Методическая статья

Характеристика метаболического статуса в приматах с тест на толерантность к глюкозе Внутривенное

10.6K просмотров

DOI:

10.3791/52895

13 ноября 2016 г.

В этой статье

Краткое содержание

Целью данного протокола является представить стандартный метод для выполнения внутривенных тестов на толерантность к глюкозе (IVGTTs) для оценки гликемического контроля в приматах и ​​оценить их метаболического статуса от здоровых до дисметаболического.

Аннотация

Тест на толерантность к глюкозе для внутривенного введения (ВТТГ) играет ключевую роль в характеристике гомеостаза глюкозы. Когда вместе с сывороточных биохимических профилей, включая уровень глюкозы в крови в обоих кормили и голодном состоянии, HbA1c, уровень инсулина, клинической истории диеты, состава тела и состояния массы тела, оценку нормального и аномального гликемического контроля может быть сделано , Интерпретация ВТТГ осуществляется путем измерения изменений уровня глюкозы и инсулина в течение долгого времени по отношению к декстрозы вызов. Критические компоненты , которые необходимо учитывать , являются: пиковые уровни глюкозы и инсулина достигли по отношению к Т0 (конец глюкозы инфузии), клиренс глюкозы K происходит от наклона быстрый клиренс глюкозы в первые 20 мин ( от Т1 до Т20), время вернуться к глюкозе базовой линии, а площадь под кривой (AUC). Эти меры ВТТГ покажут характерные изменения как гомеостаз глюкозы перемещается от здорового тоа больное метаболическое состояние 5. Здесь мы опишем характеристику приматах (макак и яванских макак), которые являются наиболее актуальными животной моделью диабета II типа (T2D) в организме человека и ВТТГ и клинические профили этих животных из тощий здоровым, ожирением дисметаболического, и T2D состояние 8, 10, 11.

Введение

ВТТГ является удобным функциональный анализ , который обычно используется для определения функции β-клеток в организме человека при различных метаболических состояниях 5, 7. В экспериментах на животных моделях СД2, она хорошо известна в качестве инструмента для характеристики животных , которые показывают прогрессирование болезни обмена веществ из здоровый к дисметаболического гипергликемии 8, 9. ближайшим животная модель СД2 показана в приматах (NHPs), из которых макаки и циномолгус макаки являются яркими примерами. Эти животные естественным образом развиваются СД2 с теми же факторами риска возраста и ожирения , способствующего его падения , ка....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Все процедуры на животных были одобрены Дэвид Х. Мердок научно-исследовательский институт IACUC, расположенный на North Carolina Research Campus (НКРС), по протоколу 14-017, характеристика нечеловеческого примата модели диабета и преддиабета / резистентности к инсулину и эффективности терапии для улучшения чувствительность к инсулину и метаболические функции.

1. Отбор животных и исследование Подготовка

  1. Выбор диеты и вес стабильных животных на основе ежемесячных потребление пищи и веса тела записей.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Животные, которые экспонируются недавнее снижение аппетита не должно быть охарактеризовано, пока их потребление ....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Результаты , показанные на рисунке 1 , являются наглядными типичных глюкозы и инсулина кривых из зрелых, здоровых и диабетических яванских макак в течение 30 мин ВТТГ а. Данные из здоровых и продвинутых диабетических обезьян приведены для того, чтобы противопоставить очевидные различия между животными из обоих крайних концах диапазона метаболических характеристик. Этот протокол ВТТГ был успешно использован авторами в макак-резусов с аналогичными результатами.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

ВТТГ оценивает способность глюкозы-стимулированной секреции инсулина с помощью одной декстрозы инфузии в зависимости от веса тела 5, 12, 13. Из анализа, глюкозы в крови натощак и уровень инсулина достигается, и это позволяет оценить способности животного к освобождение инсулина и вернуть повышенный уровень глюкозы в сторону базовой линии. Это предоставляет пользователю информацию, чтобы охарактеризовать животное, как нормальный глюкозы и здорового контроля уровня инсулин, гиперинсулинемия дисметаболического ж.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы были связаны с контрактной исследовательской организацией (Crown Bioscience), действующих в области метаболических заболеваний.

Благодарности

Авторы хотели бы отметить сильную поддержку со стороны персонала по уходу за животными DHMRI CLAS, руководитель фонда г-н Даниэль Перальта и посещение ветеринара, д-р Glicerio Игнасио, DVM MRCVS.

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Allegra X-15R Центрифужнаяплазма: 4 ° C при 3 000 об/мин в течение 10 мин
Sorvall ST16R Центрифугасыворотка: 22 ° C при 3 000 об/мин в течение 10 мин
Thermo Scientific -86 ° C Морозильная камера, Forma серии 88000Модель: 88500A
Декстроза 50% (D50)Webster07-8008986внутривенное введение глюкозы
3 мл Шприц Luer Lock MidwestVeterinary Suppyсерийные заборы крови
5 мл Шприц Luer LockMidwest Veterinary Suppyгепаринизированный физиологический раствор
10 мл Шприц Luer LockMidwest Veterinary Suppyпоставка марлевых губок для внутривенного введения D50
2 x 2Ветеринарная поставка Среднего Запада366.23000.4Использованная сухая, с 70% спиртом и 2% раствором хлорогекса
4 мл пробирки для сепаратора сыворотки Midwest Veterinary Supply366.45000.4пробирка для забора крови для суперхимической панели
K2EDTA, 2 млVWR95057-239пробирки для сбора крови
Апротинин, 100 мгSigmaA1153-100MGпробирка для сбора крови протеаза
добавка 22 г x 1 дюйм катетерыMidwest Veterinary Suppy193.75250.2внутривенный катетер 
Пробка для инъекций с колпачкомMidwest Veterinary Suppy001.11500.2%50 порт для инфузии декстрозы
Porus Tape, 1/2" x 10 ярдовMidwest Veterinary Suppy001.85000.2поддерживает адгезию катетеров и гепатита. Замки
Раствор хлоргексидина 2%Midwest Veterinary Suppy193.08855.3место подготовки катетера
70% этанолVWR71001-654подготовка места катетера
жгутWebster07-8003432
3-сторонний стопорный кранMidwest Veterinary Supply366.28510.4геп. замок
37" удлинительнабор Webster07-8454200hep. lock
Exel 50-60cc LL ШприцыMidwest Veterinary Suppy001.12250.2Гепаринизированный физиологический раствор промывка
250 мл мешок 0,9% солевой растворWebster07-8365593смыв
1,000 U Гепарин, 10 млWebster07-883-4916
Кетамин (Кетасет) 100  мг/млФорт Додж(заказан AV)
Прецизионные тест-полоски для глюкозы Xtra 50/bxAbbott (American Diabetes Wholesale)9381599728K7тест базовый уровень/уровень глюкозы в крови T3
Masimo Rad 57DRE6052057Vпульсоксиметр
Pavia ректальный термометрPatterson07-8391335
Precision Xtra GlucometerAbbott9381599728K7Ручной глюкометр

Ссылки

  1. Bergman, R., Phillips, L., Cobelli, C. Physiologic evaluation of factors controlling glucose tolerance in man. J. Clin. Invest. 68, 1456-1457 (1981).
  2. Bergman, R., Prager, R., Volund, A., Olefsky, J. M. Equivalence of the insulin....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Похожие статьи