. Обратите внимание, что пигментация кожи может оспорить определение MED, однако, эритема и отек может еще вообще быть точно оценены, во многом благодаря установленному формы отверстий в ленте во время ультрафиолетового облучения.

6. Статистический анализ

Анализ данных между когорт мышей в одну сторону ANOVA с Бонферрони сообщению теста (График Pad Prism). Значений р <0,05 считаются статистически значимыми.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

C57BL / 6 мышей были получены на eumelanotic, pheomelanotic или беспигментный слоев, включающих трансген K14-SCF, как описано (фиг.1А). Когорты светлокожего расширения (MC1R е / е, Tyr + / +) мышей обрабатывали местно дважды ежедневных доз либо носитель (70% этанола, 30% пропиленгликоль) или 40% сырой Coleus Forskohlii экстракта корня (80 мкМ за доза) в течение 5 дней (фиг. 2b). Влияние местного лечения на эпидермальный пигментации были определены...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Использование животную модель справедливой кожей человека, мы находим, что местное применение в форсколином богат сырой экстракт корня решительно темнеет эпидермис, стимулируя выработку меланина в коже. Эпидермального меланизации зависит от экспрессии фактора стволовых клеток в базальном эпидермисе, как это происходит в коже человека, но не в генетически немодифицированного кожу мыши. Спинной кожи генетически немодифицированного мышей отсутствует достаточное количество межфолликулярного меланоцитов, чтобы придать пигмен...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы заявляют, что они не имеют конкурирующие финансовые интересы.

Благодарности

Авторы хотели бы поблагодарить Малинда Spry для оказания технической помощи. Мы также признаем, текущих и прошлых источников финансирования: Национальный институт рака (R01 CA131075, R01 CA131075-02S1), исследований Case фонд Венди Уилл Рак, Фонд борьбы с раком Марки, Детский Чудо Сеть и Дженнифер и Дэвид Диккенс Меланома исследовательский фонд.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Reagents
Coleus Forskoli экстракт 20%Buckton Scott США Inc.н/дПринстон, Нью-Джерси
Изотезия, Изофлуран, USPButler ScheinNCD 11695-6776-1Дублин, Огайо, США
Введение аназина ксилазинаLA04612Шенандоа, Айова, США
кетамина гидрохлорид, USPPutneyNDC 26637-411-01Сент-Джозеф, Миссури, США
EthanolDecon Labs.2705
ПропиленгликольAdesco05751LSolon, OH, США
крем для депиляции, NairChurch DwightJF-11 4381322Priceton, NJ
EQUIPMENT
Бактерицидная ртутная лампа UV-BWestinghouseF15T8UV-B
Радиометр фотометрМеждународный свет1LT400AПибоди, Массачусетс, США
ХромаметрKonica MinoltaCR-400Рамси, Нью-Джерси, США
Процессор данных для хроматометра CR-400Konica MoniltaDR-400Рамси, Нью-Джерси, США

