Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Радио-телеметрическая система для мониторинга сердечно-сосудистой системы у крыс с спинного мозга Перерезка и эмбриональной нервной стволовой клетки трансплантатов

10.1K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/51914

⸱

7 октября 2014 г.

 ,  , 

В этой статье

Краткое содержание

Мы приводим протокол за использование радио-телеметрическая система для записи сердечно-сосудистых параметров в Т4 спинного мозга перерезанных крыс через восемь недель после эмбрионального ствола мозга нервной стволовой клетки прививки в месте повреждения. Телеметрия продвинутая техника, чтобы точно оценить сердечно-сосудистую функцию в сознательных свободно движущихся с повреждением спинного мозга крыс.

Аннотация

Высокое грудной или шейки травмы спинного мозга (SCI) может привести к сердечно-сосудистой дисфункции. Чтобы контролировать параметры сердечно-сосудистой системы, мы имплантировали катетер, соединенный с радиопередатчиком в бедренную артерию крыс, что была проведена T4 спинного мозга рассечение с или без прививки эмбриональных стволовых полученных нервных стволовых клеток, экспрессирующих зеленый флуоресцентный белок. По сравнению с другими методами, такими как вставки канюли или хвост манжеты, телеметрии выгодно постоянно контролировать артериальное давление и частоту сердечных сокращений в свободно движущихся животных. Он также способен долгосрочных нескольких поглощений данных. В повреждением спинного мозга крыс, базальные сердечно-сосудистые данных под безудержной состояния и вегетативной дисрефлексии в ответ на колоректального живота были успешно записаны. Кроме того, сердечно-сосудистые параметры до и после ТСМ можно сравнить в том же крысы, если передатчик имплантируют перед спинного мозга рассечения. Одним из ограничений описанного telemetПроцедура ры является то, что имплантация в бедренную артерию может повлиять на кровоснабжение ипсилатеральном задней конечности.

Введение

Сердечно-сосудистая дисфункция возникает после травмы спинного мозга (SCI) на высоких уровнях. Это проявляется в неупорядоченной артериального давления и частоты сердечных сокращений в состоянии покоя, ортостатической гипотензии, вызванной физической нагрузкой гипотония и вегетативной дисрефлексии характеризуется эпизодами гипертензии и барорефлекторной опосредованного брадикардии в ответ на сенсорные стимулы ниже уровня травмы 1,2. Эти симптомы вмешиваться в повседневной жизни спинальных больных мозга ранения. Таким образом, важно создать эффективные инструменты для исследования сердечно-сосудистых изменений у животных с ТСМ и экспериментальных методов ле....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Все протоколы животных были утверждены уходу и использованию комитета за животными (IACUC) по. NIH руководящие принципы для ухода за лабораторными животными и безопасности строго соблюдаются. Животные с хирургическими процедурами были адекватное лечение для минимизации боли и дискомфорта.

1 спинного мозга Curgery и сотовый Прививка

  1. Автоклав хирургические инструменты Предыдущие всем операций. Используйте Hot бисера стерилизатор (Fine Наука Tools), чтобы удалить болезнетворные микроорганизмы и микробные загрязнения из инструментов между процедурами на различных животных. Используйте стерильные хирургические перчатки, халат и штор....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Используя описанную выше технику телеметрии, мы успешно записаны сердечно-сосудистых параметров в с повреждением спинного мозга животных. У животных с только ТСМ, MAP был значительно сокращен в то время как HR увеличилась по сравнению с наивными животных, в соответствии с предыдущими докладами 9. У животных с BS-НСК прививки, MAP и HR подошел уровень, составляющий в наивных животных (Рисунок 2). Во колоректального живота, крыса считался dysreflexic если вредные стимуляция производится повышен.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Традиционно, наполненной жидкостью полая игла вставлена ​​в артерию и соединен с датчиком давления для записи параметров сердечно-сосудистой системы в качестве терминального снимка в каждом животном 11. Чтобы постоянно следить сердечно-сосудистой производительность в течение длительного времени, радиотелеметрическими системы используются во многих лабораториях. Это более изысканный инструмент может записывать кровяное давление в сознании, свободно передвигающихся животных. По сравнению с наполненных жидкостью.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы не имеют ничего раскрывать.

Благодарности

Работа была поддержана грантами от NIH/NINDS (NS054883), Фонда Крейга Х. Нильсена (280072), а также Управления по делам ветеранов и Канадской организации по исследованию позвоночника. Мы благодарим Центр ресурсов и исследований крыс Университета Миссури, Колумбия, штат Миссури, за предоставление крыс GFP.

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Фибриноген (крыса)SigmaF6755-25MG2 ч в дозе 37 oC для диспозиции
тромбина (крыса)SigmaT5772-100UNDissovle в 10 мМ CaCl2
1% Terg-A-ZymeSigmaZ273287Ферментативный раствор для телеметрической очистки
FluorogoldFluorochromeDissogle в дистиллированной воде и избегайте попадания света
Телеметр                      (ПА-С40)Data Sciences International
Telementric система регистрации и анализаData Sciences InternationalСтимулятор сигнала, матрица обмена данными, приемники, контрольный монитор давления окружающей среды
Катетер с баллонным наконечникомEdward Lifesciences111F7-PДля колоректального растяжения

Ссылки

  1. Krassioukov, A. V., Furlan, J. C., Fehlings, M. G. Autonomic dysreflexia in acute spinal cord injury: an under-recognized clinical entity. J Neurotrauma. 20, 707-716 (2003).
  2. Lindan, R., Joiner, E., Freehafer, A. A., Hazel, C. Incidence an....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Эмбриональные нейральные стволовые клеткимониторинг сердечно-сосудистой функцииимплантация в бедренную артериюиндукция автономной дисрефлексиирастяжение толстой кишкисреднее артериальное давлениеизмерение частоты сердечных сокращенийимплантация трансмиттера