Методическая статья

Калиброванный щипцы Модель спинного мозга Компрессия травмы

21K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/52318

⸱

24 апреля 2015 г.

 ,  ,  , 
1Department of Pathology and Laboratory Medicine, University of California, Davis, 2Institute for Pediatric Regenerative Medicine, Shriners Hospitals for Children (Northern California)

* These authors contributed equally

В этой статье

Краткое содержание

Модели повреждений спинного мозга должны быть высоко воспроизводимыми. Мы демонстрируем, что калиброванная модель компрессии щипцами при травме спинного мозга является простым в использовании хирургическим методом для создания воспроизводимых повреждений спинного мозга мыши.

Аннотация

Компрессионные травмы мышиного спинного мозга являются ценными животных моделей для изучения травмы спинного мозга (SCI) и спинного восстановительной терапии. Откалиброван щипцы модель компрессионной травмы является удобным, низкая стоимость, и очень воспроизводимые модели на животных для ТСМ. Мы использовали пару модифицированных щипцов в соответствии с методом, опубликованном Plemel и др. (2008), чтобы сжимать в поперечном направлении спинного мозга на расстоянии 0,35 мм. В этом видео мы покажем, спинной ламинектомию подвергать спинного мозга, а затем компрессии спинного мозга с модифицированными щипцами. В видео мы также будут рассмотрены вопросы, связанные с ухода за параличом нижних конечностей лабораторных животных. Эта модель травмы производит мышей, которые проявляют ухудшение в ощущениях, а также нарушение функций задних конечностей двигательного аппарата. Кроме того, этот способ дает травмы в соответствии аберрации в патологии ТСМ, как определено с помощью иммуногистохимических методов. После просмотра этого VIDео, зрители должны быть в состоянии определить необходимые материалы и способы получения SCI различной степени тяжести в мышь для исследований по ТСМ и / или лечения, направленных на смягчение нарушения после травмы.

Введение

Животные модели ТСМ являются ценными инструментами для оценки эффективности терапевтических парадигм, предназначенных для смягчения ущерба как следствие травмы спинного мозга. Из экспериментальных необходимости, эти модели должны предоставить воспроизводимые дефицит двигательной и чувствительных поведения, быть регулируемым, чтобы произвести травмы различной степени тяжести, и продемонстрировать, что тяжесть травмы коррелирует со степенью неврологического дефицита наблюдается. Есть три основных типа ТСМ с различными особенностями травмы: перерезки, контузии, и сжатие 1. Вкратце, травмы рассечение является разрыв спинного мозга, травмы ушиб возникает из краткого, фокусное силы, приложенной к спинной спинного мозга, травмы и сжатие происходит, когда вредные сила прикладывается к спинного мозга, а также может быть упоминается как раздавить травмы 2.

Полные повреждения перерезки клинически редко у людей 3, в то время как ушибтравмы d сжатия являются более распространенными. Травма сжатия создает результат, похожий на то, что можно найти в человеческой ТСМ вызвано, например, сжатие опухоли или других вредных сжимающих усилий, и может быть выполнена с использованием простой набор инструментов. Ушиб и сжатия травмы схожи тем, что оба сжимающая сила, и оба имеют аналогичные патологические особенности, такие как cytoarchitectonic дезорганизации, и вызывают подобные эндогенные ответы на травмы 1,4. Модель контузии травмы, как правило, применяется эту силу к спинной спинного мозга с помощью специального аппарата аналогично человеческим случаев ТСМ в результате соударения с позвоночника 2,5,6. В отличие от этого, травмы сжатия могут быть получены с помощью различных методов с применением силы дорсально или вбок. Методы компрессионной травмы включают откалиброван, щипцы 7, аневризмы клипы 2, или помещая вес непосредственно на спинном мозге 8. Преимуществоаневризмы клипы в том, что они в состоянии обеспечить различное количество силы 9. Способ добавления веса на дорсальную поверхность спинного мозга, непосредственно 8 требуется вес быть на месте в течение 10 мин, резко увеличивая длину операции и в результате из-за несоответствия размещения веса и движения из-за дыхания животное. Из-за небольшого размера мышей, размещени животных в специализированных устройств, предназначенных для использования в крысах, например, ударных для ушибов, травм может быть трудно или привести к травмам, несовместимых 7. Однако мыши, доступны в широком диапазоне трансгенных линий, в отличие от более крупных животных, таких как крысы или кролика, которые очень полезны для исследования SCI.

