Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Использование хирономид (Diptera), поверхностно-Плавающие куколки экзувии как Bioassessment протокола Rapid для водоемов

11.4K просмотров

DOI:

10.3791/52558

24 июля 2015 г.

В этой статье

Краткое содержание

Протоколы быстрой биооценки с использованием бентосных макробеспозвоночных часто используются для мониторинга и оценки качества воды. Эффективный протокол включает в себя сборы поверхностно-плавающих куколочных эксувий (SFPE) Chironomidae. Здесь описываются методы полевого сбора, лабораторной обработки, монтажа предметного стекла и идентификации Chironomidae SFPE.

Аннотация

Быстрые протоколы, использующие донные bioassessment макробеспозвоночных комплексы были успешно использованы для оценки воздействия человека на качество воды. К сожалению, традиционные донные личинки методы отбора проб, такие как погружной сети, может быть трудоемким и дорогостоящим. Альтернативный протокол включает в себя коллекцию Chironomidae поверхности плавающего куколки экзувия (SFPE). Chironomidae является видовой богатая семья мух (Diptera), чьи незрелые стадии, как правило, происходят в водной среде обитания. Взрослые хирономид выйти из воды, оставляя их куколки кожи или экзувии, плавающие на поверхности воды. Экзувии часто накапливаются вдоль банков или за препятствий со стороны действия ветра или воды тока, где они могут быть собраны для оценки хирономид разнообразие и богатство. Хирономиды может быть использован в качестве важных биологических показателей, так как некоторые виды более терпимы к загрязнению, чем другие. Таким образом, относительное обилие и видовой состав собранной SFPE отражаютизменения качества воды. Здесь методы, связанные со сбором поля, лабораторной обработки, слайд монтажа и идентификации звонцов SFPE подробно описаны. Преимущества метода SFPE включают минимальное волнение в области отбора проб, эффективное и экономичное сбор образцов и лабораторной обработки, легкость идентификации, применимость в почти всех водных средах, и потенциально более чувствительное измерение напряжения экосистем. Ограничения включают неспособность определить личинок использование микросреду и неспособность определить куколки экзувии для видов, если они не были связаны с взрослыми мужчинами.

Введение

Программы биологического мониторинга, которые используют живые организмы, чтобы оценить состояние окружающей среды, часто используются для оценки качества воды или контролировать успех программы восстановления экосистем. Быстрые протоколы bioassessment (РСП), использующие донные макробеспозвоночных комплексы были популярны среди государственных органов водных ресурсов с 1989 года 1. Традиционные методы отбора проб донных макробеспозвоночные для ОДП, такие как рыболовный сачок, Surber сэмплер, и Hess сэмплер 2, может быть по времени , дорого, и может измерить только комплексы с определенной микросреде 3. Эффективность, альтернативные ОДП для генерации биологической информации о конкретном водоеме включает сбор Chironomidae поверхности плавающего куколки экзувия (SFPE) 3.

Chironomidae (Insecta: Diptera), широко известный как не кусаться мошек, мух являются holometabolous, что, как правило, происходят в водной среде до выхода, как взрослые 60; на поверхности воды. Семья хирономид является видовое разнообразие, с примерно 5000 видов, описанных во всем мире; Однако, как многие, как 20000 видов, по оценкам, существует 4. Хирономид полезны в документировании воды и качество среды обитания во многих водных экосистем из-за их большого разнообразия и переменных допустимых уровней загрязнения 5. Кроме того, они часто являются наиболее распространенными и широко распространенные донные макробеспозвоночные в водных системах, как правило, составляет 50% или более видов в сообществе 5,6. После появления земного взрослых, куколки экзувии (бросить куколки кожи) остается плавающие на поверхности воды (рис 1). Куколочные экзувии накапливаются вдоль банков или за препятствий под действием ветра или воды тока и может быть легко и быстро собраны, чтобы дать всеобъемлющий образец видов хирономид, которые возникли во время предыдущего 24-48 ч 7.

