Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Аппаратура ближней перспективе плода овец многомерных хронических неинфекционных наркозом Recordings

8.5K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/52581

⸱

25 октября 2015 г.

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Département de sciences cliniques, CHUV, Université de Montréal, St-Hyacinthe, QC, 2Département d'obstetriques et de gynécologie, CHU Ste-Justine Research Centre, Université de Montréal, 3Département de neurosciences, CHU Ste-Justine Centre de recherche, Université de Montréal, 4Centre de recherche en reproduction animale (CRRA), Université de Montréal, St-Hyacinthe, QC

В этой статье

Краткое содержание

Хронически приборами без анестезии плода модель овец используется для изучения развития плода человека в норме и патологии, потому что это позволяет хирургического размещение и обслуживание катетеров и электродов, отбор проб повторяющихся крови, инъекции вещества, записи биоэлектрической активности, и в естественных изображений. Опишем процедуры, необходимые для установления этой модели.

Аннотация

Хронически обработанная беременная овца использовалась в качестве модели развития человеческого плода и реакции на патофизиологические стимулы, такие как эндотоксины, бактерии, окклюзии пуповины, гипоксия и различные фармакологические методы лечения. В данной модели разработаны жизненно важные клинические методы лечения глюкокортикоидами плодов с риском преждевременных родов и терапевтической гипотермии. Это связано с уникальной податливостью плода овцы без анестезии к хирургической установке и обслуживанию катетеров и электродов, что позволяет повторять забор крови, вводить вещества, регистрировать биоэлектрическую активность, применять электрическую стимуляцию и визуализировать органы in vivo. Здесь мы описываем процедуру хирургического инструментария, необходимую для достижения стабильной модели плода овцы без анестезии с помощью хронических инструментов, включая характеристику послеоперационного восстановления от газов крови, метаболических и воспалительных аспектов.

Введение

Разнообразие моделей животных существует для изучения нормальных и скомпрометированных беременности, в том числе лабораторных грызунов, приматов и домашних жвачных. 1,2,3,4,5 Хронически приборами беременной овцы широко используется в течение 50 лет, как модель развития плода и ответов человека на патофизиологических стимулы, такие как липополисахарида (ЛПС). 6-10 Поражения следующие экспозиции LPS имитировать именно то, что видел у недоношенных новорожденных с перивентрикулярного лейкомаляции, что из-за подобной созревания профиль обоих видов. 11, 12

Другие осложнения беременности были также изучены в мельчайших подробностях, таких как открытие, что дородовой глюкокортикоиды содействия развитию легких 13-15 и понимания воздействия внутриутробной задержки роста (ЗВУР) плода на 16,17.

Широкое использование модели плода овец связано с UniqUE аменабельность не-наркозом плода овец в хирургической размещения и обслуживания катетеров и электродов, что позволяет проб повторяющиеся крови, записи биоэлектрической активности, применение электрической стимуляции и в естественных изображений мозга. 18 телеметрии тоже можно, хотя и менее часто используются но из-за более высокой сложности в настроить, а также начальной и поддерживающей стоимости. 19

Кроме того, модель плода овцы очень универсальны, как много вариаций приборов возможны в зависимости от мер, представляющих интерес. Например, можно выполнить запись нескольких дней до недель многомерных сигналов в режиме реального времени, такие как плода дыхательных движений, электрической активности головного мозга, сердечно-сосудистых реакций, ЭКГ, регионарного кровотока к ряду органов с использованием зондов потока или микросфер и т.д. Благодаря это универсальность, широкий диапазон исследований были проведены в том числе развития Кардиovascular система 20,21, гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой (HPA) оси 22, развитие мозга развитие 23 и сна государства, в частности, 24, эффекты гипоксии / асфиксия 25, терапевтической гипотермии 26, воспаление 6-11, комбинация обоих 27, глюкокортикоиды 28,29, антидепрессанты 30, бронхо-легочной дисплазии (БЛД) 31,32 плода программирование 33,34,35,36,37,38,39 или разработка новых методов мониторинга плода до и во время родов, чтобы имя, но несколько областей исследования. 40,41,42,43

Общая цель метода, изложенного, чтобы показать базовую реализацию этой разносторонней модели. Это позволяет устанавливать широкий спектр острых и хронических экспериментальных протоколов, обучающихся плода физиологии и патофизиологии на интегративной, орган, клеточном и молекулярном уровнях.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Уход за животными следуют рекомендациям Канадского совета по уходу за животными и утверждения Университета Монреаля совета по уходу за животными (протокол # 10-Речь-1560). Подробная информация о материалах и методах, используемых предоставляется в таблице 1.

