Колебания фундаментальные свойства сети и модулируются болезни и наркотиков. Изучение мозга ломтик колебания позволяет характеристику выделенных сетей в контролируемых условиях. Протоколы предназначены для подготовки острых срезах мозга для вызывания ca1 γ колебания.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Генерация местных СА1 γ колебаний тетанических стимуляции
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Нейронной сети колебания важные особенности активности мозга в норме и патологии и может модулироваться в диапазоне используемых в клинике препаратов. Протокол предоставляется создать модель для изучения СА1 γ колебания (20 - 80 Гц). Эти γ колебания устойчивы, по крайней мере 30 мин и зависит от возбуждающих и тормозных синапсов деятельности в дополнение к активации кардиостимулятора токов. Tetanically стимулированные колебания имеют ряд воспроизводимых и легко поддающихся количественной оценке характеристик, включая счета спайка, длительность колебаний, задержки и частоты, что доклад по сети государства. Преимущества электрически стимулированных колебаний включают стабильность, воспроизводимость и эпизодический приобретение позволяет надежную характеристику функции сети. Эта модель СА1 γ колебаний может быть использован для изучения клеточных механизмов и систематически исследовать, как нейронная сеть деятельность изменены болезни и наркотиков.Заболевание состояние фармакологии могут быть легко включены с помощью срезах мозга от генетически модифицированных или инвазивных животных моделях для того, чтобы выбор препаратов, которые специально направлены механизмов болезни.
Введение
Мозг сети колебания происходят в пределах отдельных частотных диапазонах, которые коррелируют с поведенческими государств. У грызунов, гиппокампа θ колебания (5 - 10 Гц) наблюдается во время разведочных поведения 1,2, в то время как γ колебания (20 - 80 Гц) ассоциируются с различными когнитивными процессами, в том числе восприятия и внимания 3,4. Синхронный γ сетевую активность также вовлечен в патологии расстройств, таких как эпилепсия, шизофрения 5,6. Например, γ колебания думал соответствуют областям коркового эпилептического очага 5,7,8 и могут быть использованы в качестве маркеров pharmacosensitivity или сопротивления,....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Все эксперименты на мышах были утверждены этики животных комитета Флори институт.
1. Установка для резки Brain фрагменты
- Подготовка режущей раствора, содержащего (мм) 125 холин-Cl, 2,5 KCl, CaCl 2, 0,4, 6 MgCl 2, 1,25 NaH 2 PO 4, 26 NaHCO 3, 20 D-глюкозы, насыщенный карбогена газа (95% O 2 -5 % искусственный спинномозговой жидкости СО 2) и (ACSF) записи раствора, содержащего (мм) 125 NaCl, 2,5 KCl, CaCl 2, 2, 2 MgCl 2, 1,25 NaH 2 PO 4, 26 NaHCO 3, 10 D-глюкозы, насыщают карбогена. Поместите режущий....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Тетанических стимуляция пластовых ORIENS генерируется надежные и воспроизводимые γ колебания (35,4 ± 2,2 Гц), рис 3B. Чтобы продемонстрировать, что колебания были получены в локальной сети СА1 входы от СА3 были разорваны путем разрезания срез в области CA2 с помощью изогнутого 32 G иглу. Свойства колебаний в нарезать кусочками не отличаются от необработанных срезов (р = 0,85; нарезать кусочками 6.16 ± 1.1 шипами, N = 6; необработанных ломтиков 5,89 ± 0,8 шипы, п = 6), указывая, что колебания локально. <.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Надежный метод для генерации ca1 γ колебания в острых срезах мозга описано. Колебания, создаваемые возникают из местного цепи благоприятной лучшую возможность для контроля и понимания нейрофизиологических основ сетевых колебаний 12. АМРА-рецепторы, рецепторы ГАМК A, I ч и Т-типа Ca 2+ каналы все необходимое для γ колебаний в этой модели. В то время как локальные колебания CA1, описанные здесь, могут быть устойчиво генерируется это зависит от обеспечения того, чтобы срезах мозг.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторы не имеют ничего раскрывать.
Благодарности
При поддержке APA для RJH, грант программы NHMRC 400121 для SP, а стипендия NMHRC 1005050 для SP. CAR выражает признательность за поддержку ARC (FT0990628) и стипендиальной программы DOWD. Институт неврологии и психического здоровья Флори поддерживается инфраструктурными фондами правительства штата Виктория.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 4-(N-этил-N-фениламино)-1,2-диметил-6-(метиламино) пиримидиния хлорид (ZD7288) | Сигма-Олдрич | Z3777 | |
| Биукуллин | Сигма-Олдрич | 14340 | |
| 6-циано-7-нитрохинокса-линия-2,3-дион (CNQX) | Сигма-Олдрич | C127 | |
| Никель | Сигма-Олдрич | 266965 | |
| Карбамазепин | Сигма-Олдрич | C4024 | |
| (2R)-амино-5-фосфонпентано-ат (APV) | Tocris Bioscience | 0105 | |
| Ретигабин | ChemPacific | 150812-12-7 | |
| Холин-Cl | Sigma-Aldrich | C1879-5KG | |
| KCl | Sigma-Aldrich | P9333-500G | |
| 2PO4 | Sigma-Aldrich | S9638-250G | |
| NaHCO3 | Sigma-Aldrich | S6297-250G | |
| NaCl | Sigma-Aldrich | S7653-5KG | |
| Глюкоза | Sigma-Aldrich | G8270-1KG | |
| CaCl2 • 2H2O | Sigma-Aldrich | 223506-500G | |
| MgCl2 & бык; 6H2O | Sigma-Aldrich | M2670-500G | |
| Электродное стекло | Harvard Apparatus | GC150F-10 | |
| Электрод металлический концентрический биполярный стимулирующий | FHC | CBBPF75 | |
| цифровой изолятор | для приема приборов | модель BJN8-9V1 | |
| Модель 1800 усилитель | A-M системы | Модель 1800 усилитель | |
| Дигитайзер | National Intruments | NI USB-6211 | |
| Vibrotome | Leica | VT1200s |
Ссылки
- Buzsaki, G. Theta rhythm of navigation: link between path integration and landmark navigation, episodic and semantic memory. Hippocampus. 15 (7), 827-840 (2005).
- Vanderwolf, C. H. Hippocampal electrical activity ....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
