Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Человек

17.1K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/53075

⸱

4 марта 2016 г.

В этой статье

Краткое содержание

Это видео демонстрирует технику чрескожной биопсии чрескожной мышцы боковой мышцы человека с использованием конхотома Вейля-Блейксли.

Аннотация

Чрескожная биопсия мышц с использованием конхотом Weil-Blakesley хорошо известна как в области клинической и исследовательской практике. Это безопасный, эффективный и хорошо переносимым методом. Конхотом Weil-Blakesley имеет резкий едкий наконечник с 4 - широкий полые 6 мм. Он вводится через 5 - разрез мм кожи 10 и может маневрировать для проникновения контролируемой ткани. Кончик открывается и закрывается в ткани, а затем поворачивают на 90 ° -180, чтобы сократить мышцу. Количество мышцы, полученные после многократного отбора проб может варьировать от 20 мг до 290 мг, которые могут быть обработаны как для гистологического исследования и молекулярных исследований. Рана должна быть сухой и энергичной физической активности сведено к минимуму в течение приблизительно 72 часов, хотя нормальные уровни активности можно перезапустить сразу после процедуры. Эта процедура безопасна и эффективна, когда пристальное внимание уделяется отбору субъектов, полной асептики и пост ухода процедуры. И правый и левый vAstus латеральной пригодны для биопсии в зависимости от предпочтений участников.

Введение

Получение скелетных мышц для диагностики миопатии и других нервно - мышечных дегенеративных заболеваний основывается на безопасных и эффективных методов , которые являются приемлемыми и не инкапаситирующей пациентам 1. Исторически сложилось, что методы получения мышечной ткани для анализа включены открытые биопсий под общим наркозом или аутопсии. Эти методики позволило непосредственно визуализировать мышцы и позволила больший кусок мышцы, чтобы быть биопсию. Учитывая потенциальные недостатки этих методик для пациента с точки зрения пребывания в стационаре и восстановления, чрескожные методы биопсии "полуоткрытых" мышцы были введены в качестве альтернативы. Эта методика была впервые исполнена с помощью Дюшенна (1806-1875), который использовал возведенных иглу с троакаром и был в состоянии получить образец мышц от живого субъекта без общей анестезии 2. С тех пор, различные формы игл для биопсии были использованы 3,4,5. Тем не менее, биопсия пeedle разработанный Бергстром в 1962 году был наиболее широко используемым в клинической практике; как у детей и взрослых, а также в исследованиях 6,7,8,9,10. Он обладает острым троакаром, режущую канюлю и толкатель выдворить ткани после биопсии. Мышечные выходы , полученные от этой процедуры были зарегистрированы в диапазоне от 25 -293 мг после повторной выборки 11,9.

Henriksson представил конхотом Weil-Blakesley в 1979 году в качестве альтернативного метода полуоткрытого биопсии мышц (Рисунок 1) 12. Прибор представляет собой единую структуру, в отличие от конструкции Бергстром и предназначен как с силы р острым кончиком кусаться. Размер наконечника может находиться в диапазоне от 4 мм до 6 мм в ширину. Когда два края едкой наконечника выступают против, полая формируется, что обеспечивает захват мышцы. Конхотом вводится через 5 - разрез кожи 10 мм и позволяет избежать необходимости в троакар, чтобы прорезать мышцы и облегающего фасцию как scalpeл может быть использован, чтобы сделать дорожку вниз к мышце.

Этот метод позволяет контролируемое проникновение ткани с высокой степенью маневренности 13,14. Это особенно полезно для сайтов , где чрезмерное давление может потенциально повредить нейроваскулярными или основные костные структуры например., На участке передней большеберцовой 15,14. Мышечные выходы с помощью конхотом может быть переменной и в нашей практике 20 - 200 мг мышцы были получены после повторного отбора проб. Одним из потенциальных преимуществ конхотом над иглой Bergstrom, в дополнение к высокой степени маневренности он предлагает, является то , что грызть кончик не должен быть заточены или заменены так часто , как троакар из Бергстрема построить 16.