1. Анестезия

  1. Вставьте один-катетер в яремную вену.
  2. Седативный овца с помощью ацепромазин (Atravet 10 мг / мл) 2 мг внутривенно примерно 30 мин до индукции анестезии в целях снижения стресса, связанного с процедурой, которая, в свою очередь снижает уровень кортизола.
  3. Администрирование диазепам (Диазепам 5 мг / мл) 20 мг кетамина (100 Ketalar мг / мл) 4-5 мг / кг и пропофол (Пропофол 10 мг / мл) от 0,5 до 1 мг / кг внутривенно, чтобы вызвать общую анестезию.
  4. Вставьте обмена дыхательных путей катетер в трахею, используя ларингоскоп с лезвием типа Висконсин (Экстра-длинные 350 мм левша Blade), чтобы помочь с интубации, Слайд кремния эндотрахеальную трубку (от 9 до 12 мм Внутренний диаметр) от обмена дыхательных путей катетер и в трахею. Эта техника облегчает процесс интубации. Манжету эндотрахеальной трубки осторожно, чтобы избежать давления, вызванного изъязвление трахеи и зафиксировать трубу в голове овцы.
  5. Подключите эндотрахеальную трубку в дыхательные цепи наркозно-дыхательного аппарата и немедленно начать искусственную вентиляцию легких. Настройка параметров ИВЛ для поддержания P СО 2 в пределах нормы от 35 до 45 мм рт.
  6. Вставьте катетер в артерию (ушной 22 до 20 г; 1 в [0,9 х 25 мм] до 1,16 в [1.1 х 30 мм]) и подключиться к несоответствующим трубки для мониторинга прямой артериальное давление.
  7. Используйте многопараметрическое физиологическую монитор с для записи ЭКГ, прямое артериальное давление, насыщение кислородом (SPO 2), капнографический (Р ЕТ СО 2), и температура каждые 5 минут. Перевести все рНysiologic данных через последовательный кабель к центральной физиологического данных для сбора компьютера. Поддержание нормальной температуры тела с помощью циркулирующего одеяло воды.
  8. Администрирование сбалансированный поли-ионная решение на 10 мл / кг в первый час общей анестезии, а затем уменьшить до 5 мл / кг / ч.
  9. Администрирование триметоприм-сульфадоксин 5 мг / кг IV в овцы только до разреза кожи в качестве антибиотикопрофилактики.
  10. Используйте стандартные асептических всех хирургических манипуляций овцы и плода.
  11. Барьер медсестра овцы на все времена. Это включает в себя также нехирургических персонала. Это позволит свести к минимуму энзоотической потенциал для, например, Coxiella burnetii. Используйте перчатки и маски (N-95) типа на все времена.

