Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Изготовление функционализированного магнитной Бактериальный Nanocellulose с оксида железа наночастицами

12.7K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/52951

⸱

26 мая 2016 г.

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Bioengineering, University of Illinois at Urbana-Champaign, 2Department of Nuclear, Plasma and Radiological Engineering, University of Illinois at Urbana-Champaign, 3Micro and Nanotechnology Laboratory, University of Illinois at Urbana-Champaign, 4Program of Study and Control of Tropical Diseases (PECET), University of Antioquia, 5Sealy Center for Vaccine Development, University of Texas Medical Branch, 6WHO Collaborating Center for Vaccine Research, Evaluation and Training on Emerging Infectious Diseases, University of Texas Medical Branch, 7Beckman Institute, University of Illinois at Urbana-Champaign

В этой статье

Краткое содержание

Здесь мы представляем протокол для создания бактериальной наноцеллюлозы (BNC) магнитом для применения при реконструкции поврежденных кровеносных сосудов. BNC был синтезирован штаммом G. xylinus. С другой стороны, намагниченность BNC осуществлялась за счет осаждения in situ ионов железа Fe2+ и Fe3+ внутри сетки BNC.

Аннотация

В этом исследовании, бактериальный nanocellulose (BNC) , продуцируемые бактериями Gluconacetobacter xylinus синтезируется и пропитывают на месте с наночастицами оксида железа (IONP) (Fe 3 O 4) с получением магнитного бактериальной nanocellulose (MBNC). Синтез MBNC является точным и специально разработан многоэтапный процесс. Коротко, бактериальный nanocellulose (BNC) Плёночные образуются из сохранившегося G. Штамм xylinus согласно нашим экспериментальным требованиям размера и морфологии. Раствор железа (III) гексагидрата хлорида (FeCl 3 · 6H 2 O) и железа (II) тетрагидрата хлорида (FeCl 2 · 4H 2 O) с 2: мольном соотношении 1 получают и разводят в обедненной кислородом воды высокой степени чистоты. Пленочную BNC затем вводят в сосуд с реагентами. Эту смесь перемешивают и нагревают при 80 ° С в масляной ванне кремния и гидроксида аммония (14%), затем добавляют отбрасыванием для осажденияионов железа в сетке BNC. Этот последний шаг позволяет формировать наночастицы магнетита (Ситу Fe 3 O 4) внутри бактериальной nanocellulose сетки , чтобы придать магнитные свойства BNC налетом. Токсикологической анализ использовали для оценки биосовместимости пелликулой BNC-IONP. Полиэтиленгликоль (ПЭГ) был использован для покрытия IONPs для того, чтобы улучшить их биосовместимость. С помощью сканирующей электронной микроскопии (SEM) изображения показали, что IONP располагались преимущественно в фибриллы переплетение пространства матрицы BNC, но некоторые из них были также найдены вдоль ленты BNC. Магнитные измерения силы микроскопа, выполненные на MBNC обнаружили присутствие магнитных доменов с высокой и слабой интенсивности магнитного поля, что подтверждает магнитную природу пелликулой MBNC. Значения модуля Юнга, полученные в этой работе также находятся в разумном согласии с теми, сообщили несколько кровеносных сосудов в предыдущих исследованиях.

Введение

Bacterian nanocellulose (BNC) синтезируется Acetobacter xylinum штамма, также известный как Gluconacetobacter xylinus и откладываются в виде пленок или Плёночные на границе раздела воздух-жидкость во время стационарной культуры. Эти Плёночные BNC принимают форму контейнера , где их выращивают, а их толщина зависит от количества дней в культуре. А. xylinus использует глюкозы в среде для синтеза микрофибрилл целлюлозы с помощью процесса полимеризации и последующей кристаллизации. Полимеризация остатков глюкозы проводят при бактериальной внеклеточной мембране, где глюкан цепи выдавливают из одиночных пор, распределенных по клеточной оболочки. Кристаллизация микрофибрилл целлюлозы происходит во внеклеточном пространстве с образованием глюкана цепи листов ван - дер - ваальсовых связей с последующей укладкой листов с помощью Н-связи 1.

МагнитНаночастицы IC, интегрированные в матрицу BNC можно легко манипулировать с помощью внешнего магнитного поля для того, чтобы увеличить силу, необходимую, чтобы направить и ограничить гладкомышечных клеток (SMCS), содержащий магнитные наночастицы, на поврежденном участке артериальной стенки. Эта стратегия удерживает SMCs от других тканей, а также удерживает клетки на месте против силы, прикладываемой с помощью кровотока. Было показано , что SMCs играют важную роль в vasoelasticity кровеносного сосуда, где они образуют обильные слои , расположенные в основном в средней части оболочки 2.