Ссылки

  1. D'Orazio, J. A., et al. Topical drug rescue strategy and skin protection based on the role of Mc1r in UV-induced tanning. Nature. 443, 340-344 (2006).
  2. Gallagher, R. P., et al. Suntan, sunburn, and pigmentation factors and the frequency of acquired melanocytic nevi in children. Similarities to melanoma: the Vancouver Mole Study. Arch Dermatol. , 126-770 (1990).
  3. Kraemer, K. H., Lee, M. M., Andrews, A. D., Lambert, W. C. The role of sunlight and DNA repair in melanoma and nonmelanoma skin cancer. The xeroderma pigmentosum paradigm. Arch Dermatol. 130, 1018-1021 (1994).
  4. Wang, Y., et al. Evidence of ultraviolet type mutations in xeroderma pigmentosum melanomas. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 106, 6279-6284 (2009).
  5. Pleasance, E. D., et al. A comprehensive catalogue of somatic mutations from a human cancer genome. Nature. 463, 191-196 (2009).
  6. Weinstock, M. A., Fisher, D. E. Indoor ultraviolet tanning: what the data do and do not show regarding risk of melanoma and keratinocyte malignancies. J. Natl. Compr. Canc. Netw. 8, 867-873 (2010).
  7. Fisher, D. E., James, W. D. Indoor tanning--science, behavior, and policy. N. Engl. J. Med. 363, 901-903 (2010).
  8. Pfahlberg, A., Kolmel, K. F., Gefeller, O. Timing of excessive ultraviolet radiation and melanoma: epidemiology does not support the existence of a critical period of high susceptibility to solar ultraviolet radiation- induced melanoma. Br. J. Dermatol. 144, 471-475 (2001).
  9. Lew, R. A., Sober, A. J., Cook, N., Marvell, R., Fitzpatrick, T. B. Sun exposure habits in patients with cutaneous melanoma: a case control study. J. Dermatol. Surg. Oncol. 9, 981-986 (1983).
  10. Autier, P., Dore, J. F. Influence of sun exposures during childhood and during adulthood on melanoma risk. EPIMEL and EORTC Melanoma Cooperative Group. European Organisation for Research and Treatment of Cancer. Int. J. Cancer. 77, 533-537 (1998).
  11. Udayakumar, D., Mahato, B., Gabree, M., Tsao, H. Genetic determinants of cutaneous melanoma predisposition. Semin. Cutan. Med. Surg. 29, 190-195 (2010).
  12. Psaty, E. L., Scope, A., Halpern, A. C., Marghoob, A. A. Defining the patient at high risk for melanoma. Int. J. Dermatol. 49, 362-376 (2010).
  13. Tucker, M. A. Melanoma epidemiology. Hematol. Oncol. Clin. North Am. 23, 383-395 (2009).
  14. Abdel-Malek, Z. A., Knittel, J., Kadekaro, A. L., Swope, V. B., Starner, R. The melanocortin 1 receptor and the UV response of human melanocytes--a shift in paradigm. Photochem. Photobiol. 84, 501-508 (2008).
  15. Suzuki, I., et al. Participation of the melanocortin-1 receptor in the UV control of pigmentation. J. Investig. Dermatol. Symp. Proc. 4, 29-34 (1999).
  16. Gibson, G. E., Codd, M. B., Murphy, G. M. Skin type distribution and skin disease in Ireland. Ir. J. Med. Sci. 166, 72-74 (1997).
  17. Evans, R. D., et al. Risk factors for the development of malignant melanoma--I: Review of case-control studies. J. Dermatol. Surg. Oncol. 14, 393-408 (1988).
  18. Pack, G. T., Davis, J., Oppenheim, A. The relation of race and complexion to the incidence of moles and melanomas. Ann. N.Y. Acad. Sci. 100, 719-742 (1963).
  19. Valverde, P., Healy, E., Jackson, I., Rees, J. L., Thody, A. J. Variants of the melanocyte-stimulating hormone receptor gene are associated with red hair and fair skin in humans. Nat. Genet. 11, 328-330 (1995).
  20. Rees, J. L., Healy, E. Melanocortin receptors, red hair, and skin cancer. J. Investig. Dermatol. Symp. Proc. 2, 94-98 (1997).
  21. Beaumont, K. A., et al. Melanocortin MC(1) receptor in human genetics and model systems. Eur. J. Pharmacol. 660, 103-110 (2011).
  22. Palmer, J. S., et al. Melanocortin-1 receptor polymorphisms and risk of melanoma: is the association explained solely by pigmentation phenotype? Am. J. Hum. Genet. 66, 176-186 (2000).
  23. Haskell-Luevano, C., et al. Compounds that activate the mouse melanocortin-1 receptor identified by screening a small molecule library based upon the beta-turn. J. Med. Chem. 42, 4380-4387 (1999).
  24. Yamaguchi, Y., Hearing, V. J. Physiological factors that regulate skin pigmentation. Biofactors. 35, 193-199 (2009).
  25. Eves, P. C., MacNeil, S., Haycock, J. W. alpha-Melanocyte stimulating hormone, inflammation and human melanoma. Peptides. 27, 444-452 (2006).
  26. Slominski, A., Wortsman, J., Luger, T., Paus, R., Solomon, S. Corticotropin releasing hormone and proopiomelanocortin involvement in the cutaneous response to stress. Physiol. Rev. 80, 979-1020 (2000).
  27. Slominski, A., Wortsman, J. Neuroendocrinology of the skin. Endocr. Rev. 21, 457-487 (2000).
  28. Luger, T. A., et al. Role of epidermal cell-derived alpha-melanocyte stimulating hormone in ultraviolet light mediated local immunosuppression. Ann. N.Y. Acad. Sci. 885, 209-216 (1999).
  29. Chakraborty, A. K., et al. UV light and MSH receptors. Ann. N.Y. Acad. Sci. 885, 100-116 (1999).
  30. Cui, R., et al. Central Role of p53 in the Suntan Response and Pathologic Hyperpigmentation. Cell. 128, 853-864 (2007).