Способ Plemel использования калиброванных щипцов для сжатия спинного мозга генерирует воспроизводимое SCI с высокой степенью корреляции между тяжестью травмы и неврологического дефицита 7. Эта хирургическая модель SCI являетсягенерируются с использованием пары № 5 Дюмон щипцов модифицированных чтобы проходить от друга на определенном расстоянии от любой металлической эпоксидной смолы или какого-либо другого препятствия для предотвращения полного закрытия. Это инженерии расстояние гарантирует, что щипцы всегда будет рядом с определенной шириной в несколько операций и для разных пользователей. Преимущество способа в том, что Plemel материалы для получения калиброванных щипцов можно легко купить и собран в лаборатории без необходимости специального оборудования. Эти щипцы могут выдерживать многократные раунды автоклаве и стерилизации, а также отсутствие отдельной громоздкой устройства упрощает операции.

В этом видео демонстрируется хирургического использования пары калиброванных щипцов на спинном мозге мыши, чтобы генерировать травмы сжатия. Мы также обращаемся с уникальными проблемами в связи с уходом из повреждением спинного мозга лабораторных животных для улучшения их качества жизни после операции и снизить смертность.

Протокол

Все процедуры на животных и методы по уходу за животными должен быть одобрен Институциональные уходу за животными и использование комитета учреждения (IACUC) по.

1. Хирургическая подготовка

  1. Соберите все необходимые хирургические инструменты и реактивы: щипцы, Vana ножницы, roungeurs, натяжитель, скальпели, ножницы, швы, скобы кожи, Q-Tips, стерильный физиологический раствор, хирургические губки, и изофлурановой. Подготовка и автоклава полный пакет хирургических инструментов до операции. При выполнении операции на более чем одной мыши, подготовить и автоклав один пакет инструментов на животное, или в автоклаве один пакет хирургических инструментов и стерилизовать с помощью инструмента стерилизатор между ними операций. Как правило, один пакет стерилизованных инструментов могут быть использованы на до 5 мышей, если инструмент terilizer стеклянными шариками используется для очистки инструментов в промежутке между операций (после 5 животных инструменты должны быть повторно очищены и стерилизованы перед использованием). Пожалуйста, свяжитесь с вашим местным IACUC администратора institutiна конкретных рекомендаций.
  2. Стерилизовать операционного поля с 70% изопропилового спирта салфетки. Настройка хирургических салфеток для обеспечения стерильной поле поддерживается во время операции.
  3. Взвешивание каждой мыши до операции. Администрирование дозы 0,05 мг / кг массы тела бупренорфина, подкожно.
  4. Обезболить животное путем введения изофлуран в дозе 4% в индукционной камере изофлуран машины.
  5. После того, как животное находится под наркозом, следует применять мазь для глаз, чтобы предотвратить обезвоживание, установите животное на грелку на 37 ° С, и убедитесь, что голова мыши правильно расположен в анестезии конуса. (Примечание: Используйте источник нагрева, который не будет вызывать термические ожоги, то есть циркулирующая вода покрывало, бутылку с горячей водой, или эквивалент.). В этот момент введения дозы 2% изофлуран для животного.
  6. Бритье спинной поверхности мыши, примерно 1 см вокруг предполагаемого места разреза.
  7. Лечить разреза SITE промывкой 70% -ным изопропиловым спиртом салфеток, а затем с раствором йода (10% повидон-йода, 1% активного йода). Повторите 3 раза.