Метод, используемый для синтеза MBNC включает BNC пелликула погружают и перемешивают в растворе железа (III) гексагидрата хлорида железа и хлорид (II), тетрагидрат при 80 ° C. Гидроксид аммония добавляют с образованием наночастиц оксида железа внутри меша BNC. Добавление гидроксида аммония приводит к изменению цвета раствора от оранжевого до черного. IONPs компактный вместе вдоль фибриллы BNCс с неравномерным распределением.

Этот протокол фокусируется на разработке бактериального nanocellulose-магнитные наночастицы налетом, который мы назвали магнитной бактериальная nanocellulose (MBNC), который предназначен для использования в качестве замены отсутствующих, поврежденных малого диаметра кровеносных сосудов. HS Barud и его коллеги недавно опубликовали подобную работу , чтобы произвести BNC на основе гибкого магнитного бумаги путем смешивания BNC Плёночные в стабильной водной дисперсии ПЭГ и наночастиц оксида железа суперпарамагнит- 3. Здесь мы описываем производство бактериальной целлюлозы и ее пропитку на месте с магнитными наночастицами. Пробирного цитотоксичность, основанный на обнаружении одного разрывов ДНК использовали для тестирования биосовместимости Плёночные BNC и MBNC.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

1. Получение Бактериальный Nanocellulose (BNC)

Примечание: Все операции выполняются в асептических условиях, если не указано иное.

  1. Подготовка культуральной среды.
    1. Приготовьте 500 мл жидкой культуральной среды путем объединения 25 г дрожжевого экстракта, 15 г пептона, 125,0 г маннита, и 500 мл воды высокой степени чистоты. Автоклав эту смесь при 120 ° С в течение 20 мин и хранят при температуре 4 ° С.
    2. Приготовьте 100 мл полутвердых сред путем добавления 15 г агара до 5,0 г дрожжевого экстракта, 3,0 г пептона, 25,0 г маннита и 100 мл воды высокой степени чистоты. Автоклав эту смесь при 120 ° С в течение 20 мин. После того, как автоклавируют, депозит 5 мл смеси в 90 мм х 16 мм пластиковые чашки Петри. Дайте раствору геля при 4 ° С и хранят при этой температуре до дальнейшего использования.
  2. Увлажняет G. xylinus штамм сохранился в высушенных вымораживанием ампул путем добавления 1 мл жидкой культуральной среды и пипетированием вверх ивниз, как указано в инструкции изготовителя.
  3. Инокуляции чашки Петри, содержащие полутвердую среду с мелкими капельками бактериальной суспензии с использованием затравочной петли. Убедитесь, что прививочный материал покрывает всю чашку Петри, перемещая петлю в направлении зиг заг от края к центру блюда.
  4. Инкубируйте чашки Петри при температуре 26 ° С в течение 72 ч в инкубаторе без СО 2. После того, как инкубационный период завершения, небольшие белые колонии видны. Если колонии не используют немедленно, хранить чашки Петри при 4 ° С с помощью уплотнительной крышки парапленкой и поместив посуду с ног на голову. Колонии можно хранить таким образом в течение до 6 месяцев.
  5. Передача 2 мл жидкой питательной среды культивирования, полученного на стадии (1.1.1) в каждую лунку планшета для культуры ткани 24-луночного. Возьмите две колонии с бактериальная игла из привитых чашки Петри на стадии (1.3) и поместите их в первую лунку планшета для культуры ткани. рEPEAT ту же процедуру для остальных 23 скважин.
  6. Выдержите тканевой культуры планшет при 30 ° С в течение 7 дней. Это даст в общей сложности 24 BNC Плёночные с диаметром 16 мм и толщиной диаметром приблизительно 2-3 мм , как показано на рисунке 1.
    Примечание: Не беспокоить бактериальной культуры в любой момент в течение инкубационного периода, например, путем встряхивания пластин. В течение инкубационного периода, G. xylinus выдавливает глюкопиранозных молекулы сахара с образованием полимерной кристаллическую сетку в воздушно-жидкостной интерфейс, который принимает форму и размер колбы в статических условиях культивирования. Эта полимерная матрица, известная как бактериальной nanocellulose (BNC), является заметным в конце инкубационного периода.
  7. Собирают Плёночные BNC из питательной среды и стерилизовать их в 200 мл 1% -ного раствора NaOH в течение 1 ч при 50 ° С, для того , чтобы удалить все следы G. xylinus. По желанию, размешать этот раствор при 300 оборотах в минуту с помощью магнитной мешалкии перемешивание пластины. Выбросьте раствор NaOH и добавляют 200 мл свежеприготовленного 1% -ного раствора NaOH. более Повторите тот же самый процесс один раз или до Плёночные BNC в растворе не приобретает полупрозрачный внешний вид.
  8. Промыть Плёночные BNC с водой три раза и хранить их в воде высокой чистоты при комнатной температуре. Убедитесь, что Плёночные BNC полностью погружены в воду и не дают высохнуть в любое время.
  9. Автоклав Плёночные BNC при 121 ° С в течение 20 мин.
    Примечание: в естественных условиях подкожное исследование на крысах в исполнении Märtson и соавторами показали признаки без деградации BNC после 60 недель имплантации. Действительно, BNC разлагаемые в природе микробными и грибковые ферменты, которые отсутствуют у млекопитающих. С другой стороны, биоразлагаемость BNC может быть результатом механического, химического и биологических процессов, ослабляющих сети микрофибрилл в естественных условиях 4.

