Method Article

Сниженной гравитационные окружающей среды и комплектующие Демонстрации проточной цитометрии и Companion микрожидкостных Технология смешивания Прототип миниатюрных

DOI:

10.3791/51743

November 13th, 2014

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Космический полет диагностика крови нужны инновации. Мало демонстрации были опубликованы, иллюстрирующая в полете, снижение тяжести технологии диагностики здоровья. Здесь мы представляем метод для строительства и эксплуатации параболической летных испытаний установки для прототипа точка-в-санитарной потока цитометрии дизайна, с компонентами и подготовки стратегий, пригодных для других установок.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

До недавнего времени, астронавт образцы крови были собраны в полете, транспортируется на землю на Space Shuttle, и проанализированы в земных лабораториях. Если люди путешествовать за пределы низкой околоземной орбиты, переход к пространственно-готов, пункт-ухода (СПЭ) тестирование не требуется. Такое тестирование должно быть комплексным, легко выполнить в сниженной гравитации среды, и не зависит от стрессов запуска и полетов в космос. Бесчисленные устройства ВОУ были разработаны, чтобы имитировать в лабораторных масштабах коллег, но большинство имеют узкие приложений и лишь немногие из них очевидный использованию на в полете, уменьшенной гравитации среды. На самом деле, демонстрации биомедицинской диагностики в пониженной гравитации ограничены вообще, делая выбор компонент и определенные материально-технические проблемы, трудно подойти, когда стремится испытать новую технологию. Чтобы помочь заполнить пустоту, мы представляем модульный метод строительства и эксплуатации диагностического устройства прототип крови и связанного с рarabolic испытательный полет установка, что соответствует стандартам для летных испытаний на борту параболический полет, пониженной гравитации самолетов. Метод первый посвящен сборке буровой установки в полете, уменьшенной гравитации тестирования проточной цитометрии и компаньона микрожидкостных чипа смешивания. Компоненты могут быть адаптированы к другим конструкций и некоторых пользовательских компонентов, таких как образец микрообъема погрузчика и micromixer может представлять особый интерес. Затем способ сдвиги сосредоточиться на подготовке к полету, предлагая рекомендации и предложения для подготовки к успешной летных испытаний в отношении подготовки пользователей, разработке стандартной операционной процедурой (СОП), и другие вопросы. Наконец, в-полете экспериментальные процедуры, характерные для наших демонстраций описаны.

Introduction

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Неадекватность текущей диагностики здоровья космических готов представляет ограничивающим фактором для более глубокого пилотируемой космонавтики. Диагностика должны быть всеобъемлющими, простой в использовании в пониженной гравитации, и относительно устойчивым к воздействию стрессов запуска и космического полета (например, высокие перегрузки, вибрации, излучения, изменения температуры, и давления в салоне изменения). События в пункт оказания медицинской помощи тестирования (POCT) может перевести на эффективных решений космического полета за счет использования небольших образцов пациентов (например, палец укол), более простые и меньшие струйная (....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Образцы крови человека, используемые в настоящем протоколе были собраны с IRB утверждения с использованием малоинвазивных протоколов (см Благодарности).

1. Рог Ассамблея

  1. Соберите компоненты прототипа (струйная, оптические, электронные управления / сбора данных) для простого цитометрическим системы, которые будут использоваться в условиях ограниченной тяжести
    1. Подготовьте систему давления при минимальном весе и мощности должен водить гидросистемы
      1. Подключите миниатюрный воздушный насос к датчику перепада давления.
      2. Для поддержания постоянного давления вождения, регулировки производительности насоса с пом....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Типичные результаты для демонстрации micromixer появляются на рисунке 7, если смотреть с помощью ПЗС-камеры, установленной на стереомикроскопа. Смешивание может быть визуально оценивали в любой точке вдоль спирали, а также в выходном канале для экспериментов с участием двух наборов жидкостей: кровь / солевом растворе и синий / желтый краситель. Количественный анализ двумерных изображений может включать в себя определение тени единообразия по всей ширине канала в различных регионах, как показано в других.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Метод, описанный здесь включен эффективной демонстрации основных технологических компонентов (образец погрузки, Микрожидкостных смешивания и оптического детектирования) в течение 2010 БЫСТРЫХ параболических полетов, с сопоставимыми результатами в первом тестировании. Обучение и СОП методы, описанные здесь были особенно эффективными, и помог осветить инструменты и другое существо "костыли" полагались на для практики демонстраций, которые не будут доступны на борту параболической полета.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Евгений Юрьевич Чан, Кэндис Bae, и Юлия З. Шарп являются изобретатели смежных технологических патентов, поданных через ДНК медицины института коммерческой структуры.