2. Обзор хирургической процедуры

  1. Сделайте 20 см срединный разрез через нижнюю брюшную стенку черепа сразу к вымени через белой линии живота, чтобы минимизировать повреждение мышц.
    1. рetract большого сальника краниально и рога матки пальпируются вручную. Пропальпируйте каждый рог из тела матки на кончике рога заметив количество плода и их размера. Если имеется более одного плода, выбрать больший плод путем оценки ручной размер головки и ширину между орбитами.
    2. Держите голову выбранного плода твердо через матку частично выводили. Выполните 10 см гистеротомии на большой кривизны с Metzenbaum ножницами. Поместите сразу над головой не-латекса стерильные хирургические перчатки, заполненный стерильным физиологическим раствором, как если бы он был рукой. В качестве альтернативы, используйте смоченной 4х4 держать голову плода влажной. Безопасный матку брюшной стенки.
      1. Экстериоризироваться справа и слева грудной конечности и тянуть плод мягко из матки вплоть до xyphoid процесса.
    3. Вставьте поливинилового катетеры в правую и левую плечевую вену и артерии, используя стандартную технику урезанную. Вставьте Анофэр поливиниловый катетера в полости амниона по фиксации его 'конец грудины плода.
      1. Используйте только стерильные катетеры. Мы рекомендуем газа стерилизации в Вашем объекте. Прикрепите каждый катетер для иглы и иглы с двойным краном, чтобы позволить для отбора проб крови позднее или контроля давления.
    4. Шовный электроды из нержавеющей стали с головкой, мечевидного отростка и к каждой точке плеча мониторинга электрокардиограммы (ЭКГ).
    5. Вернуться плод в матке. Все катетеры и электроды выход через небольшой разрез колотой в левый бок.
    6. Закройте лапаротомии разрез с помощью замыкание трехслойной. Шовный брюшной стенки с синтетическим рассасывающиеся мононити шов USP 2 в простой непрерывном режиме. Закрыть подкожного пространства с синтетическим рассасывающиеся плетеные нити USP 0 в простом непрерывном режиме. Используйте хирургические скобы из нержавеющей стали, чтобы закрыть разрез кожи.
    2. Подробное описание хирургической процедуры
    1. Удалить шерсть после бритья xyphoid процесс в молочной железе и вдоль складки фланга на каждой стороне лопастной # 40. Чистый вентральной живот затем тщательно с 4% глюконата хлоргексидина и мягкой щеткой в ​​течение 3 минут.
      1. Выполните стандартную стерильную скраб с хлоргексидинглюконат 4%, начиная от центра живота и прогрессирует в центробежной моды в течение 3 мин. Налейте стерильного физиологического раствора на животе, чтобы удалить дезинфицирующее мыло. Для конечной стадии хирургического подготовки, выполняют три альтернативных проходы глюконата хлоргексидина раствор 2% и изопропиловый спирт 70%.
    2. Убедитесь, что глубина анестезии достаточна до разреза. Сделайте стандартный лапаротомии разрез от пупка до всего краниально к вымени через белой линии живота, чтобы минимизировать повреждение мышц.
    3. Вставьте длинные губки щипцов в животе вдоль левой стены до брюшнойк плановой выездной площадки для катетеров в paracostal регионе.
      1. Нажимайте кончики пинцета к стене, пока помощник может найти его и подтвердить соответствующий сайт. Откройте слегка (1 см) челюсти щипцами и пусть помощник сделать 2 см толщины полный ножевое разрез.
      2. Экстериоризироваться кончики пинцета через разрез, откройте снова, и мягко схватить катетеры с пинцетом, что, наконец, вытащил из живота через разрез брюшной стенки брюшной. Следует отметить, что некоторые группы имплантировать катетеры, а затем экстериоризоваться их. Это имеет тот недостаток, что интраоперационной мониторинг плода ЭКГ не возможно.
    4. Пропальпируйте матку, чтобы определить положение плода и цифры. Определить наибольшее плод с помощью между слуховой расстояние. Надрезать стенки матки на большой кривизны за спины головы, избегая семядоли.
      1. Вставьте тупым концом канюли через плацентарный мембран для получения утраБесплатный образец от кровотечения niotic жидкости. Надрезать плацентарной мембраны с помощью ножниц.
    5. Экстериоризироваться черепной половину плода через этот разрез. Поместите стерильную, не латекса хирургические перчатки, заполненный стерильным физиологическим раствором при 37 ° С в течение плода головы, чтобы помочь сохранить нормотермию.
      1. Во время удаления плода верхней части тела из матки, имеют провести заместитель вверх Бэбкок, чтобы предотвратить потерю амниотической жидкости. Тогда, вновь используя Бэбкок щипцов, зажим фетальные мембраны и стенки матки к коже, чтобы предотвратить загрязнение брюшной с амниотической жидкости.
      2. Защиту только те части тела плода, которые должны быть приборами и держать остальных частей внутри матки или покрыта влажным и теплым (37 ° С) стерильные ткани, соответственно.
    6. Исчезновение оба грудных конечностей, чтобы облегчить воздействие на плечевой артерии и вены на двусторонней основе. Надрезать вдоль медиальной как предплечья и уходаполностью рассекать по плечевой артерии и вены.
    7. Вставка поливиниловые катетеры в правую и левую плечевого артерии и левой плечевой вены с использованием стандартной методики усеченную.
      1. Освободите судно будет катетер из соседних тканей более 1 см. Лигировать дистальной части судна с оплеткой Синтетический рассасывающийся USP 2-0 шва. Preplace лигатуры на проксимальных аспект судна, но держать его развязать.
        1. Использование Castroviejo ножницы, разрезать поперек судна примерно 30% его диаметра. Остановить поток крови частично, потянув проксимального шва. Вставка катетера в проксимальном направлении.
      2. Вставьте поливинилового катетера до 8 см проксимально или до сопротивления срабатывания и слегка потяните. Временно обеспечить проксимальную сторону катетера с помощью сосудистого зажима. Поместите другой шов вокруг обоих проксимальных и дистальных аспекте катетера. Помощник постоянно жерехirating и промывки катетера, чтобы обеспечить проходимость катетера.
      3. Закройте кожу плода, используя USP 2-0 плетеный синтетический рассасывающийся шовный материал, с непрерывным рисунком шва.
    8. Для правой и левой плечо, рукоятки и xyphoid процесса, фиксировать изолированный электрод из нержавеющей стали для облегчения мониторинга плода ЭКГ.
    9. Шовный амниотической давление и отбора проб катетер к грудине. Это катетер Фенестрированные на ее конечности.
    10. Закрепите все катетеры на спинке плода с использованием USP 2-0 плетеный синтетический рассасывающийся шовный материал.
    11. Перед заменой плода обратно в матку, администрирование 30 мкг кленбутерол IV медленно в течение 15 мин, чтобы избежать гипотензии и обеспечить матки релаксации.