Общая цель биопсии мышц с использованием конхотом Weil Blakesley является получение достаточного количества мышечной ткани, чтобы позволить гистохимии и молекулярный анализ как для диагностики и researч исследования. Это простая и безопасная процедура, которая может быть легко изучена. С помощью этого метода, мышцы подходит для биопсии включает бицепсы, трицепсы, дельтовидной, икроножных, передней большеберцовой, камбаловидной и sacrospinals 17,15,7,18,14. Внешняя часть латеральной широкой является наиболее распространенным сайт используется для биопсии , как это позволяет избежать основных сосудисто - нервных образований в бедро. Он идентифицируется приблизительно две трети вдоль воображаемой линии, соединяющей передней верхней подвздошной ости и коленной чашечки. Данные морфологии мышц, например , области myofibre, myofibre пропорций, плотности капилляров , полученных от латеральной широкой выборки широко доступны в литературе , позволяющей сравнение между исследованиями 11,19.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Этика заявление: Описание процедуры биопсии мышц мы следуем в нашем учреждении в настоящее время следующим образом. Процедура биопсии мышц используется в Хартфордшир Саркопения исследования, который был одобрен ряд исследований Комитет Хартфордшир 07 / Q0204 / 68. Все участники дали письменное информированное согласие 20.
Примечание: Один оператор может выполнить процедуру, чему помощник, который может участвовать участника в разговоре с тем, чтобы уменьшить беспокойство и гарантировать, что они удобны в любое время. Процедура Помещение должно быть оборудовано с раковиной, регулируемой по высоте диван, чистые поверхности и процедуры троллейбуса.

1. Подготовьте участника (рисунок 2)

  1. Попросите участников заложить комфортно, лежа на спине на диване. Выставляют предпочтительный бедра от паха складки. Распространение одноразового абсорбирующего листового материала под обнаженного бедра. Убедитесь в том, что нога остается прямой и расслаблены на протяжении всей процедуры, нобедро напрягся на мгновение , чтобы наметить латеральной широкой.
  2. Все процедуры сайта примерно две трети вниз воображаемой линии от передней верхней подвздошной ости к коленной чашечки.

2. Обработайте кожу (Рисунок 2)

  1. Бритье кожи примерно 4 см в диаметре, примыкающего к участку биопсии, предложенный стерильным бритвенного лезвия и протереть кожу тампоном, смоченным спиртом.
    ПРИМЕЧАНИЕ: Это должно предотвратить любое последующее улавливание волос в рану во время процесса заживления. Этот шаг не является обязательным в соответствии с предпочтениями оператора.
  2. Проникнуть кожу и прилегающая фасции с местным анестетиком. Используйте 25 G иглу для того чтобы поднять подкожную волдырь 2% лидокаина затем пропитать глубже в подкожную ткань с иглой 23 G. Цель, чтобы проникнуть по меньшей мере половины до одного дюйма в зависимости от содержания подкожной ткани в месте биопсии. Эта глубина должна быть достаточной, чтобы обеспечить вышележащие фасCIA наркозом. Разрешить 2 - 5 мин для наркоза к действию. Confirm анестезию при зондировании кожу нежно с иглой или скальпелем кончиком лезвия.

3. Подготовить стерильное поле (Рисунок 2)

  1. Вымойте руки с мылом и поддерживать чистые руки, пока стерильный халат не носится. Накройте руки стерильными перчатками до создания стерильного поля на процедуры тележке.
  2. Стерилизовать сайт биопсии с 2% -ным раствором спирта хлоргексидин / изопропиловый или дезинфицирующего кожи йода на основе. Нанесите стерильную драпировку с клеевым отверстием, чтобы обнажить участок биопсии, но также поддерживать стерильное поле.