2. Спинной Ламинэктомия

  1. Прежде чем сделать разрез, убедитесь, что животное правильно наркозом, проверяя рефлексы с помощью ног или хвоста метод крайнем случае.
  2. Сделайте надрез вдоль грудного отдела позвоночника с скальпелем и лезвия, а затем проверки рефлексов снова. Арка назад, чтобы помочь правильно визуализировать достопримечательности, такие как границы между позвонками.
  3. Вырезать через кожу. Вставьте втягивающего держать кожу и фасции назад от спинного мозга. Очистка ткани по обе стороны от позвоночника подвергать мышцы, охватывающие позвоночник.
    ПРИМЕЧАНИЕ: хирург должен быть знаком с анатомическим ориентирам. Например, нижний угол лопатки соответствует Т7. В верхней части природного кривой спинного мыши является Т12 и может быть использовано в качестве точки отсчета.
  4. С рРопер освещение, определить пространство между позвонками. Найти задний конец T10 и сократить мышцы и фасции перпендикулярно межпозвонкового дискового пространства. Вырезать достаточно, чтобы разоблачить остистых и задней пластинки T10.
  5. Используя пару штрафа наконечником Дюмон # 5 щипцами, удалить некоторые из ткани из пластинки и остистого отростка, чтобы выставить небольшой кусочек спинного мозга. При необходимости, используйте Пинцет хирургический, чтобы стабилизировать позвоночник.
  6. Выполните ламинектомию, вставив одну сторону парой маленьких ножниц Vana вдоль дорсолатеральной стороне позвонка и непосредственно под пластинки.
    1. Сделайте маленькие, осторожные ножницы, чтобы прорваться через боковой стороны позвоночного пластинки. Убедитесь, что никакого давления не применяется к спинному мозгу.
    2. Повторите с другой стороны.
    3. Слегка надавливайте, чтобы остановить кровотечение, при необходимости с Q-Tip или хирургического губкой, заботясь, чтобы не оказывать давление на спинной мозг.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Подготовка гель пенызамачивают в стерильном физиологическом растворе в том случае, кровотечение необходимо контролировать.
    4. После того, как разрезы были сделаны, снимите спинной части позвонка и аккуратно очистить все вложения ткани. Используйте соответствующие средства для остановки кровотечения в случае необходимости.

3. спинного мозга сжатия

  1. Использование roungeurs или Ламинэктомия щипцов, гарантировать, что боковые стороны спинного мозга свободны от позвоночного кости таким образом, что калиброванные щипцы для компрессионной травмы может расположить по обе стороны от позвоночника. Руки щипцов должны иметь возможность быть размещены в эпидуральное пространство на соседних сторонах спинного мозга и кончиков щипцов должны быть в состоянии достигнуть пол позвоночного канала.
    1. Убедитесь, что видимость спинного мозга хорошо.
  2. Расположите калиброванный Dumont # 5 щипцы примерно в середине открытой сегмента спинного мозга. Напомним, что герб силыPS должен быть помещен в эпидуральном пространстве на смежных сторон и советы должны касаться пола позвоночного канала, чтобы генерировать воспроизводимые травмы.
  3. Осторожно сжать спинной мозг, пока распорки не подключиться. Держите на месте в течение 15 сек.
  4. Осторожно освободить сжимающее усилие и удалить пинцетом калиброванные из спинного мозга. Стерильный физиологический раствор должен быть использован, чтобы восстановить гомеостаз до рану закрывают.

4. Рана закрытия

  1. Тщательно шов мышечный слой над спинного мозга, заботясь, чтобы не нарушить или оказать давление на спинной мозг.
  2. Используйте либо швов или скобок, чтобы закрыть кожу на рану.
  3. При использовании газа анестетик, начинают сужаться / выключить анестезии.
  4. Администрирование 0,1 мл лактата пальцами на 10 г массы тела, чтобы помочь аккаунт для обезвоживания во время операции и после операции, когда животное находится вялыми и не оправилась от травмы. Решение должно быть Warmed до температуры тела перед инъекцией.
  5. Наведите в постельных принадлежностей без клетки. Клетка должна лежать сверху грелку (как описано в 1.1.5) таким образом, что позволяет половины площади клетки, чтобы быть на площадке, в то время как другая половина лежит на прилавке RT, с тем чтобы дать мыши варианты климат, когда он будет амбулаторно. Позаботьтесь, чтобы убедиться, что "восстановление клетка" находится в тихом месте. Внимательно следить за животное, пока он не очнулся, и в это время мышь может быть передано регулярной клетке с подстилкой.