    12. Шовный фетальные мембраны, используя USP 4-0 плетеный синтетический рассасывающийся шовный материал с непрерывным рисунком. Включение только один катетер или электрод одновременно в КлосаЮр, чтобы обеспечить плотное закрытие с. Используйте двойной слой картины Кушинга, уважая принципы Halsted, чтобы закрыть мышечный слой матки с использованием USP 0 плетеный синтетический рассасывающийся шовный материал. Тщательно Бери хирургические узлы.
    13. Использование кошелек-строку шва образец, обеспечить все катетеры и ЭКГ кабели, поскольку они выходят левую paracostal разрез.
    14. Использование леска синтетического материала рассасывающийся шовный USP 2 обеспечить белой линии с непрерывным рисунком. Закрыть подкожные ткани, используя USP 2-0 плетеные синтетических рассасывающийся шовный материал с непрерывным рисунком. Закрепите слой кожи с хирургического скоб.
    15. Администрирование 250 мг ампициллина внутривенно и снова с помощью амниотической катетер в амниотической полости. Заменить утраченные околоплодных вод с теплой физиологического раствора.
    16. Поместите все экстериоризированного катетеров и электродов ЭКГ в место мешок для поддержания стерильности. Поставьте Stockinette вокруг туловища овцы, чтобы обеспечить все катетеры апD электроды к телу овцы.
    17. Стоп общий наркоз, и экстубации овца раз гортани рефлексы вернулись к нормальной жизни.
    18. Вернуть ягненка в метаболическую клетку, как только она стабильна после общей анестезии. Овца будет находиться в метаболическую клетку в течение всего срока эксперимента. Овца должна быть в состоянии стоять, лежать и есть вволю, а мониторинг не-наркозом плод без седативного мать.
    19. Для следующих трех дней, администрирование антибиотики профилактически с овцы (триметоприм сульфадоксина 5 мг / кг) и плода (250 мг ампициллина внутривенно из и снова через амниотической катетера).
    20. Оценка метаболического статуса и овцы, и плод при использовании крови Анализаторы газов.
    21. Промойте все катетеры с минимальным объемом возможного гепаринизированным физиологического раствора. Внимание - не превышать суточную дозу гепарина и жидкостей допустимой для плода. Можно жидкости перегрузки плода. Флеш один раз медленнодень ~ 5 мл NaCl в строке после антибиотикопрофилактики.
  2. Учет и анализ данных
    1. Во время операции, возможно записать матери и плода ЭКГ и ЧСС, а также материнской артериальное давление и давление в дыхательных путях (Paw) непрерывно (рисунок 1). Используйте Life окне монитора, чтобы приобрести все данные, за исключением материнской ЭКГ. Поток этих данных в аналого-цифрового преобразователя вместе с плода и матери ЭКГ сигналов; пройти матери и плода ЭКГ сначала в 1901 предварительного усилителя. Запись и отображение всех данных в программном обеспечении производителя.
    2. Возьмите 1 мл артериальной образец одновременно с овцы и плода для анализа газов артериальной крови, лактата, глюкозы и избыток оснований определение (в плазме) на начало плода хирургии (сразу после установки первого артериальный катетер) и после закрытия матку ,
    3. Во время послеоперационного восстановления, взять образец крови плода 3 мл для измерения IL-6 и ФНО- InflammAtory профили. Центрифуга плазма при 4 ° С (4 мин, 4000 мкг), декантируют и хранить плазму при -80 ° С для последующего тестирования ELISA.
      Примечание: В целях сообщенных репрезентативные результаты, через шесть дней после операции животных умерщвляли с помощью внутривенной инъекции 20 мл пентобарбитала натрия. Роста плода оценивали тела, мозга, печени и материнской весов. Продолжительность экспериментального периода, очевидно, варьируют в зависимости от выбранного дизайна для конкретного вопроса исследования и может достигать ~ 6 недель.
  3. Цитокинов анализы (необязательный шаг)
    1. Определение концентрации цитокинов (IL-6, TNF-a) в плазме с использованием сэндвич баранины конкретных ELISA. Предварительное покрытие мышиное анти-овцы моноклональные антитела (захват антитела IL-6) или мышиное анти-бычий моноклональное антитело (ФНО-α) в концентрации 4 мкг / мл на ELISA пластины при 4 ° С для O / N, после 3 раза промыть промывочным буфером (0,05% Твин 20 в PBS, PBST).
    2. Блок пластин в течение 1 ч с 1% BSA в PBST. Вымойте тарелки с буфером для промывки 3 раза.
    3. Используйте рекомбинантных белков овец (ИЛ-6, ФНО-альфа) в качестве стандарта ELISA, подготовить серийные разведения в диапазоне от стандартных 1 из 2000 нг / мл до стандартного 7 из 31,25 пг / мл.
    4. Нагрузка 50 мкл серийных разбавленных белковых стандартов и образцов на лунку и инкубировали в течение 2 ч при комнатной температуре, мыть планшетов 3 раза. Выполнить все стандарты и образцы в двух экземплярах.
    5. Применение 50 мкл кроличьего анти-овец поликлональных антител (антитела обнаружения IL-6) или кролика против коровьей поликлональные антитела (ФНО-) в разведении 1: 250 в лунки и инкубируют в течение 30 мин при комнатной температуре. Вымойте тарелки с буфером для промывки 5 раз.
    6. Добавьте 50 мкл козьих антител против кроличьего IgG с пероксидазой хрена, конъюгированной-(разбавление 1: 5000) в течение 30 мин.
    7. Инкубируют 50 мкл ТМВ раствора субстрата на лунку.
    8. Остановка реакции развития окраски в нужное время с 25 мкл 2 N серной кислоты.
    9. Читайте плАтеш на ридере ELISA при 450 нм, с коррекцией длины волны 570 нм.
      Примечание: В наших тестах, чувствительность IL-6 ELISA составляла 16 пг / мл, чувствительность ФНО- ELISA 13,9 пг / мл, соответственно. Для всех анализов, внутрирегиональные анализа и между анализами коэффициенты дисперсии было <5% и <10%, соответственно.
  4. Статистический анализ
    Примечание: Точные статистические методы будут зависеть от исследования вопроса. Здесь мы приводим методы, используемые для проверки каких-либо существенных различий в газах крови, представленных в таблице 2.
    1. Проверьте нормальное распределение данных, используя тест Колмогорова-Смирнова с последующим параметрических или непараметрических тестов с регулировкой для множественных сравнений, в соответствующих случаях.
    2. Использование К-означает кластерного анализа для выявления плодов в когорте, которые были спонтанно гипоксическая и определить соответствующие рО 2 и О 2 значения СБ (рассмотреть PO 2 <20 мм рт или О 2 ТВ <55%, как фетал гипоксия). 44-48
    3. Используйте статистического программного обеспечения, таких как SPSS для анализа.
    4. Представление данных в виде средних ± SD со статистическими различиями при р <0,05 считается значительным.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