4. Выполните процедуру (Рисунок 2)

  1. С размером 11 скальпель, сделайте 5 - 10 мм разрез на коже и вниз и через вышележащие фасции. Вставьте закрытую едкий кончик конхотом через разрез под прямым углом по отношению к продольной оси бедренной кости, на глубину усреднения половины до одного дюйма. При необходимости использованиясвободная рука, чтобы держать и поддерживать бедра вокруг места биопсии, а кончик конхотом открывается и закрывается в мышцах.
  2. Поверните конхотом через 90 - 180 °, чтобы сократить мышцу. Вытащите конхотом и откройте наконечник на стерильную марлю, смоченной стерильным нормальным физиологическим раствором. Повторите процедуру в одном месте раны, при необходимости, чтобы получить достаточное количество мышечной ткани. Перенести марли в контейнер помещают на лед. Перенести контейнер в лабораторию для обработки подготовки мышц в соответствии с местным институциональным протоколом.

5. Сообщение Процедура (Рисунок 2)

  1. Применить прямое давление на рану на срок до 5 мин. Закройте рану стерильными-полосками, помещая их параллельно к ране, а не под прямым углом, чтобы избежать потенциально удаления рубцовой ткани и повторное открытие раны, если стерильными-полоски удаляются непреднамеренно. Поместите стерильный абсорбирующий повязку на STERI-полоски и связать двухслойнуюбандаж для сжатия и закрепите скотчем.
  2. Объясните рану метод приправа к участнику, как они должны будут выполнять перекид- туалетный 3 - 4 дней после процедуры. Убедитесь в том, что участник снимает повязку сжатия перед сном позже в тот же вечер.

6. Сообщение Биопсия Советы

  1. Сообщить участника , что является общим для испытывать некоторую жесткость бедра , которая может быть освобожден от несложных упражнений (например., Ходьба). С помощью простой анальгезию, такие как ацетаминофен. Предупредить участника о преходящей онемения вокруг места биопсии, которые могут сохраняться в течение до двух недель, а также потенциальное осложнение раневой инфекции.

7. Инструкции для субъекта процедуры Post

  1. Попросите участников, чтобы избежать активной деятельности в течение 72 ч (например, подъем, бег, тяжелая атлетика). Попросите участников, чтобы избежать погружения в воде в течение 48 - 72 ч. Тем не менее, поручить participanт обернуть скотча или подобное вокруг места биопсии, когда принимает душ, чтобы держать туалетный сухим.
  2. Попросите участника изменить повязку через 3 - 4 дней и удалить STERI-полоски после одной недели.
    Примечание: Участник должен дать письменные инструкции по уходу биопсии по месту службы, запасных повязок и аварийно-контактные данные команды, ответственной за выполнение процедуры.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Процедура, описанная выше, является безопасным и приемлемым в клинических и научных исследованиях. Когда биопсия выполняется как часть диагностического процесса, мышцы должны быть выбраны в соответствии с симптомами и признаками мышечной слабости пациента. Сайт биопсии должен быть свободен от предыдущих травм, контрактуры или 21,1 приборов. В исследовании, стандартизированные условия , такие как пост или исключения пациентов с сахарным диабетом может потребоваться 19.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Для обеспечения безопасности участника и эффективного выполнения биопсии мышц, очень важно обратить внимание на критические шаги в рамках протокола.

Участники должны быть выбраны после тщательного рассмотрения критериев исключения, чтобы избежать таких осложнений, как кровотечение и плохое заживление ран. Строгое асептики в течение всей процедуры имеет важное значение. Применение правильной техники обеспечит комфорт участника, свести к минимуму нежелательные травмы тканей участника и позволя...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Никто не заявлял.

Благодарности

Мы хотим поблагодарить участников исследования за то, что они сделали эту работу возможной, а также сотрудников Центра биомедицинских исследований NIHR Саутгемптона и Центра клинических исследований Wellcome Trust, Университетской больницы Саутгемптона за помощь в проведении измерений.