2. Синтез с полимерным покрытиемНаночастицы оксида железа и его отложению в бактериальном Nanocellulose мембраны

  1. Пузырь 1000 мл воды высокой степени чистоты с газообразным азотом, чтобы удалить какой-либо растворенного кислорода в воде, и заменить его азотом.
  2. Используйте трехгорлую круглодонную колбу , чтобы приготовить раствор , в соотношении 2: 1 молярном соотношении железа (III) гексагидрата хлорида (FeCl 3 · 6H 2 O) и железа (II) тетрагидрата хлорида (FeCl 2 · 4H 2 O) , разбавленный с обедненной кислородом воды высокой степени чистоты. Например, можно использовать 5,4 г FeCl 3 · 6H 2 O и 1,98 г FeCl 2 · 4H 2 O в 10 мл обедненной кислородом воды высокой степени чистоты. Если этот препарат оказывается слишком вязким и трудно перемешивать, используют 0,54 г FeCl 3 · 6H 2 O и 0,198 г FeCl 2 · 4H 2 O в 20 мл обедненной кислородом воды высокой степени чистоты.
    Примечание: Сокращение времени экспозиции в FeCl 2 · 4H 2 O в воздухе путем взвешивания этой чemical соединение как можно быстрее. После того, как введен в трехгорлую круглодонную колбу, закройте трехгорлую круглодонную колбу с пробками перегородки, пока он не подключен к источнику газообразного азота и конденсаторной трубки.
  3. Используйте два шеек судна, чтобы обеспечить постоянный вход и выход газообразного азота путем подключения подачи газообразного азота к иглопробивное в перегородке пробкой и прикрепленной к шее сосуда.
  4. Поместите 1 BNC пленку, которая была подготовлена ​​ранее на стадии 1.5 (15,6 мм в диаметре и 2-3 мм толщины) в сосуде с реагентами. Убедитесь, что образец полностью погружен в жидкость.
  5. Подключите оставшийся горлышко сосуда в трубу конденсатора. Кроме того, использовать сушильную трубку, наполненную безводным сульфатом кальция в верхней части конденсатора трубки. Запуск воды через трубу конденсатора.
  6. Печать всех стеклянных суставов с вакуумной смазкой.
  7. Раствор нагревают в силиконовой масляной бане до 80 ° С, используя перемешиваниеконфорка и удерживать эту температуру до шага 2.10. С помощью небольшой магнитной мешалке смешивать реагенты при 350 оборотах в минуту в течение 5 мин. Убедитесь, что BNC надлежащим образом пропитывают раствором железа и реагенты полностью растворились. Продолжают перемешивание смеси до конца эксперимента.
    Примечание: Используйте термометр, чтобы проверить температуру силиконового масла. Она должна быть стабильной до 80 ° С.
  8. Увеличение скорости перемешивания , до 700 оборотов в минуту и добавить (отбрасыванием), во временном интервале от 5 мин, 5 мл раствора гидроксида аммония (NH 4 OH, 14%) в 10 мл черного раствора с помощью пипетки иглы, которая была также пробил в перегородке пробке. После добавления гидроксида аммония, то цвет раствора изменяется от желтого / оранжевого до черного.
  9. Продолжить перемешивание раствора при 80 ° С в течение еще 5 мин. Избегайте высокоскоростных побуждения для того, чтобы сохранить целостность образца. Высокие скорости, то есть выше , чем 1000 оборотов в минуту, может уничтожитьобразец.
  10. Чем ниже температура раствора до 30 ° С с помощью регулирования температуры нижней части перемешивающего плитке и держать перемешивание в течение еще 5 мин. Затем выключите горячую плиту. В этот момент IONP были включены в сетку BNC.
  11. Охлаждают смесь до комнатной температуры и отделяют магнитные наночастицы (MNP) и BNC с помощью сильного постоянного магнита (например, 1 Тесла). Для этого, вводить смесь в колбу сосуда, а затем, при сохранении магнит к емкости, удерживая MNPS и БНК на месте в то время как декантированием супернатанта.
    Примечание: Будьте осторожны при обращении с сильными магнитами, так как они могут быть вредными при неправильном использовании. Для шагов (2.12) - (2.14) и (2.16) использовать венозная воду высокой чистоты, приготовленные ранее в (2.1), чтобы предотвратить частицы от окисления.
  12. Ресуспендируют MNPS и BNC в 100 мл воды. Слегка встряхните решение, чтобы удалить все MNPS, которые не сильно внедренные в BNC. Переливать Supernatant снова, удерживая MNPS и BNC на месте с помощью магнита.
  13. Промыть MNPS и несколько раз BNC с водой до тех пор, пока не достигнет супернатант нейтрального рН (рН ~ 7), как измерено с помощью колориметрического полосу.
  14. Отдельные магнитные функционализированных BNC или магнитной бактериальной nanocellulose (MBNC) из MNPS с помощью пинцета и промойте MBNC несколько раз водой, пока вода не станет прозрачной.
  15. Стерилизовать MBNC, подвергнув MBNC O / N к УФ (110-280 нм).
  16. Автоклавы 500 мл обедненной кислородом воды высокой чистоты при 120 ° С в течение 20 мин и хранят MBNC в 20 мл этой воды.
  17. Консерванта, погрузить образец в 1% ПЭГ и перемешивают в течение 2 ч при комнатной температуре (37 ° C). Эта процедура улучшает биосовместимость и стабильность наночастиц оксида железа , осажденных в БНК, в частности , тех , кто подвергается на поверхности 5-7. Покрытие ПЭГ будет распределен по MBNC 3D сети.
    Примечание: Голый IONP легко окисляются на воздухеиз - за их высокой химической активности 8. Несмотря на то, ПЭГ считается небиоразлагаемое материал, его химическая стабильность зависит от применяемых биологических условий , таких как содержание воды, рН, температура, наличие ферментов, активных форм кислорода, активных форм азота, а также другие 9.