ntent "> относительное изобилие и таксономический состав собранной SFPE отражает качество воды, учитывая, что некоторые виды очень терпимы загрязнения, в то время как другие являются весьма чувствительными 5 метод SFPE имеет много преимуществ по сравнению с традиционными методами отбора проб личинок хирономид в том числе: (1). минимальна , если таковые имеются, нарушение среды обитания происходит в зоне отбора проб; (2) образцы не сосредоточиться на сборе живые организмы, а неживые кожи, так траектория динамики сообщества не влияет; (3) определение в роду, и часто виды, относительно легко даны соответствующие ключи и описания 3; (4) сбор, обработка и идентификации образцов является эффективным и экономичным по сравнению с традиционными методами отбора проб 3,8,9; (5), накопленные экзувии представляют таксонов, что произошли от Широкий ассортимент микроместообитаний 10; (6) метод применим практически во всех водных средах, в том числе потоков и рек, лиманов, ЛакES, пруды, бассейны рок, и водно-болотные угодья; и (7), может быть, SFPE быть более чувствительным индикатором здоровья экосистемы, так как они представляют лиц, которые завершили все этапы незрелые и успешно возникли как взрослые 11.

Метод SFPE не новый подход для сбора информации о хирономид общин. Использование SFPE было впервые предложено Тинеман 12 в начале 1900-х годов. Разнообразие исследований использовали SFPE для таксономических исследований (например, 13-15), биоразнообразия и экологических исследований (например, 7,16-19), и биологические оценки (например, 20-22). Кроме того, некоторые исследования затрагивались различные аспекты построения выборки, размер выборки, и количество образцов событий, необходимых для достижения различных уровней обнаружения видов или родов (например, 8,9,23). Эти исследования показали, что сравнительно высокий процент видов или родов могут быть обнаружены с умеренным efforт или расходы, связанные с обработкой образца. Например, Андерсон и Ferrington 8 определено, что на основе 100-счета подвыборки, 1/3 й меньше времени требуется, чтобы забрать образцы SFPE по сравнению с DIP-нетто образцов. Еще одно исследование установлено, что образцы 3-4 SFPE может быть отсортирован и определены для каждого погружения в чистой пробы и образцы, которые были SFPE более эффективным, чем DIP-нетто образцов на выявление видов, видовое богатство увеличивается 3. Например, на участках с видового богатства значений 15-16 видов, в среднем рыболовный сачок эффективность была 45,7%, в то время как образцы были SFPE 97,8% эффективнее 3.

Существенно, что метод SFPE был стандартизирован в Европейском Союзе 24 (известный в технике хирономид куколки экзувии (CPET)) и Северной Америке 25 для экологической оценки, но способ не описан в деталях. Одно из приложений методологии SFPE был описан Ferrington и др. 3; Однако, основное внимание в этом исследовании было оценить эффективность, эффективность и экономичность метода SFPE. Целью данной работы является описание всех этапов способа SFPE в деталях, в том числе сбора проб, обработки лабораторных, слайд монтажа и идентификации рода. Целевая аудитория включает аспирантов, исследователей и профессионалов, заинтересованных в расширении традиционных усилий по мониторингу качества воды в своих исследованиях.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

1. Подготовка полевого сбора и сад

  1. Определить количество образцов SFPE, которые должны быть собраны на основе дизайна исследования и приобрести один образец банку (например, 60 мл) для каждого образца.
  2. Подготовьте две метки даты и местности для каждого образца банку. Разместите один на внутренней и прикрепить к другу на внешней части банки. Убедитесь, что каждая метка даты и местонахождение включает следующую информацию: страна, государство, графство, город, водоем, координаты GPS, дату и имя лица (лиц) сбор образца.
  3. Соберите других конкретных материалов и оборудования (табл конкретных материалов / оборудования).

2. Поле Коллекция

  1. Держите личинок лоток в одной руке и сито в другую. Опустите лоток личинок в воду, где SFPE аккумулировать (например, пена скопления, коряги, возникающих растительность, мусор, обратно вихри, и вдоль краев банковских) (рис 2а), позволяют Ватэ-э, экзувии, и мусор, чтобы войти в личиночной лоток и залить этот материал через сито. Если выборки в проточных системы, начинают на нижнем по потоку конце образца одним и работать вверх (фиг.2В). Если отбор проб в стоячих системы, начать с подветренной береговой линии.
    1. Повторите шаг 2,1 в течение 10 мин (или иным образом определена для конкретного режима выборки) в течение каждого заранее определенного одним образца (как правило, 100-200 м для образцов, взятых из потоков, но зависит от общей площади водной станции мониторинга); перемещаться между SFPE районах накопления соответственно.
  2. Концентрат мусора в одном из районов сито, используя шприц бутылку с водой с сайта образца и тщательно передачи образцов SFPE предварительно помечены образец банку с помощью щипцов и поток этанола из бутылки шприца. Заполните образец банку с этанолом.
  3. Повторите этапы 2,1 до 2,2 для всех образцов.

