Сообщалось Синтез и изготовление electrospun длинных волокон, охватывающих большую месторождения через новый дизайн коллектора от нового биоразлагаемого полимера под названием поли (глицерин-додеканоат) (ПГД). Волокна были способны поддерживать рост клеток, полученных из мышиных плюрипотентных стволовых клеток.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Electrospun волокнистых Строительные леса поли (глицерин-dodecanedioate) инженерного нервных тканях От эмбриональных стволовых клеток мыши
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Для тканевой инженерии, подготовка биоразлагаемых и биосовместимых лесов является наиболее желательным, но сложной задачей. Среди различных методов изготовления, электропрядения является наиболее привлекательным благодаря своей простоте и универсальности. Кроме того, нановолокна имитировать размер естественной внеклеточного матрикса, обеспечивающего дополнительную поддержку за выживание и рост клеток. Это исследование показало, жизнеспособность изготовления длинных волокон, охватывающих большую депозит область для нового биоразлагаемого и биосовместимого полимера под названием поли (глицерин-додеканоат) (PGD) 1 с помощью новой конструкции коллектора для электропрядения. PGD демонстрирует уникальные упругие свойства с подобными механическими свойствами в нервной ткани, таким образом, она подходит для нейронных тканевой инженерии. Синтез и изготовление установка для изготовления волокнистых строительных лесов материалов был прост, легко воспроизводимым, и недорого. В биосовместимоститестирование, клетки, полученные из мышиных эмбриональных стволовых клеток может придерживаться и растут на electrospun ПГД волокон. Таким образом, этот протокол предоставляет универсальный способ изготовления для изготовления ПГД electrospun волокна для поддержки роста эмбриональных стволовых клеток мыши, полученных нейронального происхождения клеток.
Введение
Электропрядения является одним из эффективных методов обработки для получения микро-к-нанометра каркасов размер волокна. Основной принцип электроформования включает в себя Taylor конус раствором, который проходит в отверстие иглы с применением высокого напряжения между кончиком иглы и заземленной коллектора. Когда электростатическое отталкивание в растворе преодолевает поверхностное натяжение, заряженная струи жидкости выбрасывается из кончика иглы, проходит через воздух с испарения растворителя, и, наконец, осажденный на заземленной коллектора. Шприцевой насос обеспечивает непрерывный поток выходящего из фильеры растворе и, таким образом, несколько копий electrospun....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
1. Настройка Электропрядения коллектор
- Разрежьте алюминиевую фольгу в прямоугольный кусок.
- Сложите прямоугольный кусок в прямоугольную полосу, и приложите его перпендикулярно плоской металлической пластины с лентой (рис. 1). Примечание: Размер волокнистого мата зависит от длины и ширины полосы. Таким образом, размеры полосы можно регулировать по мере необходимости.
2. Полимерные Подготовка решения
- Смешайте глицерин и додекандикарбоновую кислоту (ДВР) в молярном соотношении 1:1 в химическом стакане при температуре 120 ° С в течение 100 ч, чтобы получить PGD полимера.
- Раствори....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Основными компонентами электроформования показаны на рисунке 1. Большой размер коврик волокна обычно получают путем перпендикулярно прикрепленной полосы алюминиевой фольги и плоской металлической пластины. Рисунок 2 показывает конструкцию коллектора и мат электропрядения волокна. Ширина и длина может регулироваться для различных приложений. Длина волокна, изготовленного с PGD полимера и базальной Раствор смеси до 10 см. Морфология electrospun волокон показан на рисунке 3.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Ограничения простых коллекционеров или сложностей вращающихся коллекционеров, которые в настоящее время используются для электропрядения увеличить ограничение получения желаемой длины и размер мата для некоторых приложений. Кроме того, передача волокна из основного коллектора к чашке культуры или других поверхностей является вызовом 5. В этом докладе, недавно разработанный коллектор, сделал просто путем присоединения фольги полоску алюминия к заземленной коллектора, смог получить большие размеры маты до 10 см.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Нет конфликта интересов объявлены.
Благодарности
Эта работа была проведена с использованием объектов-технологический факультет биомедицинской на Международного университета Флориды.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Глицерин | Сигма-Олдрич | G7757 | |
| Додекандиевая кислота | Сигма-Олдрич | D1009 | |
| Желатин | Сигма-Олдрич | D1890 | |
| Поли(окись этилена) (ПЭО) | Сигма-Олдрич | 182028 | |
| Рибофлавин | Сигма-Олдрич | 132350250 | 0,10% |
| Эмбриональные стволовые клетки | мышиGlobalStem | GSC-5002 | |
| Matrigel | Becton Dickinson | 356234 | |
| DMEM/F12 | Thermo Scientific | SH30272.02 | |
| N2 добавка | Invitrogen | 17502048 | 1% |
| FGF2 | Stemgent | 03-0002 | 10 нг/мл |
| Аккутаза | Invitrogen | A11105-01 | |
| Фосфат буферизованный физиологический раствор (ПБС) | Invitrogen | 10010-031 | |
| Резазурин флуоресцентный краситель | Sigma-Aldrich | 62758-13-8 | |
| SV Система выделения общей РНК | Promega | Z3100 | |
| GoScript Система обратной транскрипции | Promega | A5000 | |
| GoTaq qPCR Master Mix | Promega | A6001 | |
| Шприцевой насос | Fisher scientific | 14-831-200 | |
| Источник питания высокого напряжения | Spellman High Voltage Electronics Corporation | SL30 | |
| УФ-свет | Philips | 308643 | 15W/G15T8 |
| Synergy HT Многорежимный микропланшетный считыватель | BioTek | ||
| Perkin Elmer GeneAmp PCR System 9600 | Perkin Elmer | 8488 | |
| StepOne Система ПЦР в реальном времени | Applied Biosystems | 4376357 |
Ссылки
- Migneco, F., Huang, Y. -C., Birla, R. K., Hollister, S. J. Poly (glycerol-dodecanoate), a biodegradable polyester for medical devices and tissue engineering scaffolds. Biomaterials. 30, 6479-6484 (2009).
- Reneker, D. H., Yarin, A. L. Electrospinning jets and polymer ....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