38 беременных временем от овец, были оборудованы в 128 ± 2 дней беременности (DGA, ~ 0,88 беременности, срок 145 DGA) с артериальной, венозной и амниотической катетеров и ЭКГ (ЭКГ) электродов с стерильных условиях общей анестезии (как овцы и плода ). В случае двойной беременности чем больше плода была выбрана на основе пальпации и оценки межвременное диаметр; В качестве альтернативы, плод, чтобы быть инструментальной может быть выбраны случайным образом, чтобы избежать возможной уклон или обоих плодов могут быть прибора...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Анестезии и хирургических процедур представлены, которые необходимы для создания животной модели для изучения плода физиологии и патофизиологии: хронически инструментальной без наркозом плода овец.

Следует подчеркнуть, четыре критические шаги в протоколе. Во-первых, прохождение катетеров и электродов по материнской фланг: важно, что это делается сразу, чтобы избежать каких-либо повреждений внутренних органов органов. Во-вторых, обеспечение гистеротомия операционной сайт до экстериоризации пл...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Никаких разглашений информации не было сделано.

Благодарности

авторы с благодарностью признают финансовую поддержку от Фонда перинатальных исследований Молли Тоуэлл, Канадских институтов исследований в области здравоохранения (CIHR) и Fonds de Recherche du Québec – Santé (FRQS) (для MGF) и CIHR-Quebec Training Network in Perinatal Research (QTNPR) (для LDD).

Авторы благодарят Эстер Симард, Марко Боза, Карла Бернарда и Кармен Мовилу за техническую помощь.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
ACE Источник светаSchott-FostecA20500
Препарирующие ножницыFine Science Tools14060 - 11
Наклонные ножницы для препарированияFine Science Tools15006 - 09
Рукоятка скальпеляFine Science Tools10003 - 12чередующихся инструментов для препарирования
Изогнутые лезвия скальпеля #12Fine Science Tools10012 - 00чередующийся инструмент для препарирования
Костяные ножницыFine Science Tools16044 - 10
S & Щипцы для завязывания T швов FineScience Tools00272 - 13
щипцов Dumont SS - угловыеFine Science Tools11203 - 25 
Плетеный шелковый шовный материал размер 6-0Teleflex Medical07 - 30  - 10
Medical Tapetranspore3M
Кетамина гидрохлорид 100 мг/млHospiraNDC 0409 - 2051 - 05Final Does - 80 мг/кг
Tranqui Ved Injection (ксилазин 100 мг/мл)VecdoNDC 50989 - 234 - 11Final Does is 10 мг/кг
Реактивный оранжевый 14Sigma - AldrichR - 8254
Ringers Solution ComponentsSolution уравновешен по газу с 95% O2 и 5% Co2, конечный pH 7,4
Sodium chlorideSigma - AldrichS7653Конечная концентрация: 118 mM
Хлорид калияFisher ScientificP217 - 3Конечная концентрация: 4,7 мМ
Кальция хлорид дигидратFisher ScientificC79 - 500Конечная концентрация: 2,5 мМ
Одноосновной фосфат калияFisher ScientificP -285Конечная концентрация: 1,2 мМ
Сульфат магнияJ.T. BakerJan-00Конечная концентрация: 0,57 мМ
4-(2-гидроксиэтил)пиперазин-1-этансульфоновая кислота (HEPES)Fisher ScientificBP 310 - 500Конечная концентрация: 5,95 г/л
глюкозыSigma - ОлдричG8270Конечная концентрация: 5,5 мМ
LifeWindowDigicare Biomedical Technology
Биоамплификатор CED и АЦП блокиCambridge Electronic Design Limited,
Unit 4, Science Park,
Milton Road,
Cambridge CB4 0FE
АНГЛИЯ.		Биоамп: 1902; АЦП: micro1401; Программное обеспечение для сбора данных: Spike 2, V7.13
Neurolog аналоговый биоусилитель сигналаDigitimer Ltd
37 Hydeway
Welwyn Garden City
Hertfordshire, AL7 3BE, England		NL108A
ABL800FlexRadiometer Canada; 200 Aberdeen Dr, London, ON N5V 4N2
Eppendorf 5804REppendorf Canada; 2810 Argentia Road, #2
Mississauga, Ontario, L5N 8L2
Arrow Jugular Catheterization SetArrow International, Inc., 2400 Bernville Road, Reading, PA 19605 США
Atravet10 мг/мл
Диазепам5 мг/мл
КетаминКеталар100 мг/мл
Пропофол10 мг/мл
SurgiVeTэндотрахеальные трубки; Smiths Medical ASD, Inc. Сент-Пол, Миннесота 55112, США
Катетер для обмена дыхательных путей Кука с адаптерами RAPI-FITCook Critical Care 750, Блумингтон IN 47402-0489 США
Dispomed Ventilator Dispomed Ltd., 745 Nazaire-Laurin, Joliette, Quebec J6E 0L6
BD Insyte-WBecton Dickinson, Infusion Therapy Systems Inc., 9450 S State St, Sandy Utah 84070 СШАот 22 до 20 г; От 1 дюйма [0,9 x 25 мм] до 1,16 дюйма [1,1 x 30 мм]
Edwards Lifesciences Ref: PX272 Комплект для контроля давления с одноразовым модулем давления
LifeWindow LW6000Digicare Biomedical Technology 107 Commerce Road, Boynton Beach, FL 33426-9365 США
Поливиниловые
Babcock
SCI (Scientific Commodities Inc.)2 метра
2-0 Vicryl
Castroviejo ножницы
электрокардиограмма (ЭКГ)LIFYY, Metrofunk Kabel-Union, Берлин, Германиячетыре медных электрода в одной оболочке, 2 метра
2-O Vicryl
3-0 Vicryl
PDS II USP
Триметоприм сульфадоксин
Ампициллин
СтопкранАргон Медикал, Кат  041220001AДвойной 4-ходовой запорный кран с наружным люэровским замком
ИглыTyco Healthcare 8881202389Monoject алюминиевая ступица тупые иглы, 22Gx, 0,7 мм x 38,1 мм: для фетальных артериальных и венозных катетеров
ИглыTyco Healthcare 8881202322Monoject алюминиевая ступица тупые иглы, 16Gx, 1,6 мм x 38,1 мм: для амниотических катетеров
TruWave катетеры Gaymar