3. Образец Комплектование

ПРИМЕЧАНИЕ: Остальные этого протокола относится к 300 SFPE подвыборки и, возможно, потребуется внести изменения для других размеров подвыборки. См Бушар и Ferrington в 9 принципов прореживанием и частоты дискретизации для пошива методы SFPE встретиться учебно-определенных целей и ресурсов.

  1. Выделите 1-драма флакон для каждого образца SFPE; подготовить метку даты и локальности разместить внутри каждого флакона и заполнить флакон на ¾ с этанолом.
  2. Удалить крышку с соответствующего образца банку и проверить прилагается куколки экзувия. Аккуратно промойте содержимое от крышки на чашке Петри с использованием шприц бутылку с этанолом. Найти и удалить метку из внутренней части образца банку с помощью щипцов и аккуратно промойте содержимое выключения этикетке на чашке Петри. Установите метку в сторону.
  3. Передача содержимого образца банку в личиночной лоток, промывают этанолом, чтобы обеспечить не SFPE остаются в банке образца. Трансфер часть куколки экзувии, Resiиз-за, и этанол из лотка к чашке Петри. Убедитесь, что образец рассматривается в этаноле.
  4. Поместите чашку Петри под стерео микроскопом. Систематически проверять содержимое чашки Петри для куколки экзувия. Выберите все куколки экзувии из чашки с помощью щипцов и место в пробирке. Не берите образцы, которые разбиты (т.е., не имеют, по крайней мере половину головогруди и брюшка), сушат, или сжатый, чтобы избежать проблем идентификации.
    Примечание: Идентификация видам часто требует, чтобы весь образец присутствует, хотя в некоторых случаях, идентификация рода уровня может быть возможным с частичным образцов.
    1. Вихревой блюдо и сканирования для дополнительного куколки экзувия, в том числе любые, которые могут застрять в стороны блюдо, а также, любые малых и полупрозрачных образцов, которые, возможно, не будет обнаружен изначально. Повторяйте, пока два последовательных сканирует не обнаружено никаких дополнительных куколки экзувии.
  5. Повторите шаги 3.3 и3.4, пока все или 300 куколок экзувии не были собраны. При 300 куколок экзувии были выбраны, возвращают остаток от чашки Петри с личиночной лоток и промойте чашки Петри с этанолом. Затем, перевести остаток от личиночной лоток на пустой образца банку, добавить метку даты и локальности, и положил крышку на банку. Сохраните или распоряжаться остатком в соответствии с протоколами по конкретным проектам.

4. Образец Сортировка

  1. Налейте все выбрал куколки экзувии из маркированную емкость в чашку Петри с достаточным количеством этанола, чтобы только покрыть образцов.
  2. Под микроскопом стерео, отдельные образцы в различных морфологических групп (т.е., morphotaxa) и поместить каждый morphotaxon в отдельно меченого флаконы заполнены 3/4 й полный этанолом.
    1. Использование внешних морфологических характеристик, чтобы отделить хирономид morphotaxa. Например, из цефалоторакса, использовать различия в присутствии, размер, форма иокраска головных бугров, фронтальные бородавки, лобные волоски, и грудной рога. Из брюшной полости, использовать шипы, hookrows, шагрень, щетинки и отроги брюшных сегментов, в дополнение к анальных долей для разделения morphotaxa (4А). См Ferrington и др. 5, Saether 26 Пиндер и Рейсс 27 дополнительных описаний и рисунков морфологических характеристик.
    2. Используйте дополнительные этанол, если образцы начинают сохнуть.