5. Послеоперационный уход

  1. После операции вводить дозу 0,05 мг / кг массы тела бупренорфина подкожно каждые 12 ч в течение первых 3 дней после операции, а затем по мере необходимости, чтобы управлять симптомы боли.
  2. Администрирование дозы лактата пальцами (0,1 мл на 10 г веса тела подкожно) в течение первых 3 - 5 дней после операции. Дайте эту дозу, если / когдаIMAL начинает демонстрировать признаки обезвоживания вне этого начального периода времени.
  3. Вручную выразить мочевой пузырь животных, используя Crede маневр два раза в день. Аккуратно прощупать живот животного, чтобы найти мочевого пузыря, а затем применить нежный понижательное давление, пока мочевой пузырь пуст.
    1. Если мочевой пузырь не опустошается или моча кровавое или облачно, управлять 50 мг / кг веса тела в Baytril животному с помощью interperitoneal инъекции в течение 10 дней.
  4. Монитор животных на наличие признаков аутофагии, обезвоживания и чрезмерной потери веса (более 20% от массы тела). Если животное испытывает любой из этих симптомов проконсультируйтесь с ветеринаром немедленно в отношении вариантов лечения, или усыпить животное гуманно следующие рекомендации IACUC.
    1. Учитывая, что подвижность может быть ограничена, сразу после операции, принять необходимые меры, чтобы убедиться, животные имеют доступ к пище и воде. Предварительно упакованные влажные корма, а такжес гидрогелем, могут быть сделаны доступными для животных в этих случаях.

6. Оценить повреждение тканей, возникающие в результате сжатия травмы

  1. Обезболить животное, как описано в шагах 1,4 и 1,5. Проверьте глубину анестезии пальца щепоткой и мониторинга роговицы мигания рефлексов. Когда животное нечувствителен к стимулам, перейдите к шагу 6.2.
  2. Выполните внутрисердечной перфузии 10.
    1. Защиту грудную полость и вставить иглу в левый желудочек. Промыть существующие жидкости с 20 - 30 мл охлажденного на льду забуференного фосфатом физиологического раствора (PBS) с последующим 15 - 25 мл охлажденного льдом 4% параформальдегида (PFA).
  3. Удалить спинной мозг.
    1. Отрежьте спинной кожи к спинному мозгу и убрать лишнюю ткань, окружающую длину позвоночника.
    2. Акцизный позвоночника и отрезать оставшийся ткани. Фактический уровень ламинектомии и яnjury может быть подтверждено путем подсчета ребер.
    3. Используйте Vanna ножницы и пинцет, чтобы вытеснить небольшие участки позвоночника в направлении хвостовой-к-ростральная. Продолжить, чтобы сократить до мозга не подвергается достаточно, чтобы позволить безопасное удаление. Визуализация местоположении резания и процесс может быть облегчен путем использования стереоскопе.
  4. Поместите ткани спинного мозга в 4% PFA. Разрешить ткани к пост-исправления в этом растворе в течение 24 ч при 4 ° С.
  5. Cryoprotect ткани путем инкубации в 30% сахарозы в течение 24 ч при 4 ° С.
  6. Код для вставки ткани в октябре Короче говоря, взять ткань из 30% сахарозы инкубации и удалите излишки раствора. Поместите ткань в cryomold наполненной октября и инкубировать в течение 1 ч при 4 ° С.
    1. Удалить плесень от 4 ° C, подтверждают направленного ориентацию ткани, поставить форму в мелкую тарелку 2-метилбутан (предварительно охлажденной в течение 1 ч на сухом льду) и позволяют октября полностью затвердеть. Держите на сухом льду, если использовать немедленно или СТОповторно при -80 ° С.
  7. Отрежьте ткань в 20 мкм сагиттальных срезах с помощью криостата. Гора ткани непосредственно на слайдах. Хранить при температуре от -20 ° С до использования.
  8. Выполните гематоксилином и эозином (H & E) пятна.
    1. Вкратце, увлажняет ткань (5 мин, 2 раза), пятно гематоксилин (2,5 мин) и промывают водой (1 мин, 2 раза).
    2. Инкубируйте ткани в 50%, а затем 70% -ным этанолом (3 мин каждый), краситель с эозином (45 сек), и обезвоживают путем инкубации в 90% (5 сек), 95% (5 сек), 100% этанол (2 мин) и изопропанол (2 мин).
    3. Ясно в ксилоле (5 мин, 3 раза).
      ПРИМЕЧАНИЕ: H & E окрашивание будет меняться в зависимости от конкретной толщины слоя и условий ткани. Таким образом, стандартизация необходима, прежде чем приступить экспериментальные тканей образцов.
  9. Покрытие ткани с тонкой полоской предметный столик Permount (~ 100 мкм) и покровное. Нажмите вниз на всех сторонах покровное, чтобы обеспечить надлежащее распределение жидкости. Пусть скользит сухой O / N.
  10. Visualize срезах тканей с использованием цифрового микроскопа захвата изображения с помощью прилагаемого программного обеспечения.