Acknowledgements

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Разработка аппаратных средств при поддержке NASA SBIR контрактам NNX09CA44C и NNX10CA97C. Анализ данных для оптических блоков и образец погрузчика демонстраций поддержали НАСА Фаза III Договора NNC11CA04C. Коллекция крови человека проводили с использованием НАСА IRB протокол # SA-10-008. Управляющее программное обеспечение / приобретение осуществляется через National Instruments Медицинский прибор грантовой программы. Пресс-формы для микрочипов были сделаны на микроструктур объекта Джонса Хопкинса и Гарвардского центра для наноразмерных систем. Отто Дж Briner и Люк Джаффе (ДНК Институт медицины) помогал в штативе в течение лета 2010 года НАСА полет видео персонала, п....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Микро воздушный насосSmart Products, Inc.AP-2P02AМаксимальное давление = 6,76 фунта на квадратный дюйм; 1,301 дюйма x 0,394 дюйма x 0,650 дюйма, 0,28 унции (8 г); доступно непосредственно у
датчика дифференциального давленияHoneywell International, Inc.ASDX015D44RДиапазон  0-15 фунтов на квадратный дюйм; 0,974 дюйма x 0,550 дюйма x 0,440 дюйма, 0,09 унции (2,565 г); поставщики включают Digi-Key и Mouser Electronics
Жесткий пластиковый флакон (небольшой размер)Loritz & Ассошиэйтс, Инк.55-05Полистирол; внутренний диаметр 0,81 дюйма (20,6 мм), IH 2,06 дюйма (52,4 мм); доступно напрямую в LA Container Inc.; аналогичный продукт доступен от Dynalab Corp.
латексные смотровые перчаткиdynarex corporation2337Средний палец используется для латексной диафрагмы во флаконе с источником жидкости. Другие бренды (например, Aurelia ®   Яркая &торговля;) Хорошо.
Оптический клейNorland ProductsNOA 88Клей с низким уровнем дегазации; доступен непосредственно от Norland; Также доступно у Edmund Optics Inc.
3-ходовые электромагнитные клапаныкомпании LEELHDA0531115Hгазовые клапаны, но могут работать с жидкостью; 1,29" L, 0,28" D. Снят с прoизв.  Подобные товары доступны у компании The LEE.
Объемный расходомер водыOMEGA Engineering inc. FLR-1602Aнастоятельно предпочтителен. Мы рекомендуем OEM-датчик расхода жидкости SENSIRION LG16 для скорости потока от нл/мин до 5 мл/мин.
Фотонный детектор PCD-мини SenslPCDMini-00100для обнаружения флуоресценции; доступен непосредственно в Sensl
AccelerometerCrossbow Technology, Inc.CXL02LF33-месячное силовое обнаружение.  Предоставлено DMI NASA.  Похожий продукт доступен от Vernier Software & Технология, ООО. 
СтереомикроскопAmScopeSE305R-AZ-E
ПЗС-камераThorlabsDCU223Cразрешением 1,024 x 768, цветной, USB 2.0; доступен непосредственно через Thorlabs
USB и триггерный кабель (вход/выход) для ПЗС-камерыThorlabsCAB-DCU-T1Доступен непосредственно через микротрубку Thorlabs
Корпорация Saint-Gobain AAD04103Tygon®; ID 0.02", OD 0.06", 500 футов, стена 0.02". Поставщики: VWR, Thermo Fisher Scientific Inc.
Полые стальные штифтыNew England Small Tube(Custom)0.025" OD, 0.017" ID, 0.500" L, трубка из нержавеющей стали, тип 304, резаная, без заусенцев, пассивированная; возможность соединения трубок с микроотверстиями, соединения трубок для стружки
Slide clampWorld Precision Instruments, Inc.14042Доступно непосредственно у World Precision Instruments
Leur адаптерыWorld Precision Instruments, Inc.14011Доступно непосредственно у World Precision Instruments
Silicon WaferAddison Engineering, Inc.Диаметр 6 дюймов; для изготовления пресс-форм SU-8
Полидиметилсилоксан (PDMS) эластомерный отвердительDow Corning3097358-1004Поставщик: Global Industrial SLP, LLC
Игла (23 калибр), скошенный наконечникTerumo Medical CorporationNN-2338RУльтратонкие стенки; 23 г x 1,5 дюйма; 22 Г также пригодны для использования; поставщики: Careforde, Inc.,  Медицинская
игла для дозирования Port City (23 калибр), тупой наконечникCML Supply901-23-10023 G x 1";   доступен в CML
Supply Cover glass ThermoFisher Scientific, Inc.12-518-105EGold Seal™ некоррозионное боросиликатное стекло; для крышки чипа PDMS; 24 x 60 мм; доступно в Thermo Fisher Scientific, Inc.
Вакуумный насосMountainMTN8407Для дегазации PDMS; поставщик:  Райдер Систем, Инк. 