5. Презентация Монтаж

  1. Заполните одну лунку нескольких луночный планшет для каждого morphotaxon с 95% этанола.
    1. Поместите несколько представлений (например, 25% от общего числа) каждого morphotaxon быть установлен в слайд отдельных скважин пластины. Разрешить образцы сидеть в хорошо, по крайней мере 10 мин для обезвоживания достаточно.
  2. Этикетка слайды с соответствующей сайта, сбора, идентификации и informatiна (рис 3).
  3. Место слайд на стерео микроскопа.
    ПРИМЕЧАНИЕ: шаблон слайда, приклеенный к стадии полезно для последовательного размещения.
  4. Поместите каплю эупарал на слайде; распространить эупарал так, что он приблизительно соответствует по размерам покровным. Используйте надлежащую вентиляцию при работе с эупарал.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Используйте надлежащую вентиляцию при работе с эупарал.
  5. Вставить представителя от первого morphotaxon в эупарал с помощью щипцов.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Для аннулированию избыток этанола из образца, используя щипцы, мягко нажмите образца на лаборатории салфетки до внедрения его в эупарал.
  6. Отделите головогрудь с живота с помощью остроконечного пинцета и / или рассечение зондов (рис 4а).
    1. Сплит головогрудь вдоль шва ecdysial (рис 4В) и откройте головогрудь, так что шовный края находятся на противоположных сторонах (рис 4в).
    2. Расположите Cephalothorax так, что брюшная сторона обращена вверх (рис 4C).
    3. Расположите живота спинной стороне до; разместить непосредственно под головогрудь (рис 4C).
  7. Поместите покровное на образце. Держите покровное под углом, с одного края касаясь слайд, а затем медленно опустите и падение покровное, чтобы уменьшить образование пузырьков воздуха. Слегка нажмите на покровное, чтобы сгладить образца.
  8. Повторите шаги 5.3 через 5,7 для всех образцов обезвоженных.

6. Род Идентификация

  1. Определите род слайд-монтажа образцов с использованием сложного микроскопа. Определить образцы к роду помощью клавиш и диагнозы в Wiederholm 28 и Ferrington и др. 5. При необходимости, подтвердить идентификацию на уровне семьи с использованием Ferrington и др. 5. ПРИМЕЧАНИЕ: Там были многочисленные общие описания и изменения начиная с Wiederholm 28 и Ferrington,и др. 5, следовательно, эти ключи и диагнозы неполны и должны быть дополнены с первичной литературы.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Рисунок 1 иллюстрирует жизненный цикл хирономид; незрелые стадии (яйца, личинки, куколки), как правило, происходят в, или близко связаны, в водной среде. После завершения личиночной стадии жизни, личинка строит трубчатую приют и присоединяется с шелковыми секрета в окружающую подложки и окукливание происходит. После того, как развивается взрослый созрела, куколка освобождается и плавает на поверхности воды, где взрослый может выйти из куколки экзувия. Экзувии наполняется воздухом, и в силу внешней воско...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Наиболее важные шаги для успешного сбора SFPE образца, Комплектация, сортировка, монтаж слайд, и идентификации являются: (1) поиск областей высокого накопления SFPE в области исследования во время сбора поля (2А); (2) медленно сканирования содержимое чашки Петри для обнаружения всех SFPE во образца сбора; (3) разработку необходимой ловкость препарировать головогрудь с живота во время слайд монтажа (рис 4а); и (4) признания ключевые морфологические признаки хирономид куколки экзувия прав...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих финансовых интересов.

Благодарности

Финансирование для создания и публикации этого документа была представлена ​​через несколько грантов и контрактов исследовательской группы хирономид (LC Ferrington, младший, PI) в Департаменте энтомологии в университете Миннесоты. Благодаря Натан Робертс работы на местах для обмена фотографиями, используемые в качестве фигур в видео, связанные с этой рукописи.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
ЭтанолFisher ScientificS25309B 70-95%
Пластиковые бутылки для мытьяFisher Scientific0340923B
Банка для образцовFisher Scientific0333510BСтекло или пластик, рекомендуется 60 мл
Тестовое ситоAdvantech120SS12FРазмер ячеек 125 микрон
Лоток для личинокBioQuip5524Белый
стереомикроскоп
Флаконы со стеклянной оболочкойFisher Scientific0333926B
Пластиковая пипеткаThermo Scientific1371110от 30 до 35 капель/мл
Тонкие щипцыBioQuip4524#5
Чашка ПетриКаролина741158Стеклянная или пластиковая
многолуночная пластинаThermo Scientific144530Стеклянная или пластиковая
микрогорка Thermo Научный30100023 x 1 дюйм
Стеклянная крышка скользитThermo Scientific12-519-21GКруглая или квадратная
эупаральная монтажная среда BioQuip6372B
Ручка PigmaBioQuip1154FЧерный
зондBioQuip4751
KimwipesKimberly-Clark Professional™No 34120
размером 1 драм (Английский)