Эта работа была поддержана Биомедицинским исследовательским центром NIHR Саутгемптона, Питанием, Подразделением эпидемиологии жизненного цикла MRC и Университетом Саутгемптона. Этот отчет является независимым исследованием, проведенным Схемой финансирования BRC NIHR. Мнения, выраженные в этой публикации, принадлежат авторам и не обязательно совпадают с мнением NHS, NIHR или Департамента здравоохранения. AMB поддерживается стипендией NIHR для клинических исследований, HPP поддерживается Саутгемптонским биомедицинским исследовательским центром NIHR.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Weil-Blakesley conchotomeGebrü der Zepf Medizintechnik, Dü rbheim, ГерманияНетЖевательный наконечник 6 мм
5 мл 2% лидокаинОбщее применениеНетОдного флакона 5 мл должно быть достаточно для адекватной анестезии
Спиртовой тампонОбщее использованиеНет
Шприц 5 млОбщее использованиеНет
25 г и 23 Г стерильные иглыОбщее использованиеНет
Стерильный скальпель размер 11Общее использованиеНет
Стерильные марлевые квадратыДженерикПрименение Нет
Натрия хлорид 0,9% 10 млФаннин1122/002/001
Steri-Drape™ Маленькая простыня с адгезивным отверстием3M1020
ChloraPrep 2% против /70% v/v кожный раствор CareFusion270400Two
Steri-Strip™ 1/4 дюйма x 3 дюйма Усиленные клейкие застежки для кожи3MR1541
PRIMAPORE стерильная повязка 15 см x 8 смSmith &  
Племянник
66000318
Хлопчатобумажный креповый бинт Hospicrepe 233 7,5 см x 4,5 мHartmann915562
Гибкий когезивный бинт Co-Plus LFBSN медицинский2904565
Одноразовый абсорбирующий листУниверсальное использованиеНет
Микропористая или транспоровая лентаОбщее использованиеНет
Стерильный халат со стерильной бумагой полотенцаУниверсальное использованиеНет
Стерильные перчаткиУниверсальное использованиеНет