Вакуумная камераThermo Fisher Scientific, Inc.5311-0250Nalgene™ Прозрачный поликарбонат; можно приобрести в компании Thermo Fisher Scientific, Inc.
Плазменный очистительHarrick PlasmaPDC-32G
Ручная лупаMitutoyo183-131Используйте в обратном направлении для обеспечения просмотра на ~15".
ЭтанолCAROLINA861283Для очистки от стружки. Разбавьте до 70% с помощью многопоровой воды.
Система очистки водыThermo Fisher Scientific, Inc.D11901Доступно непосредственно в компании Thermo Fisher Scientific, Inc.
Оптомеханические крепления для переводаThorlabsK6X6-Axis Kinematic Optic Mount; снят с производства; новый продукт (K6XS) доступен непосредственно в Thorlabs
LaptopHewlett-PackardVP209AVHP Pavilion Laptop под управлением Windows 7
Лоток для ноутбуков (подпружиненный)National Products, INC.РАМ-234-3&nбсп;Оперативная память Tough-Tray™. Может вместить ноутбуки шириной от 10 до 16 дюймов.
USB-разветвительConnectland Technology Limited3401167
USB-карты сбора данных (8 аналоговых входов, 12 цифровых входов/выходов)National InstrumentsNI USB-600812-бит, 10 кГц Недорогие многофункциональные платы сбора
данных DAQ USB (16 аналоговых входов, 32 цифровых ввода-вывода)National InstrumentsNI USB-621616-бит, 400 кГц / с изолированный MIO DAQ серии M, управление с питанием от шины
/ Программное обеспечениедля приобретения NationalInstruments LabVIEW 2009Кастомное кодирование National Instruments (NI) LabVIEW 
Программное обеспечение для 3D-моделирования твердых телDassault Systè mes SolidWorks Corp.SolidWorks 2011
Программное обеспечение для 2D-моделированияAUTODESKAutoCAD LT 2008
Вертикальная стойка для оборудования(предоставлено NASA)Н/Д
Сплошная алюминиевая оптическая макетная платаThorlabsMB242424" x 1/2", 1/4"-20 Метчики; доступны непосредственно у Thorlabs
Промышленная сталь и отвердительThe J-B Weld CompanyJ-B Сварной сталь Армированный эпоксидный клей
микрогематокрит капилляр Fisher Scientific22-362-574внутренний диаметр от 1,1 до 1,2 мм
1 мл шприцыHenke-Sass, Wolf4010.200V0NORM-JECT®; поставщик: Grainger, Inc.
Эритроциты человекаИнновационное исследованиеIPLA-WB3Протестировано и признано отрицательным поставщиком на: HBsAg, HCV, HIV-1, HIV-2, HIV-1Ag или HIV 1-NAT, ALT и сифилис методами, одобренными FDA. Поскольку ни один метод испытаний не может гарантировать со 100% уверенностью отсутствие инфекционного агента, с продуктами, полученными от человека, следует обращаться так, как рекомендовано в Руководстве Министерства здравоохранения и социальных служб США по биобезопасности в микробиологических и биомедицинских лабораториях, для потенциально инфекционных образцов сыворотки или крови
человека Фосфатный буферный солевой концентратP5493SIGMA10x; разбавленный до 1x
TweenP9416SIGMATWEEN® 20
ЦентрифугаLW ScientificSTRAIGHT8-5KОткидная 8-местная центрифуга. Доступно у официальных дилеров. Другие центрифуги доступны непосредственно у LW Scientific.
HD видеорегистраторSonyMHS-CM5
Оранжевый флуоресцентный краситель для нуклеиновых кислотInvitrogenS-11364SYTO® 83 Оранжевый флуоресцентный краситель для нуклеиновых кислот. Хранится в растворителе ДМСО. Всегда носите рекомендованные средства индивидуальной защиты. Не требуется специальных консультаций по обращению
.
Флуоресцентные счетные бусиныInvitrogenMP 36950CountBright™ Абсолютные счетные бусины.  Всегда носите рекомендованные средства индивидуальной защиты. Никаких специальных советов по обращению не требуется.
Smart Products компании Бесконтактный расходомер

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Thomas, R. A., Krishan, A., Robinson, D. M., Sams, C., Costa, F. NASA/American Cancer Society High-Resolution Flow Cytometry Project-I. Cytometry. 43, 2-11 (2001).
  2. Wen, J., Krishan, A., Thomas, R. A.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Reduced Gravity TestingParabolic FlightMiniaturized Flow CytometerMicrofluidic MixingFluidics SystemOptical Block DetectionSample Loader DemonstrationRig Support StructureElectronic Shutdown MechanismValve Control System

Related Articles