Результаты

Мы провели ламинэктомии на 12 мышей (25 - 30 г), как описано выше, с последующим спинного мозга сжатия в 0,25 мм (N = 4), 0,35 мм (N = 4) и 0,55 мм (N = 4). Мы приносили в жертву животных в три (N = 6) и семь (п = 6) дней после травмы внутрисердечной перфузии. Спинной мозг удаляли из позвоночного столба, и ткань была подготовлена ​​и обработана, как описано выше. Изображения всей спинного мозга были взяты с цифровой микроскоп Leica EZ4 и сопутствующего программного обеспечения. Изображения срезов спинного мозга были взяты на увеличение 2х, используя цифровой микроскоп Olympus и сопутствующего программного обеспечения.

Мы обнаружили, что компрессия спинного мозга производит травмы с эпицентром в месте сжатия (рис 1). Последствия травмы продлить на несколько миллиметров в ростральных и хвостового направлениях. Тяжесть травмы увеличилось расстояние между прокладками снизился (0,25 мм> 0,35 мм>0,55 мм, рисунок 2). Через три дня после сжатия была кровь в эпицентре травмы и прилегающих регионов, которые не представляют 7 дней после травмы. 0.25 мм и 0.35 мм сжатия производится полость, но не модель 0,55 мм. После 7 дней, спинной и брюшные белое вещество в значительной степени уменьшается в размерах в эпицентре, серый организации материи была сильно искажена, и кавитация был настойчив. Эти cytoarchitectonical изменения переведены на моторных и сенсорных изменений в поведении животного оценивается с использованием соответствующих тестов, таких как мышь шкале Basso опорно-двигательного функции и фон Фрея волос и хлористый этил тестов для сенсорной функции, как мы показали, в предыдущих публикациях 8.

figure-results-1
Рисунок 1. Типичные изображения неповрежденной спинного мозга до и AFтер травмы. (А) неповрежденными спинного мозга. (В) спинного мозга после того, как 0,35 мм сжатия. Стрелки указывают границы травмы. Asterisk удостоверяющий эпицентр травмы. D = Спинной, L = боковой. Масштабная линейка:. 0,50 мм Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этой цифры.

figure-results-2
Рисунок 2. Характерные изображения мыши спинного мозга до и после компрессионной травмы в различной ширины сжатия. () Сагиттальный раздел управления спинного мозга. (B) Корональные части в эпицентре 0,35 мм SCI 7 дней травмы после сжатия (точек на дюйм). (C, E, G) сагиттальных срезах спинного мозга 3 точек на дюйм в ширину 0,25 , витражи 0,35 или 0,55 мм. (D, F, H) сагиттальных срезах Н & Е спинного мозгас 7 дюйм шириной до 0,25, 0,35 или 0,55 мм. Asterisk удостоверяющий эпицентр травмы. Все разделы окрашивали H & E. D = Спинной, L = боковой. Масштабная линейка:. 1,25 мм Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этой цифры.

