Все более широкое использование данио в качестве животной модели требует разработки эффективных методов для доставки известных количеств соединений и решений. Желудочный зонд описанной ниже процедуры позволяет пероральной доставки точной объемы раствора надежно, безопасно и эффективно для взрослых данио.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Gavaging взрослых данио рерио
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Данио стала важной в естественных условиях модель в биомедицинских исследованиях. Эффективные методы должны быть разработаны и использованы для доставки соединений или агентов в растворах для научных исследований. Современные методы введения соединений устно взрослых данио являются неточными из-за изменчивости добровольное потребление рыбы. Зонда была разработана процедура обеспечивает точное количество инфекционных агентов данио для исследования в биомедицинских исследованиях. Взрослых данио в течение 6-месячного возраста анестезировали 150 мг / л буфера MS-222 и которым вводили 5 мкл раствора с использованием гибких труб имплантации катетера прикреплен к сокращению 22-G иглы. Гибкий шланг был опущен в полости рта данио до кончика трубки продлил мимо жабры (около 1 см). Затем раствор медленно вводят в желудочно-кишечном тракте. Этот метод был эффективным 88% времени, с рыбой восстановления без осложнений. ЭтоПроцедура также эффективна, как один человек может зондовым 20-30 рыб в течение одного часа. Этот метод может использоваться, чтобы точно управлять средств по поводу инфекционных заболеваний исследования или исследования других соединений в взрослых данио.
Введение
Современные методы введения соединений устно данио включают введение соединений верхним покрытием на корм, смешанный в желатиновые диеты 1, bioencapsulated в артемии 2, смешанные с липидной инкапсулированные диет 3, воск спрей бисера 4 и через клейковины на основе диеты. 5 Ограничения этих методов перорального введения включают высокие темпы выщелачивания и неполным или непредсказуемые соединения потребления отдельных рыб. Эти переменные являются проблематичным, поскольку в исследованиях инфекционных болезней, зная, инфекционная доза вводится рыба может иметь решающее значение для успеха исследования. Кроме того,....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
1. Подготовка раствора анестетика
- Готовят раствор 150 мг / л MS-222 в системе вода либо из исходного раствора, или из порошкообразной форме.
- Убедитесь, что рН с использованием рН-метра.
- Буфер с бикарбонатом натрия мере необходимости, пока значение рН не находится в пределах 7-7,5.
- Подготовьте бачок системы воды, не содержащей MS-222 для рыбы, чтобы восстановить дюйма время восстановления, как правило, менее 1 мин.
2. Подготовка зонда аппарата
- Вырезать ясно 22-G имплантации трубки к немного больше, чем приблизительная длина от устья до кишечной лампы рыбы. Первоначально, мы предлага....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Оба пола рыб, в том числе беременные самки были успешно через желудочный зонд (рис. 1). Успешная процедура занимает менее одной минуты, не видел выхода жидкости жабры или рот. Трубка входит легко, без силы, без крови видели на удалении катетера. Процедура быстрого, требующий примерно 10 мин с зондовым от 3 до 4 рыбы, в среднем 30-45 сек на рыбу.
Данио рерио не должны через желудочный зонд с более чем 5 мкл любое решение. Через зонд 10 мкл решений привел лишь 50% успеха
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Значение
Этот метод улучшения и обеспечивает несколько преимуществ по сравнению с двумя ранее описанных методов gavaging взрослых данио. Во-первых, использование губки сдерживать рыбы позволяет одному человеку для выполнения процедуры, в отличие от описанных ранее метод, требующий двух человек. 7 Во-вторых, трубки катетера имплантации является более гибким, чем катетеры, которые могут помочь минимизировать вторичные травмы из-за перфорации по аналогии с использованием тупым наконечни.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих финансовых интересов.
Благодарности
Университет Рокфеллера Сравнительный Bioscience Центр оказал поддержку этому проекту. Мы благодарим Janelle Monnas за техническую помощь.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Equipment | |||
| A sponge | |||
| 1-cc luer lock шприц | Becton Dickinson Co | ||
| 22-G Micro-Renathane Implantation Tubeing (cut) | Braintree Scientific, Inc. | ||
| 1 игла 22-G (резать, если нужно) | Becton Dickinson Co | ||
| pH-метр | Зонд Ханна 1 | ||
| лезвие | |||
| [header] | |||
| Reagent/Material | |||
| MS-222 (Finquel) | Argent Laboratories | ||
Ссылки
- Royes, J. -A. B., Chapman, F. Preparing Your Own Fish Feeds. , Department of Fisheries and Aquatic Sciences, Florida Cooperative Extension Service, Insitute of Food and Agricultural Sciences, University of Florida. (2009).
- Gomez-Gil, B., Cabanillas-Ramos, J., Paez-Brambila, A., Roque, A. Standardization of th....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
