Method Article

Мотор и гиппокампа зависимости пространственное обучение и оценка памяти Reference в трансгенной Rat модели болезни Альцгеймера с инсультом

DOI:

10.3791/53089

March 22nd, 2016

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Для того, чтобы исследовать коморбидными болезнь Альцгеймера (AD) и состояние инсульта в новой модели, три задачи поведения описаны, которые оценивают как управление двигателем и когнитивные модели поведения. Эти задачи включают в себя задачу пучка ходить, задача цилиндра и водном лабиринте Morris.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Болезнь Альцгеймера (AD) является нейродегенеративным изнурительной болезни, что приводит к нейродегенерации и потери памяти. Хотя возраст является основным фактором риска развития БА, инсульт также вовлечен как фактор риска и фактор усугубляя. Коморбидность инсульта и АД приводит к ухудшенной инсульта, связанных с управлением двигателя и AD, связанных с когнитивными нарушениями по сравнению с только каждого условия. Для моделирования сложенном состоянии инсульта и БА, новой трансгенной модели крысы AD, с мутантной формой белка-предшественника амилоида (ключевого белка, участвующего в развитии AD), включенному в его ДНК, дается небольшой односторонний полосатой инсульт.

Для модели с комбинацией обоих инсульта и БА, поведенческие тесты, которые оценивают инсульт, связанные с управление двигателем, двигательную и AD связанных с когнитивной функции должны быть реализованы. Задача блока цилиндров включает в себя экономичный, многофункциональный аппарат, который оценивает использование двигателя спонтанное передних конечностей, В этой задаче крысу помещают в цилиндрический аппарат, где крыса будет самопроизвольно сзади и обратитесь к стенке цилиндра с его конечностями. Эти контакты считаются использование двигателя передней конечности и количественно при анализе видео после тестирования. Другой экономичный двигатель задача реализована задача луча ходьбы, которая оценивает контроль передних конечностей, контроль задних конечностей и двигательную. Эта задача включает в себя крысиный ходить по деревянным брусом, позволяющим для оценки конечностей управления двигателем на основе анализа промахов передних конечностей, задних конечностей поскользнуться и упасть. Оценка обучения и памяти завершается Морриса водный лабиринт для этой поведенческой парадигмы. Протокол начинается с пространственного обучения, в результате чего крыса локализует стационарной скрытой платформы. После того, как пространственное обучение, платформа удаляется и как краткосрочные и долгосрочные пространственной привязки памяти оценивается. Все эти три задачи чувствительны к различиям в поведении и завершены в течение 28 дней для этой модели, что делает этот пунктДИГМ времени эффективным и экономически эффективным.

Introduction

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Болезнь Альцгеймера (AD) является наиболее распространенной формой деменции у пожилых людей и изнурительных нейродегенеративных заболеваний. Гистопатологически, AD представляет себя как амилоидных бляшек, нейрофибриллярных клубков и гибель нейронов. Амилоидные бляшки в основном состоят из бета-амилоидного пептида (Ар), разрабатываемой через измененное протеолитического расщепления белка - предшественника амилоида (АРР) путем бета-секретазы и гамма-секретазы ферменты 1,2,3. Продукт расщепления, A & beta;, депозиты в головном мозге создавая патологических амилоидных бляшек и оказывает токсическое воздействие на мозг, что может привести к характерным нарушениями обучаемости и потерей памяти. Все эти шаги вместе именуются как "амилоидного каскада" гипотезы 3,4. В то время как эта гипотеза имеет важное значение при исследовании AD, другие клеточные изменения были обнаружены предварить эти образования зубного налета, который отходит от первоначального амилоидного каскада пути. Эти другиеклеточные изменения , как полагают, способствуют ранней потери памяти, обучения и нарушения других когнитивных дисфункций , связанных с AD до образования бляшек 3,5,6.

С нашей эры становятся все более распространенными, факторы риска развития БА становятся чрезвычайно важным объектом исследований. Хотя возраст является основным фактором риска для спорадических форм AD, другие факторы риска были выявлены, в том числе инсульта 7,8. Инсульт является не только фактором риска, но он также может приводить к обострению уже существующих деменций. Например, клинически, прогрессирование БА было показано, что хуже , у пациентов , которые ранее испытывали инсульт 9. Кроме того, увеличение экспрессии APP и накопление A & beta были обнаружены в экспериментальных животных моделях токсичности в сочетании Ар с индуцированными инсульта 10,11. Так как это важно взаимодействие между инсультом и БА, крайне важно, чтобы эти два патологиями быть дополнительно исследованвместе в коморбидных моделей, чтобы лучше понять патофизиологию и поведение замешан в обоих условиях.

Для исследования сопутствующих патологических состояниях, соответствующая модель должна была быть разработана, в котором инсульт может взаимодействовать с A & beta; производить AD-подобные патологии. В первый раз, трансгенной крысы APP21, который имеет мутантный ген АРР человека включены в его ДНК была использована для достижения соответствующей модели AD. Мутации являются шведское двойной Миссенс и Индиана сингл миссенс мутации, которые оба были замешаны в семейных форм AD 4,8,12. При отсутствии дополнительного инсульта, эта модель крысы возрастов без разработки характерных бляшек A & beta или нейрофибриллярных клубков 12. Таким образом, в стремлении побудить AD-как поведенческое патология, небольшой инсульт вводится в правую стриатума , чтобы имитировать небольшие подкорковые инсульты часто присутствующие в слабоумием пациентов 9. Ход в трансгенной ра APP21т воплощает коморбидными состояние и позволяет исследовать различные типы поведенческих изменений, замешанных в обоих болезненных состояний. В частности, это индукция AD-подобные патологии и когнитивных нарушений у взрослых крыс позволяет исследовать самые ранние молекулярные и когнитивные изменения, предшествующие AD.