  31. Imokawa, G., Yada, Y., Hori, Y. Induction of melanization within hair bulb melanocytes in chinchilla mutant by melanogenic stimulants. J Invest Dermatol. 91, 106-113 (1988).
  32. Siegrist, W., et al. Interactions of alpha-melanotropin and agouti on B16 melanoma cells: evidence for inverse agonism of agouti. J. Recept. Signal Transduct Res. 17, 75-98 (1997).
  33. Abdel-Malek, Z., et al. The melanocortin-1 receptor is a key regulator of human cutaneous pigmentation. Pigment Cell Res. 13, Suppl 8. 156-162 (2000).
  34. Wood, J. M., Gibbons, N. C., Schallreuter, K. U. Melanocortins in human melanocytes. Cell Mol Biol (Noisy-le-grand). 52, 75-78 (2006).
  35. Khaled, M., Levy, C., Fisher, D. E. Control of melanocyte differentiation by a MITF-PDE4D3 homeostatic circuit. Genes Dev. 24, 2276-2281 (2010).
  36. Ghiorzo, P., et al. MC1R variation and melanoma risk in relation to host/clinical and environmental factors in CDKN2A positive and negative melanoma patients. Exp. Dermatol. , (2012).
  37. Cust, A. E., et al. MC1R genotypes and risk of melanoma before age 40 years: a population-based case-control-family study. Int. J. Cancer. 131, E269-E281 (2012).
  38. Ibarrola-Villava, M., et al. Genetic analysis of three important genes in pigmentation and melanoma susceptibility: CDKN2A, MC1R and HERC2/OCA2. Exp Dermatol. 19, 836-844 (2010).
  39. Scherer, D., et al. Melanocortin receptor 1 variants and melanoma risk: A study of 2 European populations. Int. J. Cancer. , (2009).
  40. Hoiom, V., et al. MC1R variation and melanoma risk in the Swedish population in relation to clinical and pathological parameters. Pigment Cell Melanoma Res. 22, 196-204 (2009).
  41. Galore-Haskel, G., et al. MC1R variant alleles and malignant melanoma risk in Israel. Eur. J. Cancer. 45, 2015-2022 (2009).
  42. Sturm, R. A. Skin colour and skin cancer - MC1R, the genetic link. Melanoma Res. 12, 405-416 (2002).
  43. Kennedy, C., et al. Melanocortin 1 receptor (MC1R) gene variants are associated with an increased risk for cutaneous melanoma which is largely independent of skin type and hair color. J. Invest. Dermatol. 117, 294-300 (2001).
  44. Box, N. F., et al. MC1R genotype modifies risk of melanoma in families segregating CDKN2A mutations. Am. J. Hum. Genet. 69, 765-773 (2001).
  45. Rees, J. L. The melanocortin 1 receptor (MC1R): more than just red hair. Pigment Cell Res. 13, 135-140 (2000).
  46. Valverde, P., et al. The Asp84Glu variant of the melanocortin 1 receptor (MC1R) is associated with melanoma. Hum. Mol. Genet. 5, 1663-1666 (1996).
  47. Kunisada, T., et al. Transgene expression of steel factor in the basal layer of epidermis promotes survival, proliferation, differentiation and migration of melanocyte precursors. Development. 125, 2915-2923 (1998).
  48. Vanover, J. C., et al. Stem cell factor rescues tyrosinase expression and pigmentation in discreet anatomic locations in albino mice. Pigment Cell Melanoma Res. 22, 827-838 (2009).
  49. Spry, M. L., et al. Prolonged treatment of fair-skinned mice with topical forskolin causes persistent tanning and UV protection. Pigment Cell Melanoma Res. 22, 219-229 (2009).
  50. Takayama, H., La Rochelle, W. J., Anver, M., Bockman, D. E., Merlino, G. Scatter factor/hepatocyte growth factor as a regulator of skeletal muscle and neural crest development. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 93, 5866-5871 (1996).
  51. Kunisada, T., et al. Murine cutaneous mastocytosis and epidermal melanocytosis induced by keratinocyte expression of transgenic stem cell factor. J. Exp. Med. , 187-1565 (1998).
  52. Takeuchi, T., Kobunai, T., Yamamoto, H. Genetic control of signal transduction in mouse melanocytes. J. Invest. Dermatol. 92, 239S-242S (1989).
  53. Ozeki, H., Ito, S., Wakamatsu, K., Hirobe, T. Chemical characterization of hair melanins in various coat-color mutants of mice. J. Invest. Dermatol. 105, 361-366 (1995).
  54. Lamoreux, M. L., Wakamatsu, K., Ito, S. Interaction of major coat color gene functions in mice as studied by chemical analysis of eumelanin and pheomelanin. Pigment Cell Res. 14, 23-31 (2001).
  55. Barbini, P., et al. Instrumental measurement of skin colour and skin type as risk factors for melanoma: a statistical classification procedure. Melanoma Res. 8, 439-447 (1998).
  56. Takiwaki, H. Measurement of skin color: practical application and theoretical considerations. J. Med. Invest. 44, 121-126 (1998).
  57. Anderson, R. R., Parrish, J. A. The optics of human skin. J. Invest. Dermatol. 77, 13-19 (1981).
  58. Rubegni, P., et al. Relationship between skin color and sun exposure history: a statistical classification approach. Photochem. Photobiol. 65, 347-351 (1997).
  59. Chen, J., Hammell, D. C., Spry, M., D'Orazio, J. A., Stinchcomb, A. L. In vitro skin diffusion study of pure forskolin versus a forskolin-containing Plectranthus barbatus root extract. J. Nat. Prod. 72, 769-771 (2009).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

1K14 ScfUVB
Фармакологического Индукционная эпидермального меланина и защиту кожи от ожогов в модели Humanized Mouse
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.