Контрастная ультразвуковая визуализация - это надежный инструмент in-vivo для количественной оценки кровотока спинного мозга в экспериментальной модели травмы спинного мозга крысы. Данная статья содержит исчерпывающий протокол применения данной методики в сочетании с моделью ушиба при травме грудного отдела спинного мозга.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Контраст расширенного ультразвуковое исследование для оценки спинного мозга кровотока в экспериментальной повреждением спинного мозга
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Снижение расхода спинного мозга крови (SCBF) (т.е. ишемии) играет ключевую роль в травматического повреждения спинного мозга (ТСМ) патофизиологии и, соответственно, важной целью для нейропротективных лечения. Хотя несколько методов были описаны для оценки SCBF, все они имеют существенные ограничения. Чтобы преодолеть тот, мы предлагаем использовать в режиме реального времени усиленного контрастом ультразвуковой томографии (CEU). Здесь мы опишем применение этого метода в крысиной модели ушиба ТСМ. Яремную катетер сначала имплантировали для повторного введения контрастного агента, раствора хлорида натрия элегазовых инкапсулированных микропузырьков. Позвоночник затем стабилизировался с заказ 3D-кадра и спинного мозга твердая мозговая оболочка подвергается по ламинэктомией в THIX-ThXII. Ультразвуковой зонд затем устанавливают на задней поверхности твердой мозговой оболочки (покрытого ультразвуковой гель). Для оценки базового SCBF, один внутривенную инъекцию (400 мкл) противопоказанийул агент наносят записать его прохождение через неповрежденную спинного мозга микрососудов. Вес падение устройство затем используется для генерации воспроизводимого экспериментальную модель ушиб SCI. Контрастное вещество повторно вводят через 15 мин после травмы, чтобы оценить после ТСМ SCBF изменения. КЕС позволяет в режиме реального времени и в естественных условиях оценки изменений SCBF следующей ТСМ. В неповрежденной животного, ультразвуковое обследование показало неравномерное кровотока по интактного спинного мозга. Кроме того, 15 мин после ТСМ, было критической ишемии на уровне эпицентре а SCBF сохранился в более отдаленных районах нетронутыми. В районах, прилегающих к эпицентру (как ростральной и хвостовой), SCBF была значительно снижена. Это соответствует ранее описанной "ишемической полутени" зоне. Этот инструмент представляет большой интерес для оценки влияния терапии, направленных на ограничение ишемии и некроза тканей в результате После ТСМ.
Введение
Травматический травмы спинного мозга (SCI) является разрушительным состояние приводит к значительному нарушению в моторных, сенсорных и автономных функций. На сегодняшний день, никакой терапии не продемонстрировала свою эффективность у пациентов. Для такого причине, важно, чтобы определить новые методы, которые позволят улучшить оценку возможных методов лечения и может в дальнейшем выяснения травмы pathiophysiology 1.
ТСМ разделена на два последовательных этапа, называемого первичных и вторичных повреждений. Первичный травмы соответствует начальной механической инсульта. В то время как вторичное повреждение групп каскадных разл....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
ПРИМЕЧАНИЕ: Методы, описанные в этой рукописи были одобрены комитетом по биоэтике в Lariboisière школы медицины, Париж, Франция (CEEALV / 2011-08-01).
1. Подготовка прибора
- Подготовьте и очистите следующие инструменты для катетера Micro-щипцы, микро-ножницы, микро-сосудистый зажим, большие ножницы, хирургические нити (черный плетеный шелк 4-0) и 14 г катетер. Heparinize катетер с раствором гепарина (5000 ед / мл).
- Подготовьте и очистите следующие инструменты для ламинэктомией: большие ножницы, скальпель и фрезы кости. Выполните ламинэктомию с заказ фрезы кости, направленных на снижение риска причинения вреда спинного ....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
С описанным выше протокол, можно отобразить SCBF вдоль продольной спинного мозга сагиттальной сегмента.
В неповрежденной спинного мозга, как представляется, SCBF нарушения в паренхиме (рисунок 12). Это может быть связано с переменной распределения radiculo-медуллярной артерии (RMA) от одного животного к другому. RMA относится к сегментарных артерий, которые достигают передней спинальной артерии (ASA) и, следовательно, обеспечивают кровоснабжение спинного мозга паренхимы. В о.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Хотя мы описали, как использовать CEU в крысиной модели SCI ушиб, этот протокол может быть изменен, чтобы соответствовать другим экспериментальных целей или моделей SCI. Мы выбрали для измерения SCBF только в двух временных точках (до того травм и 15 мин после SCI), однако количество временных точек и задержка между измерениями SCBF может быть адаптирована для удовлетворения потребностей других исследований. Например, в нашей предыдущей работе 17, мы измерили SCBF в пяти последовательных временных точках на п.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторы заявляют, что у них нет конкурирующего финансового конфликта интересов. Ультразвуковой аппарат был любезно предоставлен компанией Toshiba France. Насос Vueject был любезно предоставлен компанией Bracco France.
Благодарности
Выражаем признательность Стефани Горжар, Тьерри Ширлинку (Toshiba France) и Кристофу Лазару (Bracco France).
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Внешний фиксатор Hoffman 3 | Stryker, Каламазу, США | Модульная система, используемая для создания изготовленной на заказ 3D-рамы и шарнирной руки, удерживающей ультразвуковой зонд | |
| Toshiba Applio | Toshiba, Токио, Япония | Ультразвуковой аппарат | |
| Sonovue | Bracco, Милан, Италия | Контрастное вещество: микропузырьки | |
| Vueject pump | Bracco, Милан, Италия | Электрическая помпа для инфузии микропузырьков болюсно | |
| Aquasonic Ultrasound Gel | Parker Laboratories, Фэрфилд, Нью-Джерси, США | Гель для ультразвука используется для передачи ультразвуковых волн | |
| Isovet | Piramal Healthcare, Мумбаи, Индия | Изофлуран используется для анестезии | |
| Ultra Extend | Toshiba, Токио, Япония | Программное обеспечение для количественной оценки кровотока | |
| спинного мозгаMastercraft Набор мини-плоскогубцев из пяти предметов, товар #58-4788-6 | Canadian Tire, Торонто, Канада | Набор плоскогубцев для самостоятельной работы |
Ссылки
- Cadotte, D. W., Fehlings, M. G. Spinal cord injury: a systematic review of current treatment options. Clin Orthop Relat Res. 469 (3), 732-741 (2011).
- Beattie, M. S., Farooqui, A. A., Bresnahan, J. C. Review of current evidence for apoptosis after spinal cord injury. <....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