Ссылки

  1. Barry, J. S., Anthony, R. V. The pregnant sheep as a model for human pregnancy. Theriogenology. 69, 55-67 (2008).
  2. Morrison, J. L. Sheep models of intrauterine growth restriction: fetal adaptations and consequences. Clin Exp Pharmacol Physiol. 35, 730-743 (2008).
  3. Rees, S., Inder, T. Fetal and neonatal origins of altered brain development. Early Hum Dev. 81, 753-761 (2005).
  4. Rees, S., Harding, R., Walker, D. The biological basis of injury and neuroprotection in the fetal and neonatal brain. Int J Dev Neurosci. 29, 551-563 (2011).
  5. Moisiadis, V. G., Matthews, S. G. Glucocorticoids and fetal programming part 1: Outcomes. Nat rev Endocrinol. 10, 391-402 (2014).
  6. Wang, X., Rousset, C. I., Hagberg, H., Mallard, C. Lipopolysaccharide-induced inflammation and perinatal brain injury. Semin Fetal Neonatal Med. 11, 343-353 (2006).
  7. Gotsch, F., et al. The fetal inflammatory response syndrome. Clin Exp Obstet Gynecol. 50, 652-683 (2007).
  8. Svedin, P., Kjellmer, I., Welin, A. K., Blad, S., Mallard, C. Maturational effects of lipopolysaccharide on white-matter injury in fetal sheep. J child neurol. 20, 960-964 (2005).
  9. Nitsos, I., et al. Chronic exposure to intra-amniotic lipopolysaccharide affects the ovine fetal brain. J Soc Gynecol Investig. 13, 239-247 (2006).
  10. Yan, E., Castillo-Melendez, M., Nicholls, T., Hirst, J., Walker, D. Cerebrovascular responses in the fetal sheep brain to low-dose endotoxin. Pedia res. 55, 855-863 (2004).
  11. Dean, J. M., et al. Delayed cortical impairment following lipopolysaccharide exposure in preterm fetal sheep. Ann Neurol. 70, 846-856 (2011).
  12. Dobbing, J., Sands, J. Comparative aspects of the brain growth spurt. Early Hum Dev. 3 (1), 79-83 (1979).
  13. Liggins, G. C. Premature parturition after infusion of corticotrophin or cortisol into foetal lambs. J Endocrinol. 42, 323-329 (1968).
  14. Liggins, G. C. Premature delivery of foetal lambs infused with glucocorticoids. J Endocrinol. 45, 515-523 (1969).
  15. Liggins, G. C., Fairclough, R. J., Grieves, S. A., Kendall, J. Z., Knox, B. S. The mechanism of initiation of parturition in the ewe. Recent Prog Horm Res. 29, 111-159 (1973).
  16. Morrison, J. L. Sheep models of intrauterine growth restriction: fetal adaptations and consequences. Clin Exp Pharmacol Physiol. 35, 730-743 (2008).
  17. Robinson, J. S., Hart, I. C., Kingston, E. J., Jones, C. T., Thorburn, G. D. Studies on the growth of the fetal sheep. The effects of reduction of placental size on hormone concentration in fetal plasma. J Dev Physiol. 2, 239-248 (1980).
  18. Carmel, E., et al. Fetal brain MRI - experiences in the ovine model of cerebral inflammatory response. Repro sci. 19 (3), 347A-348A (2012).
  19. Samson, N., Dumont, S., Specq, M. L., Praud, J. P. Radio telemetry devices to monitor breathing in non-sedated animals. Respir Physiol Neurobiol. 179, 111-118 (2011).
  20. Thakor, A. S., Giussani, D. A. Effects of acute acidemia on the fetal cardiovascular defense to acute hypoxemia. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 296, R90-R99 (2009).
  21. Green, L. R., Kawagoe, Y., Homan, J., White, S. E., Richardson, B. S. Adaptation of cardiovascular responses to repetitive umbilical cord occlusion in the late gestation ovine fetus. J Physiol. 535, 879-888 (2001).
  22. Unno, N., et al. Changes in adrenocorticotropin and cortisol responsiveness after repeated partial umbilical cord occlusions in the late gestation ovine fetus. Endocrinology. 138, 259-263 (1997).
  23. Muller, T., et al. Developmental changes in cerebral autoregulatory capacity in the fetal sheep parietal cortex. J Physiol. 539, 957-967 (2002).
  24. Keen, A. E., Frasch, M. G., Sheehan, M. A., Matushewski, B., Richardson, B. S. Maturational changes and effects of chronic hypoxemia on electrocortical activity in the ovine fetus. Brain Res. 1402, 38-45 (2011).
  25. Ross, M. G., et al. Correlation of arterial fetal base deficit and lactate changes with severity of variable heart rate decelerations in the near-term ovine fetus. Am J Obstet Gynecol. 208, e281-e286 (2013).
  26. Gunn, A. J., Gunn, T. R., de Haan, H. H., Williams, C. E., Gluckman, P. D. Dramatic neuronal rescue with prolonged selective head cooling after ischemia in fetal lambs. J Clin Invest. 99, 248-256 (1997).
  27. Xu, A., Piorkowska, K., Matushewski, B., Hammond, R., Richardson, B. S. Adaptive Brain Shut-Down Counteracts Neuroinflammation in the Near-Term Ovine Fetus. 60th Meeting of the Society for Gynecologic Investigation, 20 (3), Reproductive Sci. 222A(2013).
  28. Derks, J. B., et al. A comparative study of cardiovascular, endocrine and behavioural effects of betamethasone and dexamethasone administration to fetal sheep. J Physiol Lond. 499, 217-226 (1997).