Ссылки

  1. Southerland, M. T., Stribling, J. B. Biological Assessment and Criteria: Tools for Water Resource Planning and Decision Making. Davis, W. S., Simon, T. P. , Lewis Publishers. 81-96 (1995).
  2. Merritt, R. W., Cummins, K. W., Resh, V. H., Batzer, D. P. An Introduction to the Aquatic Insects of North America. Merritt, R. W., Cummins, K. W., Berg, M. B. , 4th edition, Kendall/Hunt Publishing Company. 15-37 (2008).
  3. Ferrington, L. C., et al. Sediment and Stream Water Quality in a Changing Environment: Trends and Explanation. , International Association of Hydrological Sciences Press. 181-190 (1991).
  4. Ferrington, L. C. Freshwater Animal Diversity Assessment in Hydrobiology. Balian, E. V., Lévêque, C., Segers, H., Martens, K. , Springer. Netherlands. 447-455 (2008).
  5. Ferrington, L. C., Berg, M. B., Coffman, W. P. An Introduction to the Aquatic Insects of North America. Merritt, R. W., Cummins, K. W., Berg, M. B. , 4th ed, Kendall/Hunt Publishing Company. 847-989 (2008).
  6. Armitage, P. D., Cranston, P. S., Pinder, L. C. V. The Chironomidae: Biology and Ecology of Non-Biting Midges. 572, Chapman & Hall. (1995).
  7. Coffman, W. P. Energy Flow in a Woodland Stream Ecosystem: II. The Taxonomic Composition of the Chironomidae as Determined by the Collection of Pupal Exuviae. Archiv fur Hydrobiologie. 71, 281-322 (1973).
  8. Anderson, A. M., Ferrington, L. C. Proceedings of 18th International Symposium on Chironomidae on Fauna norvegica. Ekrem, T., Stur, E., Aagaard, K. 31, (2011).
  9. Bouchard, R. W., Ferrington, L. C. The Effects of Subsampling and Sampling Frequency on the Use of Surface-Floating Pupal Exuviae to Measure Chironomidae (Diptera) Communities in Wadeable Temperate Streams. Environmental Monitoring and Assessment. 181, 205-223 (2011).
  10. Wilson, R. S. Monitoring the Effect of Sewage Effluent on the Oxford Canal Using Chironomid Pupal Exuviae. Water and Environment Journal. 8, 171-182 (1994).
  11. Wentsel, R., McIntosh, A., McCafferty, W. P. Emergence of the Midge Chironomus tentans when Exposed to Heavy Metal Contaminated Sediment. Hydrobiologia. 57, 195-196 (1978).
  12. Thienemann, A. Das Sammeln von Puppenhäuten der Chironomiden. Eine Bitte um Mitarbeit. Archiv fur Hydrobiologie. 6, 213-214 (1910).
  13. Anderson, A. M., Kranzfelder, P., Egan, A. T., Ferrington, L. C. Survey of Neotropical Chironomidae (Diptera) on San Salvador Island, Bahamas. Florida Entomologist. 97, 304-308 (2014).
  14. Coffman, W. P., de la Rosa, C. Taxonomic Composition and Temporal Organization of Tropical and Temperate Assemblages of Lotic Chironomidae. Journal of the Kansas Entomological Society. 71, 388-406 (1998).
  15. Brundin, L. Transantarctic Relationships and their Significance, as Evidenced by Chironomid Midges. With a Monograph of the Subfamilies Podonominae and Aphroteniinae and the Austral Heptagyiae. Svenska Vetenskapsakademiens Handlingar. 11, 1-472 (1966).
  16. Anderson, A. M., Ferrington, L. C. Resistance and Resilience of Winter-Emerging Chironomidae (Diptera) to a Flood Event: Implications for Minnesota Trout Streams. Hydrobiologia. 707, 59-71 (2012).
  17. Anderson, T. Contributions to the Systematics and Ecology of Aquatic Diptera-A Tribute to Ole A. Saether. , Caddis Press. 99-105 (2007).
  18. Bouchard, R. W., Ferrington, L. C. Winter Growth, Development, and Emergence of Diamesa mendotae (Diptera: Chironomidae) in Minnesota Streams. Environmental Entomology. 38, 250-259 (2009).