Обсуждение

Выбор модели SCI играет важную роль в разработке экспериментов для определения эффективности лечения человека случаев SCI. Такие эксперименты требуют животную модель, которая хорошо воспроизводимым, чтобы ограничить изменчивость, которая может привести к Спорные данные. Они также должны иметь клиническое значение, чтобы точно оценить состояние человека они моделирования. С этой целью выбора сжатие или травму contusive над рассечения более клинически значимым 3. Тем не менее, ударные и падение веса аппараты для контузии травмы требуют использования дорогих и сложных машин. В отличие от этого, калиброванный щипцы модель ТСМ утилизирует изменены щипцы, которые легко собрать из обычных лабораторных материалов, а операция требует только один дополнительный шаг после стандартного спинного ламинектомии подвергать спинного мозга. Тем не менее, один недостаток данного метода является то, что сжимающая сила всегда применяется в поперечном направлении, а не на спинной, ачаще всего проявляется в человеческих клинических случаев SCI 9, и сжимающих травм, полученных с помощью метода повлиять на большую ростральную-каудальном степени ткани, чем у моделей контузии 1,2. Эта модель была продемонстрирована у истоков техники, и нас, чтобы генерировать воспроизводимые SCI 7,11, и хорошо подходит к размеру мышей. Кроме того, эта модель травмы позволяет животные должны быть оценены после операции и терапевтические процедуры с использованием множества поведенческих тестов, таких как мышь шкале Basso для передвижения и анализ волос фон Фрея, чтобы убедиться, что когорта животных одни и те же тяжесть травмы и неврологические дефициты 7,11-13. Эти же методы также могут быть использованы для оценки эффективности лечения вводить животным при следственных исследований, выполняя общие критерии для животных моделей, используемых для оценки терапии для ТСМ 2,7.

Способ получения калиброванного Forcepдля модели травмы проста и может быть выполнена с множеством различных способов. Мы использовали метод распорную 11, как опубликовано Plemel 7, и также модифицированы щипцов с помощью небольшого винта, который не только обеспечивает более простой способ для создания устройства сжатия, а также позволяет универсальность при корректировке окончательного ширину сжатия, из выгоду для сравнительных исследований. Диапазон вариантов в создании щипцов практически неограничен тех пор, пока прокладка (ы) обеспечивают стабильные средства всегда закрывать щипцы же расстоянии, и может выдержать автоклавирование и стерилизацию. Хирургические методы, описанные в этом видео высокой воспроизводимостью между пользователями, однако необходимо проявлять осторожность при выполнении ламинектомию и ушивание животное после процедура была выполнена таким образом, что спинной мозг не страдают какой-либо дополнительные силы сжатия, которые могут увеличить Тяжесть травмы и смешаем будущих экспериментов.

При правильном обучении и практике, калиброванный щипцы модель компрессионной травмы хорошо подходит для выполнения SCI мышей, которые имитируют клинические случаи наблюдались у людей 2,3,7. Из-за легкости создания щипцы, производя мышей того разной степени тяжести травм можно легко сделать. Это будет большим преимуществом для наблюдения генетические эффекты на ГКИ разной степени тяжести у трансгенных мышей, а также оценки эффективности стволовых клеток трансплантации у мышей. Большинство исследований в литературе были проведены на крысах-за их размера, которые, как правило делает операции проще выполнять. Однако метод опубликованные Plemel и др. 7 и описана нами в этом видео необходимо включить SCI должны быть выполнены на мышах с большой легкостью и воспроизводимости.

Раскрытие информации

Авторам нечего раскрывать.