3. Характеристика BNC и MBNC Плёночные

  1. Механические свойства
    1. Выполните обычную загрузку и разгрузку тест наноиндентирование с использованием индентора Беркович. Радиус Берковича алмазного индентора составляет 20 нм.
    2. Используйте плавленый диоксид кремния и вольфрама для калибровки площади контакта в зависимости от глубины вдавливания при комнатной температуре. Во время теста, установите образцы на отступа с помощью клея. Индентор подошел образцы в направлении его толщины.
    3. Произвольно выберите места отступа на образцах поверхностей. Держите расстояние между 2 отступов между 200-300 мм.
    4. Применить нагрузку наобразцы с шагом и записывать соответствующее перемещение индентора. Анализ график нагрузки в зависимости от глубины, чтобы найти модуль Юнга.
    5. Испытание проводят наноиндентирование образцов в присутствии деионизированной воды (ДИ воды), и проверить путем применения ставок нагрузки между 0.0001 мН / с и 0,005 мН / сек, с пиковой нагрузке в диапазоне от 0,01 до 0,60 мН мН.
    6. Используйте жидкую клетку и держать образцы в среде жидкости. Эта уникальная установка для наномеханического характеристики погруженного в среде жидкости идеально подходит для эффективного моделирования досягаемости биомеханической функциональности BNC и MBNC мембран.
  2. Структурная характеристика с помощью СЭМ
    1. Охарактеризуйте структуру nanocellulose волокна с помощью сканирующей электронной микроскопии (СЭМ).
    2. Лиофилизации образцов в течение 24 ч при температуре -80 ° С. Затем установите на SEM шпильки, разбрызгивание с Au-Pd пленку в течение 10 сек и анализируют с помощью сканирующего электронного микроскопа.
    3. Принимает изображения при увеличении 22,000Xи 60,000X, с ускоряющим напряжением 5 кВ.
  3. Магнитные домены
    1. Разрешить Плёночные MBNC полностью высохнуть при комнатной температуре, а затем подвергать воздействию в течение 5 мин до постоянного магнита (1 Тесла).
    2. Сразу же, проводить измерения магнитной силы с использованием био-AFM в соответствии с протоколом производителя.
    3. Для каждого измерения, захватить первую особенности топографии и приобретают магнитные домены во время второго прохода. Получить оба измерения с био-AFM в бесконтактном режиме.
    4. Магнитные характеристики наночастиц проводят с использованием вибрационного магнитометра (VSM) в системе измерений физических свойств (ПМП) от Quantum Design, при комнатной температуре (300 К), с магнитным полем в диапазоне от -10000 до 10000 эрстед.
  4. Cytocompatibility
    1. Семенной аорты человека клетки гладких мышц (HASMC) в 6-луночных тканевого культурального планшета при плотности 1.0x10 3 клеток / см 2 и инкубировать в течение 24 ч в присутствии тестируемых образцов: BNC и MBNC Плёночные (каждый с 15,6 мм диаметром).
    2. Используйте популяции необработанных и перекисью водорода клеток, обработанных в качестве отрицательного и положительного контроля соответственно.
    3. Выполнение анализа Comet в соответствии с протоколами изготовителя и руководящих принципов , предложенных А. Azqueta & Collins AR 10.
    4. Используйте краситель SYBR кислоты Золото нуклеиновой в этом анализе интеркалировать и флуоресцентно этикетке ДНК, содержащейся в электрофорезу образцах в соответствии с протоколом производителя.