Ссылки

  1. Dubowitz, V., Sewry, C. A., Oldfords, A. Muscle Biopsy: A Practical Approach. , 4th ed, Saunders Elsevier. China. (2013).
  2. Parent, A. Duchenne De Boulogne: a pioneer in neurology and medical photography. Can J Neurol Sci. 32 (3), 369-377 (2005).
  3. Hayot, M., Michaud, A., Koechlin, C., Caron, M. A., Leblanc, P., Prefaut, C., Maltais, F. Skeletal muscle microbiopsy: a validation study of a minimally invasive technique. Eur Respir J. 25 (3), 431-440 (2005).
  4. O'Rourke, K. S., Blaivas, M., Ike, R. W. Utility of needle muscle biopsy in a university rheumatology practice. J Rheumatol. 21 (3), 413-424 (1994).
  5. O'Rourke, K. S., Ike, R. W. Muscle biopsy. Curr Opin Rheumatol. 7 (6), 462-468 (1995).
  6. Bergstrom, J. Muscle electrolytes in man. Scand J Clin Lab Invest. 14, Suppl 68. (1962).
  7. Edwards, R., Young, A., Wiles, M. Needle biopsy of skeletal muscle in the diagnosis of myopathy and the clinical study of muscle function and repair. N Engl J Med. 302 (5), 261-271 (1980).
  8. Edwards, R. H. Percutaneous needle-biopsy of skeletal muscle in diagnosis and research. Lancet. 2 (7724), 593-595 (1971).
  9. Edwards, R. H., Round, J. M., Jones, D. A. Needle biopsy of skeletal muscle: a review of 10 years experience. Muscle Nerve. 6 (9), 676-683 (1983).
  10. Shanely, R. A., Zwetsloot, K. A., Triplett, N. T., Meaney, M. P., Farris, G. E., Nieman, D. C. Human skeletal muscle biopsy procedures using the modified Bergstrom technique. J Vis Exp. (91), e51812(2014).
  11. Coggan, A. R. Muscle biopsy as a tool in the study of aging. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 50, 30-34 (1995).
  12. Henriksson, K. G. 'Semi-open' muscle biopsy technique. A simple outpatient procedure. Acta Neurol Scand. 59 (6), 317-323 (1979).
  13. Dorph, C., Nennesmo, I., Lundberg, I. E. Percutaneous conchotome muscle biopsy. A useful diagnostic and assessment tool. J Rheumatol. 28 (7), 1591-1599 (2001).
  14. Poulsen, M. B., Bojsen-Moller, M., Jakobsen, J., Andersen, H. Percutaneous conchotome biopsy of the deltoid and quadricep muscles in the diagnosis of neuromuscular disorders. J Clin Neuromuscul Dis. 7 (1), 36-41 (2005).
  15. Dietrichson, P., Mellgren, S. I., Skre, H. Muscle biopsy with the percutaneous conchotome technique. J Oslo City Hosp. 30 (5), 73-79 (1980).
  16. Dietrichson, P., Coakley, J., Smith, P. E., Griffiths, R. D., Helliwell, T. R., Edwards, R. H. Conchotome and needle percutaneous biopsy of skeletal muscle. J Neurol Neurosurg Psychiatry. 50 (11), 1461-1467 (1987).
  17. Andonopoulos, A. P., Papadimitriou, C., Melachrinou, M., Meimaris, N., Vlahanastasi, C., Bounas, A., Georgiou, P. Asymptomatic gastrocnemius muscle biopsy: an extremely sensitive and specific test in the pathologic confirmation of sarcoidosis presenting with hilar adenopathy. Clin Exp Rheumatol. 19 (5), 569-572 (2001).
  18. Helliwell, T. R., Coakley, J., Smith, P. E., Edwards, R. H. The morphology and morphometry of the normal human tibialis anterior muscle. Neuropathol Appl Neurobiol. 13 (4), 297-307 (1987).
  19. Patel, H. P., Jameson, K. A., Syddall, H. E., Martin, H. J., Stewart, C. E., Cooper, C., Sayer, A. A. Developmental influences, muscle morphology, and sarcopenia in community-dwelling older men. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 67 (1), 82-87 (2012).
  20. Patel, H. P., Syddall, H. E., Martin, H. J., Stewart, C. E., Cooper, C., Sayer, A. A. Hertfordshire Sarcopenia Study: design and methods. BMC Geriatrics. 10 (1), 43(2010).
  21. Anderson, J. R. Recommendations for the biopsy procedure and assessment of skeletal muscle biopsies. Virchows Arch. 431 (4), 227-233 (1997).
  22. Patel, H. P., Syddall, H. E., Martin, H. J., Cooper, C., Stewart, C., Sayer, A. A. The Feasibility and Acceptability of Muscle Biopsy in Epidemiological Studies: Findings from the Hertfordshire Sarcopenia Study (HSS). J Nutr Health Aging. 15 (1), 10-15 (2011).
  23. Charifi, N., Kadi, F., Feasson, L., Costes, F., Geyssant, A., Denis, C. Enhancement of microvessel tortuosity in the vastus lateralis muscle of old men in response to endurance training. J Physiol. 554 (Pt 2), 559-569 (2004).
  24. Frontera, W. R., Suh, D., Krivickas, L. S., Hughes, V. A., Goldstein, R., Roubenoff, R. Skeletal muscle fiber quality in older men and women. Am J Physiol Cell Physiol. 279 (3), C611-C618 (2000).
  25. He, J., Watkins, S., Kelley, D. E. Skeletal muscle lipid content and oxidative enzyme activity in relation to muscle fiber type in type 2 diabetes and obesity. Diabetes. 50 (4), 817-823 (2001).
  26. Patel, H. P., Al-Shanti, N., Davies, L. C., Barton, S. J., Grounds, M. D., Tellam, R. L., Stewart, C. E., Cooper, C., Sayer, A. A. Lean mass, muscle strength and gene expression in community dwelling older men: findings from the Hertfordshire Sarcopenia Study (HSS). Calcif Tissue Int. 95 (4), 308-316 (2014).
  27. Peterson, C. M., Johannsen, D. L., Ravussin, E. Skeletal muscle mitochondria and aging: a review. J Aging Res. 2012, 194821(2012).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Биопсия латеральной широкой мышцы бедратехника биопсии мышцперкутанная биопсия мышцподготовка стерильного поляинфильтрационная местная анестезиязабор образцов тканейметод закрытия раныгистохимический анализмолекулярный анализ