Благодарности

Финансирование этой работы было предоставлено больницами Шрайнерс и стипендиями CIRM для AMC и AM. Мы также хотели бы выразить признательность Plemel et al.7 за первое проектирование и публикацию откалиброванной модели щипцов.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Изофлуран аппаратSmiths Medical PM, IncVCT302
ИзофлуранФеникс ФармасьютикалNDC: 66794-013-25
Препарирующий эндоскопSeiler Прецизионные микроскопыSSI 202/402
Germinator-500 (инструмент стерилизатор)Thomas Scientific3885A20
Пралюбе (глазная мазь)DechraNDC 17033-211-38
Рукоятка скальпеля3Fine Science Tools10003-12
Лезвие скальпеля (#11)Fisher Scientific  08-914B
Втягивающее устройство (Colibri)Fine Science Tools17000-03
Friedman Pearson roungeurFine Science Tools16021-14
Ножницы Vanna (Castroviejo)RobozRS-5658
Тканевые щипцыFine Science Tools11029-14
Щипцы для ламинэктомии (Dumont #2)Fine Science Tools11223-20
Щипцы Dumont #5Fine Science Tools11252-20
СтеплерFine Science Tools12031-07
Скобы (зажимы для ран)Reflex7203-1000
ШвыHenry Schein101-2636
Иглы (30 G x ½)Шприц BD Biomedical305106
(1 мл)BD Biomedical309659
байтрил (энрофлоксацин)BayerNADA 140-913
Бупренекс (бупренорфин)Cardinal HealthNDC 12496-0757-1

Ссылки

  1. McDonough, A., Martinez-Cerdeno, V. Endogenous proliferation after SCI in animal models. Stem Cells Int. 2012, 387513(2012).
  2. Onifer, S. M., Rabchevsky, A. G., Scheff, S. W. Rat models of traumatic SCI to assess motor recovery. ILAR J. 48 (4), 385-395 (2007).
  3. Bunge, R. P., Puckett, W. R., Becerra, J. L., Marcillo, A., Quencer, R. M. Observations on the pathology of human SCI. A review and classification of 22 new cases with details from a case of chronic cord compression with extensive focal demyelination. Adv Neurol. 59, 75-89 (1993).
  4. Beattie, M. S., et al. Endogenous repair after spinal cord contusion injuries in the rat. Exp Neurol. 148 (2), 453-463 (1997).
  5. Basso, D. M., Beattie, M. S., Bresnahan, J. C. Graded histological and locomotor outcomes after spinal cord contusion using the NYU weight-drop device versus transection. Experimental Neurology. 139 (2), 244-256 (1996).
  6. Krishna, V., et al. A contusion model of severe SCI in rats. J Vis Exp. 78, (2013).
  7. Plemel, J. R., et al. A graded forceps crush SCI model in mice. J Neurotrauma. 25 (4), 350-370 (2008).
  8. Wu, D., Shibuya, S., Miyamoto, O., Itano, T., Yamamoto, T. Increase of NG2-positive cells associated with radial glia following traumatic SCI in adult rats. J Neurocytol. 34 (6), 459-469 (2005).
  9. Namiki, J., Tator, C. H. Cell proliferation and nestin expression in the ependyma of the adult rat spinal cord after injury. Journal of Neuropathology and Experimental Neurology. 58 (5), 489-498 (1999).
  10. Teletin, M., et al. Histopathology in Mouse Metabolic Investigations. Current Protocols in Molecular Biology. 29, (2007).
  11. McDonough, A., Hoang, A. N., Monterrubio, A. M., Greenhalgh, S., Martinez-Cerdeno, V. Compression injury in the mouse spinal cord elicits a specific proliferative response and distinct cell fate acquisition along rostro-caudal and dorso-ventral axes. Neuroscience. 254, 1-17 (2013).
  12. Basso, D. M., et al. Basso Mouse Scale for locomotion detects differences in recovery after SCI in five common mouse strains. J Neurotrauma. 23 (5), 635-659 (2006).
  13. Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw. J Neurosci Methods. 53 (1), 55-63 (1994).

Перепечатки и разрешения

Теги

Дорсальная ламинэктомияспинной мозг мышигистохимические методышкала Бассо для мышейтест фон Фреятест с этилхлоридоминтракардиальная перфузияуход за параплегическими животными
Калиброванный щипцы Модель спинного мозга Компрессия травмы
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.