      Примечание: Ячейки, которые не претерпевают каких-либо повреждений ДНК в присутствии BNC и MBNC образцов, покажет флуоресцентный круглый зеленый нуклеоида, тогда как ДНК поврежденные клетки будут иметь длинные кометы - положительные образцы будут иметь нуклеоиды (голова кометы), а затем хвосты, которые содержат фрагментированную ДНК материала (процент ДНК в хвосте).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Инкубационный период G. xylinus было в общей сложности 9 дней, но Плёночные начали формироваться раньше и были очевидны после того, как около 2 дней. Макроскопические появление BNC отображается на рисунке 1, форма которых имитирует блюда выращенных культуры. Рисунок 2 описывает способ получения BNC-IONP Плёночные, которая в кратком изложении основные этапы протокола выше, а также конфигурация основных компонентов.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Толщина и размер пелликулой BNC можно легко манипулировать путем изменения времени инкубации и размер колбы, в которой она выращена при статическом культивировании. В microproperties из БНК, такие как пористость, может быть изменена путем изменения соотношения кислорода в статической культуре. Более высокие концентрации кислорода дают более жестким BNC 11. А. Бодин и соавторы производства труб BNC с разрывного давления до 880 мм ртутного столба путем изменения соотношения кислорода из атмосферного кислорода д...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторам нечего раскрывать.

Благодарности

Эта работа финансировалась Министерством обороны по контракту No W81XWH-11-2-0067

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Glucoacetobacter xylinusATCC700178
AgarSigma AldrichA1296-500G 
D-Mannitol BioxtraSigma AldrichM9546-250G 
Дрожжевой экстрактBD Biosciences212750
Бактериологический пептонSigma AldrichP0556
Гидроксид натрия, 50% раствор в водеSigma Aldrich158127-100G
Гексагидрат хлорида железа (III)Sigma Aldrich236489-100G 
Гидроксид аммония Macron Fine Chemicals6665-46
поли(этиленгликоль), средний Mn 400сигма олдрича202398-250G 
Тетрагидрат хлорида железа (II)Sigma Aldrich44939-250G
Одноразовая чашка ПетриSigma AldrichBR452000
Одноразовая инокуляционная петляFisher Scientific22-363-604 
Безводный сульфат кальцияW.A. Hammond Drierite 13001
Высоковакуумная смазкаSigma AldrichZ273554-1EA
Лабораторная игла для пипеток с тупыми концами CAD793790
nbsp;  Sigma AldrichP4786-100EA
Колба для перегонки с круглым дном и тремя горлышками углового типаSigma-AldrichCLS4965250
Силиконовое масло для масляных ваннSigma-Aldrich85409-250ML 
Сушильная трубкаChemglassCG-1295-01
Пробка перегородки, тип рукаваChemglassCG-3022-98
Магнитная мешалкаChemglassCG-2001-05
КонденсаторChemglassCG-1218-01
Регулятор температурыBriskHeatSDC120JC-A
Мешалкадля нагреваНаучный центр Фишера11-100-49SH 
Набор для пробирного анализа кометTrevigen4250-050-K
SYBR Гель на основе нуклеиновых кислотStain Life TechnologiesS-11494
bio-AFMJPK InstrumentsNanoWizard 4a BioScience AFM
NanoindenterMicro Materials LtdМногомодульный механический тестер 
Сканирующая электронная микроскопия (СЭМ)Hitachi High Technologies AmericaHitachi S-4800
& золота