  29. Lohle, M., et al. Betamethasone effects on fetal sheep cerebral blood flow are not dependent on maturation of cerebrovascular system and pituitary-adrenal axis. J Physiol. 564, 575-588 (2005).
  30. Morrison, J. L., et al. Maternal fluoxetine infusion does not alter fetal endocrine and biophysical circadian rhythms in pregnant sheep. J Soc Gynecol Investig. 12, 356-364 (2005).
  31. Allison, B. J., et al. Ventilation of the very immature lung in utero induces injury and BPD-like changes in lung structure in fetal sheep. Pediatr Res. 64, 387-392 (2008).
  32. Rozance, P. J., et al. Intrauterine growth restriction decreases pulmonary alveolar and vessel growth and causes pulmonary artery endothelial cell dysfunction in vitro in fetal sheep. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 301, L860-L871 (2011).
  33. Fowden, A. L., Giussani, D. A., Forhead, A. J. Endocrine and metabolic programming during intrauterine development. Early hum dev. 81, 723-734 (2005).
  34. Nathanielsz, P. W., Hanson, M. A. The fetal dilemma: spare the brain and spoil the liver. J Physiol. 548, 333(2003).
  35. Manikkam, M., et al. Fetal programming: prenatal testosterone excess leads to fetal growth retardation and postnatal catch-up growth in sheep. Endocrinology. 145, 790-798 (2004).
  36. Savabieasfahani, M., et al. Fetal programming: testosterone exposure of the female sheep during midgestation disrupts the dynamics of its adult gonadotropin secretion during the periovulatory period. Biol Reprod. 72, 221-229 (2005).
  37. Bergen, N. H., et al. Fetal programming alters reactive oxygen species production in sheep cardiac mitochondria. Clin Sci (Lond). 116, 659-668 (2009).
  38. Cox, L. A., et al. A genome resource to address mechanisms of developmental programming: determination of the fetal sheep heart transcriptome. J Physiol. 590, 2873-2884 (2012).
  39. Mahoney, M. M., Padmanabhan, V. Developmental programming: impact of fetal exposure to endocrine-disrupting chemicals on gonadotropin-releasing hormone and estrogen receptor mRNA in sheep hypothalamus. Toxicol Appl Pharmacol. 247, 98-104 (2010).
  40. Blad, S., Welin, A. K., Kjellmer, I., Rosen, K. G., Mallard, C. ECG and Heart Rate Variability Changes in Preterm and Near-Term Fetal Lamb Following LPS Exposure. Reprod Sci. 15, 572-583 (2008).
  41. Frasch, M. G., et al. Heart rate variability analysis allows early asphyxia detection in ovine fetus. Reprod Sci. 16, 509-517 (2009).
  42. Frasch, M. G., Keen, A. E., Gagnon, R., Ross, M. G., Richardson, B. S. Monitoring fetal electrocortical activity during labour for predicting worsening acidemia: a prospective study in the ovine fetus near term. PLoS One. 6, e22100(2011).
  43. Durosier, L. D., et al. Sampling rate of heart rate variability impacts the ability to detect acidemia in ovine fetuses near-term. Front pedia. 2, 38(2014).
  44. Danielson, L., McMillen, I. C., Dyer, J. L., Morrison, J. L. Restriction of placental growth results in greater hypotensive response to alpha-adrenergic blockade in fetal sheep during late gestation. J Physiol. 563, 611-620 (2005).
  45. Edwards, L. J., Simonetta, G., Owens, J. A., Robinson, J. S., McMillen, I. C. Restriction of placental and fetal growth in sheep alters fetal blood pressure responses to angiotensin II and captopril. J Physiol. 515 (Pt 3), 897-904 (1999).
  46. Xu, A., et al. Adaptive brain shut-down counteracts neuroinflammation in the near-term ovine fetus. Front neurol. 5, 110(2014).
  47. Xu, A., et al. The Ovine Fetal and Placental Inflammatory Response to Umbilical Cord Occlusions With Worsening Acidosis. Reprod Sci. 22 (11), (2015).
  48. Wang, X., Durosier, L. D., Ross, M. G., Richardson, B. S., Frasch, M. G. Online detection of fetal acidemia during labour by testing synchronization of EEG and heart rate: a prospective study in fetal sheep. PLoS One. 9, e108119(2014).
  49. Reid, A., Malone, J. Q fever in Ireland A seroprevalence study of exposure to Coxiella burnettii among Department of Agriculture workers. Occ med. 54, 544-547 (2004).
  50. Roest, H. I., Bossers, A., van Zijderveld, F. G., Rebel, J. M. Clinical microbiology of Coxiella burnetii and relevant aspects for the diagnosis and control of the zoonotic disease Q fever. Vet quart. 33, 148-160 (2013).
  51. Neill, T. J., Sargeant, J. M., Poljak, Z. The effectiveness of Coxiella burnetii vaccines in occupationally exposed populations: a systematic review and meta-analysis. Zoonoses and public health. 61, 81-96 (2014).
  52. Roest, H. I., Bossers, A., Rebel, J. M. Q fever diagnosis and control in domestic ruminants. Dev biol. 135, 183-189 (2013).