  19. Hardwick, R. A., Cooper, P. D., Cranston, P. S., Humphrey, C. L., Dostine, P. L. Spatial and Temporal Distribution Pattens of Drifting Pupal Exuviae of Chironomidae (Diptera) in Streams of Tropical Northern Australia. Freshwater Biology. 34, 569-578 (1995).
  20. Wilson, R. S., Bright, P. L. The Use of Chironomid Pupal Exuviae for Characterizing Streams. Freshwater Biology. 3, 283-302 (1973).
  21. Raunio, J., Paavola, R., Muotka, T. Effects of Emergence Phenology, Taxa Tolerances and Taxonomic Resolution on the Use of the Chironomid Pupal Exuvial Technique in River Biomonitoring. Freshwater Biology. 52, 165-176 (2007).
  22. Ruse, L. Lake Acidification Assessed using Chironomid Pupal Exuviae. Fundamental and Applied Limnology. 178, 267-286 (2011).
  23. Rufer, M. R., Ferrington, L. C. Sampling Frequency Required for Chironomid Community Resolution in Urban Lakes with Contrasting Trophic States. Boletim do Museu Municipal do Funchal (História Natural) Supplement. 13, 77-84 (2008).
  24. CEN. 15196, European Committee for Standardization. Brussels. 1-13 (2006).
  25. Ferrington, L. C. Collection and Identification of Surface Floating Pupal Exuviae of Chironomidae for Use in Studies of Surface Water Quality. Standard Operating Procedure No. FW 130A. , (1987).
  26. Saither, O. A. Glossary of Chironomid Morphology Terminology (Chironomidae Diptera). Entomologica Scandinavica Supplement. 14, 51(1980).
  27. Pinder, L. C. V., Reiss, F. Chironomidae of the Holarctic region. Keys and Diagnoses Part 2. Pupa. Wiederholm, T. 28, Entomologica Scandinavica Supplement. 299-456 (1986).
  28. Wiederholm, T. Chironomidae of the Holarctic region - Keys and Diagnoses, Part 2, Pupae. 28, Entomologica Scandinavica Supplement. (1989).
  29. Merritt, R. W., Webb, D. W. An Introduction to the Aquatic Insects of North America. , 4th edition, Kendall/Hunt Publishing Company. (2008).
  30. Wilson, R. S., Ruse, L. P., Sutcliffe, D. W. A Guide to the Identification of Genera of Chironomid Pupal Exuviae Occurring in Britain and Ireland (including Common Genera from Northern Europe) and Their Use in Monitoring Lotic and Lentic Fresh Waters. , Freshwater Biological Association. (2005).
  31. Egan, A. T. Communities in Freshwater Coastal Rock Pools of Lake Superior, with a Focus on Chironomidae (Diptera). , University of Minnesota. (2014).
  32. Raunio, J., Heino, J., Paasivirta, L. Non-Biting Midges in Biodiversity Conservation and Environmental Assessment: Findings from Boreal Freshwater Ecosystems. Ecological Indicators. 11, 1057-1064 (2011).
  33. Kavanaugh, R. G., Egan, A. T., Ferrington, L. C. Factors affecting decomposition rates of chironomid (Diptera) pupal exuviae. Chironomus: Newsletter on Chironomidae Research. 27, 16-24 (2014).
  34. Anderson, A. M., Stur, E., Ekrem, T. Molecular and Morphological Methods Reveal Cryptic Diversity and Three New Species of Nearctic Micropsectra (Diptera: Chironomidae). Freshwater Science. 32, 892-921 (2013).
  35. Ekrem, T., Willassen, E. Exploring Tanytarsini Relationships (Diptera: Chironomidae) using Mitochondrial COII Gene Sequences. Insect Systematics & Evolution. 35, 263-276 (2004).
  36. Ekrem, T., Willassen, E., Stur, E. A Comprehensive DNA Sequence Library is Essential for Identification with DNA Barcodes. Molecular Phylogenetics and Evolution. 43, 530-542 (2007).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Chironomidae