Фенотипирование мыши легочная функция В Vivo С жизненной емкости легких диффундирующих

Summary

Мы описываем средство для быстрого и простого измерения диффузионной способности легких у мышей и показываем, что оно достаточно чувствительно к изменениям фенотипа при множественных распространенных патологиях легких. Таким образом, эта метрика имеет прямое трансляционное значение для мышиных моделей, поскольку диффузионная способность также легко измеряется у людей.

Abstract

Мышь теперь основной животных используются для моделирования различных легочных заболеваний. Для изучения механизмов, лежащих в основе таких патологий, фенотипические методы необходимы, которые могут количественно патологические изменения. Кроме того, чтобы обеспечить поступательное отношение к модели мыши, такие измерения должны быть тесты, которые можно легко сделать у людей и мышей. К сожалению, в данном литературе несколько фенотипических измерения легочной функции имеют непосредственное применение в организме человека. Одним из исключений является диффузионная емкость для монооксида углерода, который является измерение, которое обычно делается в организме человека. В настоящем докладе мы описываем средства, чтобы быстро и просто измерить этот диффузионной способности у мышей. Процедура включает в себя краткое легких с инфляцией измеряемых газов в наркозом мыши, а затем на время газового анализа 1 мин. Мы протестировали способность этого метода обнаруживать несколько патологий легких, включая эмфизему, фиброз, острого повреждения легких и гриппа игрибковые инфекции легких, а также мониторинг развития легких у молодых щенков. Результаты показывают, значительное снижение всех патологий легких, а также увеличение пропускной способности рассеивающего с легких созревания. Это измерение диффузионной способности легких, таким образом, обеспечивает испытание функции легких, который имеет широкое применение с его способностью обнаруживать структурные изменения фенотипических с большинством существующих патологических моделей легких.

Introduction

Мышь теперь основной животных используются для моделирования различных легочных заболеваний. Для изучения механизмов, которые underly такие патологии, фенотипические методы необходимы, которые могут количественно это патологические изменения. Хотя есть много исследований на мышах, где механики вентиляции оцениваются эти измерения, как правило, не связаны со стандартными оценками легочной функции обычно делается в организме человека. Это печально, так как способность выполнять эквивалентные измерения в мышей и человека в качестве субъекта может способствовать перевод результатов в мышиных моделях человеческой болезни.

Одним из наиболее рас....

Protocol

ПРИМЕЧАНИЕ: Все протоколы животных были одобрены Комитетом Университета Джонса Хопкинса уходу и использованию животных мимо.

1. Подготовка животных

1. Подготовка мышей 6 C57BL / 6 управления для измерения DFCO, посредством анестезии кетамином их и ксилазина, как описано в стадии 2.3 ниже.
2. Подготовьте все другие мышей с различных патологий легких, показанных в таблице 1, с использованием той же процедуры, что и для контрольной группы. Конкретные детали, необходимые для установления каждой из этих моделей можно найти в соответствующих справочниках. Контрольные мыши и тех, и в других патологических когорт в....

Results

На рисунке 1 показаны измерения DFCO от взрослых мышей в группах А, В, С, D, E и F. Были значительное снижение с обеих инфекций Aspergillus и гриппа, а также значительное снижение фиброзной, эмфизематозных и острый Модели повреждения легких. Рисунок 2 показывает изменения группы G развития в DFCO течением времени, как мышей в возрасте от 2-6 недель. Был небольшое, но достоверное увеличение с развития легких за это время, конечно. Эффект от использования меньший объем инфляции был также .......

Discussion

В настоящей работе мы определили новую метрику для количественной оценки газового обмена способность легких мышей. Этот показатель аналогичен диффузионной способности, общей клинической оценки, который измеряет основную функцию легких, то есть его способности газообмена. Диффузионная емкость является единственным функциональным легких измерений, которые могут быть легко и быстро сделать в обоих мыши и человека. Для выявления заболевания легких у мышей, важной задачей является количественной оценки изменений в функции ле.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Газовый хроматограф	Inficon	Micro GC Модель 3000A	Agilent делает аналогичную модель
18 G Игла Люэра	Бектон Дикенсон		Несколько других возможных поставщиков
пластиковый шприц 3 мл	Бектон Дикенсон		Несколько других возможных поставщиков
Полипропиленовые газовые мешки для проб	SKC	емкостью 1 или 2 л работают хорошо	Другие газонепроницаемые пакеты будут хорошо работать
Бензобак, 0,3% Ne, 0,3% CO, балансный воздух; (размер ME)	Airgas, Inc	Z04 NI785ME3012	Это стандартная смесь, используемая для DLCO у человека
25 TCID50 на мышь вируса гриппа A/PR8, разведенная в фосфатно-солевом буфере.
Свиная поджелудочная эластаза	Elastin Products, Оуэнсвилл, Миссури		5,4 U
Блеомицин	APP Pharmaceuticals, Шаумбург, Иллинойс		0,25 U
Escherichia coli LPS	Sigma L2880		3 μ г/г массы тела; O55:B5
Aspergillus fumigatus (изолят Af293) конидии были собраны из зрелых колоний, выращенных на картофельном агаре с декстрозой.