  53. Frasch, M. G., et al. Fetal body weight and the development of the control of the cardiovascular system in fetal sheep. J physilo. 579, 893-907 (2007).
  54. Rurak, D., Bessette, N. W. Changes in fetal lamb arterial blood gas and acid-base status with advancing gestation. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 304, R908-R916 (2013).
  55. Frasch, M. G., et al. Fetal body weight and the development of the control of the cardiovascular system in fetal sheep. J physiol. 579, 893-907 (2007).
  56. Frasch, M. G., et al. Measures of acidosis with repetitive umbilical cord occlusions leading to fetal asphyxia in the near-term ovine fetus. Am J Obstet Gynecol. 200, 200.e1-207.e1 (2009).
  57. The ESHRE Capri Workshop Group. Multiple gestation pregnancy. Hum reprod. 15, 1856-1864 (2000).
  58. Frasch, M. G. Re The perinatal development of arterial pressure in sheep: effects of low birth weight due to twinning. Reproductive sciences (Thousand Oaks, Calif.). 15, 863-865 (2008).
  59. Hancock, S. N., Oliver, M. H., McLean, C., Jaquiery, A. L., Bloomfield, F. H. Size at birth and adult fat mass in twin sheep are determined in early gestation. J Physiol. 590, 1273-1285 (2012).
  60. Wassink, G., Bennet, L., Davidson, J. O., Westgate, J. A., Gunn, A. J. Pre-existing hypoxia is associated with greater EEG suppression and early onset of evolving seizure activity during brief repeated asphyxia in near-term fetal sheep. PLoS One. 8, e73895(2013).
  61. Mathai, S., et al. Acute on chronic exposure to endotoxin in preterm fetal sheep. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 304, R189-R197 (2013).
  62. Heuij, L. G., et al. Synergistic white matter protection with acute-on-chronic endotoxin and subsequent asphyxia in preterm fetal sheep. J neuroinflam. 11, 89(2014).
  63. Gagnon, R., Challis, J., Johnston, L., Fraher, L. Fetal endocrine responses to chronic placental embolization in the late-gestation ovine fetus. Am J Obstet Gynecol. 170, 929-938 (1994).
  64. Miller, S. L., Supramaniam, V. G., Jenkin, G., Walker, D. W., Wallace, E. M. Cardiovascular responses to maternal betamethasone administration in the intrauterine growth-restricted ovine fetus. Am J Obstet Gynecol. 201, 613.e1-613.e8 (2009).
  65. Regnault, T. R., et al. The relationship between transplacental O2 diffusion and placental expression of PlGF, VEGF and their receptors in a placental insufficiency model of fetal growth restriction. J Physiol. 550, 641-656 (2003).
  66. Wallace, J. M., Aitken, R. P., Cheyne, M. A. Nutrient partitioning and fetal growth in rapidly growing adolescent ewes. J reprod and fertil. 107, 183-190 (1996).
  67. Rakers, F., et al. Effects of early- and late-gestational maternal stress and synthetic glucocorticoid on development of the fetal hypothalamus-pituitary-adrenal axis in sheep. Stress. 16, 122-129 (2013).
  68. Jiang, Y., et al. The sheep genome illuminates biology of the rumen and lipid metabolism. Science. 344, 1168-1173 (2014).
  69. Begum, G., et al. Epigenetic changes in fetal hypothalamic energy regulating pathways are associated with maternal undernutrition and twinning. FASEB J. 26, 1694-1703 (2012).
  70. Byrne, K., et al. Genomic architecture of histone 3 lysine 27 trimethylation during late ovine skeletal muscle development. Anim Genet. 45, 427-438 (2014).
  71. Lie, S., et al. Impact of embryo number and maternal undernutrition around the time of conception on insulin signaling and gluconeogenic factors and microRNAs in the liver of fetal sheep. Am J physiol Endocrinol. 306, E1013-E1024 (2014).
  72. Nicholas, L. M., et al. Differential effects of maternal obesity and weight loss in the periconceptional period on the epigenetic regulation of hepatic insulin-signaling pathways in the offspring. FASEB J. 27, 3786-3796 (2013).
  73. Wang, K. C., et al. Low birth weight activates the renin-angiotensin system, but limits cardiac angiogenesis in early postnatal life. Physiol rep. 3, (2015).
  74. Zhang, S., et al. Periconceptional undernutrition in normal and overweight ewes leads to increased adrenal growth and epigenetic changes in adrenal IGF2/H19 gene in offspring. FASEB J. 24, 2772-2782 (2010).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Инструментальное оснащение плода овцыустановка сосудистых катетеровимплантация электрокардиографических кабелейзабор амниотической жидкостимониторинг состояния плода и материхирургическое ушивание маткиоценка послеоперационного восстановленияответ на физиологическое воздействиеанализ газов крови
Аппаратура ближней перспективе плода овец многомерных хронических неинфекционных наркозом Recordings
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.