Из-за резкого и отрицательной связи между ожирением и другими сопутствующими заболеваниями, исследование о роли жировой играет в болезни и общее состояние здоровья является оправданным. Мы приводим протокол для выделения и удаления жировых депо, позволяющих проводить исследования жировой помощью на месте и в лабораторных методов.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Локализация, идентификация и Удаление мышиный жировой депо
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Ожирение резко возросло за последние несколько десятилетий и затрагивает более трети взрослого населения США. Экономический эффект от ожирения в 2005 году достиг ошеломляющей суммы в 190,2 миллиарда долларов только в виде прямых медицинских расходов. Ожирение является основным фактором риска развития широкого спектра заболеваний. Исторически сложилось так, что об жировой ткани и ее основных и существенных функциях в организме было известно мало. Коричневый и белый жир являются двумя основными типами жировой ткани, но в современной литературе идентифицирован новый тип жира, называемый бритовым или бежевым жиром. Исследования показали, что жировые депо имеют специфические метаболические профили, и определенные депо способствуют склонности к ожирению и другим связанным с ним расстройствам. Цель этого протокола состоит в том, чтобы предоставить исследователям возможность выявлять и удалять жировые депо, что позволит анализировать различные факторные эффекты на жировые отложения; а также о положительной или вредной роли, которую жировая ткань играет в заболевании и общем состоянии здоровья. Выделение и иссечение жировых депо позволяет исследователям изучить грубые морфологические изменения, а также гистологические изменения. Жировой изол также может быть использован для молекулярных исследований для оценки транскрипционных и трансляционных изменений или для экспериментов in vitro с целью выявления интересующих их целей и механизмов действия. Этот метод превосходит другие опубликованные методы благодаря конструкции, позволяющей изолировать несколько складов с простотой и минимальным загрязнением.
Введение
Жировая внесли заметный внешний вид в центре внимания средств массовой информации, в связи с резким увеличением ожирения в течение последних нескольких десятилетий 20-го века. Ожирение в настоящее время затрагивает более чем одну треть взрослых и 17% детей и подростков в Соединенных Штатах Америки (США) 1. Spanning всех этнических групп, статистическое исследование вокруг эпидемии ожирения показали, что не испаноязычные чернокожие имеют самый высокий уровень с поправкой на возраст ожирения (49,5%) по сравнению с американцев мексиканского происхождения (40,4%), все выходцы из Латинской Америки (39,1%), и не- Испанец белые (34,3%) 2. Экономический....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
ПРИМЕЧАНИЕ: Все процедуры на животных были проведены с одобрения уходу и использованию комитета Институциональная животных (IACUC) из Университета Цинциннати и в соответствии с Руководством по уходу и использованию лабораторных животных от Национальных Институтов Здоровья (NIH Издание № . 85-23, пересмотренное в 1996 г.).
1. Эвтаназии и стерилизовать мыши
- Наведите в раздаточной коробке, содержащей supratheraputic дозу ИФ и позволяют вдыхать эффект. После того, как мышь эвтаназии, снять с коробки.
- Цервикально вывихнуть в качестве второго средства эвтаназии.
- Стерилизация внешней поверхности мыши, очищая животн....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Идентификация и локализация паховой подкожной жировой, межлопаточной бурой жировой, висцеральной придатка жировой (рисунок 1), а также дуги аорты периваскулярной жировой, грудного отдела аорты жировой, надпочечников аорты жировой и инфраренальной аорты жировой (Рисунок 2) была достигнута успешно используют описаны хирургический метод. Гистологическое исследование и дифференциация между НИМ и Ват образцов были положительно оценены с использованием гематоксилином и эозином (H & E) окр.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Ожирение может привести к большому целому ряду заболеваний и полном понимании той роли, которую жировой играет до конца не изучен; Поэтому продолжение исследований в области жировой необходимо. Модели на животных, в частности, мышиные модели идеально подходят для начального исследования в прогрессии заболевания и тестирования потенциальных фармацевтических процедур. При использовании этих моделей, точное выделение и иссечение жировых депо является чрезвычайно важным и необходимым инструментом при изучении патологии жиро.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих финансовых интересов или других конфликтов интересов.
Благодарности
У авторов нет благодарностей.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Изофлуран | Мед-Вет Интернэшнл | #RXISO-250 | |
| 70% этанол | Фишер | 07-678-001 | |
| DMEF-12 | Сигма Олдрич | D-6421 | Подогреть на водяной бане перед нанесением салфетки. |
| 2 мл Микроцентрифуга пробирки | Midsci | MCT-200-C-S | |
| Фосфат буферный физиологический Sigma | Aldrich | P5368-10PAK |
Ссылки
- Ogden, C. L., Carroll, M. D., Kit, B. K., Flegal, K. M. Prevalence of obesity in the United States, 2009-2010. NCHS Data Brief. 82, 1-8 (2012).
- Flegal, K. M., Carroll, M. D., Kit, B. K., Ogden, C. L. Prevalence of obesity and trends in the distribution of body mass index....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