Ссылки

  1. Saxena, I. M., Brown, R. M. Biosynthesis of bacterial cellulose. Bacterial Nanocellulose: A Sophisticated Multifunctional Material. , 1-18 (2012).
  2. Chan-Park, M. B., Shen, J. Y. Biomimetic control of vascular smooth muscle cell morphology and phenotype for functional tissue-engineered small-diameter blood vessels. J.Biomed.Mater.Res.A. 88, 1104-1121 (2009).
  3. Barud, H. S., et al. Biocellulose-based flexible magnetic paper. J. Appl. Phys. 117, (2015).
  4. Märtson, M., Viljanto, J., Hurme, T., Laippala, P., Saukko, P. Is cellulose sponge degradable or stable as implantation material? An in vivo subcutaneous study in the rat. Biomaterials. 20, 1989(1999).
  5. Illésa, E., Tombácza, E., Szekeresa, M., Tótha, I., Szabób, Á, Iván, B. Novel carboxylated PEG-coating on magnetite nanoparticles designed for biomedical applications. J. Magn. Magn. Mater. 380, 132(2015).
  6. Torrisi, V., et al. Preventing corona effects: multiphosphonic acid poly(ethylene glycol) copolymers for stable stealth iron oxide nanoparticles. Biomacromolecules. 15, 3171(2014).
  7. Cai, Z., Kim, J. Bacterial cellulose/poly(ethylene glycol) composite: characterization and first evaluation of biocompatibility. Cellulose. 17, 83(2010).
  8. Wu, W., He, Q., Jiang, C. Magnetic iron oxide nanoparticles: synthesis and surface functionalization strategies. Nanoscale Res. Lett. 3, 397-415 (2009).
  9. Ulbricht, J., Jordan, R., Luxenhofer, R. On the biodegradability of polyethylene glycol, polypeptoids and poly (2-oxazoline)s. Biomaterials. 35, 4848(2014).
  10. Azqueta, A., Collins, A. R. The essential comet assay: a comprehensive guide to measuring DNA damage and repair. Arch. Toxicol. 87 (6), 949-968 (2013).
  11. Scherner, M., et al. In vivo application of tissue-engineered blood vessels of bacterial cellulose as small arterial substitutes: proof of concept. J. Surg. Res. 189, 340(2014).
  12. Bodin, A., et al. Influence of cultivation conditions on mechanical and morphological properties of bacterial cellulose tubes. Biotechnol Bioeng. 97, 425(2007).
  13. Zaborowska, M., et al. Microporous bacterial cellulose as a potential scaffold for bone regeneration. Acta Biomaterialia. 6, 2540(2010).
  14. Karimi, A., et al. A comparative study on the mechanical properties of the umbilical vein and umbilical artery under uniaxial loading. Artery Res. 8, 51(2014).
  15. Lina, F., Ping, Z., Shengmin, Z., Guang, Y. Evaluation of bacterial nanocellulose-based uniform wound dressing for large area skin transplantation. Mater. Sci. Eng. C. 33, 2995(2013).
  16. Olsson, R. T., et al. Making flexible magnetic aerogels and stiff magnetic nanopaper using cellulose nanofibrils as templates. Nature Nanotech. 5 (8), 584-588 (2010).
  17. Torre, B., et al. Magnetic force microscopy and energy loss imaging of superparamagnetic iron oxide nanoparticles. Sci. Rep. 1 (202), 1-8 (2011).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

in situ
Изготовление функционализированного магнитной Бактериальный Nanocellulose с оксида железа наночастицами
Свяжитесь с нами
Рекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия эксплуатации

Политика

Авторские права © 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.