Поскольку цель состоит в том, чтобы определить первые признаки поведенческих изменений и поскольку оба инсульта и AD имеют очень четкие поведенческие патологии, при изучении коморбидными модели, задачи поведения необходимо оценить различные поведенческие фенотипы. Есть батарея относительно чувствительных тестов, которые можно сделать, чтобы проанализировать двигатель и познавательное поведение в моделях грызунов, которые включают множество парадигм и оборудования. Для того, чтобы конкретно проанализировать и передних конечностей задних конечностей моторной функции, задача цилиндра задачи и пучка ходьбы были реализованы для выявления дефицита моторных и контролировать двигательную в этой модели. Другие чувствительные задачи, разработанные специально для оценки штрафа FOrelimb двигательных навыков (т.е. задача лестницы и одной гранулы достижения задачи) требуют лишение пищи 11,13,14. Для того, чтобы избежать какой - либо из известных эффектов пищевой депривации на состояние здоровья пациента патологии 15,16,17, эти тесты были признаны непригодными для данного исследования. Задача цилиндра оценивает спонтанное использование передних конечностей у крыс во время выращивания в новой среде и может обнаружить асимметрию между конечностями у крыс с односторонним ударом 10,18. Основным преимуществом для решения этой задачи является то , что устройство может быть использовано для выполнения других задач поведения, таких как Порсолта принудительного плавания задачи 19. В отличие от задачи цилиндра, задача луч-прогулка также позволяет анализировать и задних конечностей управления двигателем передних конечностей, в дополнение к locmotion 10,14. Beam ходьба включает в себя компонент двигательную, компонент баланса и квалифицированного размещение ноги. Оба этих испытаний являются экономически эффективными, простой и эффективный по времени и поясняющие эффекты инсульта и АД на д ifferences в функционировании конечностей.

Помимо изменений в моторной функции, AD включает в себя нарушения памяти, которые могут представить на ранних стадиях развития болезни. При обращении AD-подобных патологий в модели грызуна, крайне важно , чтобы гиппокампа зависит от обучения и памяти оценивается потому , что гиппокамп является важной структурой мозга в значительной степени затронуты в AD 2. Гиппокамп является одним из важнейших область мозга для пространственного обучения и памяти и ее функции могут быть проверены с использованием различных лабиринтов парадигм у грызунов. Одним из широко используемых в основном задач для лабиринту грызунах моделей различных заболеваний является водном лабиринте Морриса 20. Водный лабиринт Морриса использует пространственные сигналы, чтобы помочь крысу в поиске стационарной скрытой платформы и тесты пространственной долговременной памяти, когда платформа будет удалена. Ценным преимуществом установки с водным лабиринтом является то , что она хорошо адаптируется в зависимости от предлагаемого вопроса исследования 20.

палатка "> Впервые методы, описанные были использованы для оценки двигателя и когнитивные функции в новой коморбидными модели инсульта у крыс и АД. с участием небольших инсультов в трансгенной модели крыс APP21. Сопутствующие заболевания было достигнуто за счет индукции вазоконстрикция кровеносных сосудов в стриатуме , чтобы произвести небольшой удар в APP21 трансгенных крыс. Эта модель инсульта была хорошо известна в качестве со-болезненное состояние в альтернативной модели крысы 11 AD. Продвижение в этом романе APP21 трансгенная модель крысы предназначалась для получения более поступательно ценную модель. в то время как поведенческие задачи описаны с использованием коморбидными инсульта и А. Д. крысиную модель, эти задачи могут быть дополнительно применены к другим моделям инсульта или моделей других неврологических заболеваний (например болезнь Паркинсона). общий описанная методология будет широко применяться к этим другим болезненных состояний, но поведение временные рамки и парадигмы могут потребовать изменения на основе предложенных Резвопрос и нить поиск модели. В дополнение к адаптации, задачи, описанные эффективны в демонстрации незначительных дефицитов, в то же время доступные по цене и времени эффективным.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Соответствующий институциональный комитет по этике животных должны одобрить все поведенческие процедуры до начала экспериментов. Все животное работа, описанная здесь, была утверждена Western University Animal подкомитетом Использования и следует Канадский совет по руководящим принципам ухода за животными. Эти эксперименты на животных проводили в течение легкой фазы.

1. Цилиндр Задача по оценке Gross Motor передней конечности

  1. Установка оборудования
    1. Приобретают цилиндр из плексигласа с перфорированной крышкой, которая скорректирует размер крысы, используемого для эксперимента. Размер цилиндра не должен позволять крысы, чтобы достигнуть вершины при выращивании и она должна позволить 2 см между стеной и носа крысы и основания хвоста крысы. Стандартный размер цилиндра составляет 23 см в диаметре и 40 см в высоту для 6-месячного (400-600 г) крыс.
    2. Поместите зеркало под углом 45 ° ниже устройства цилиндра с цилиндром сидит на PLExiglas стоять или какой-либо другой формой поддержки приблизительно 30 см выше верхней части таблицы.
    3. Настройка видеокамеры на штатив на соответствующем расстоянии, чтобы визуализировать весь диаметр цилиндра в зеркале на видеокамеру.
    4. Включите освещение на диммер настройки и играть белый шум в комнате (т.е. низкий объем, тонкая музыка) , чтобы уменьшить влияние резких громких звуков. Это должно помочь стимулировать движение и предотвращения замерзания из-за громких звуков.
  2. Экспериментальная процедура
    1. Перемещение крыс в экспериментальной комнате 30 минут до начала первого судебного процесса акклиматизации крыс в комнату с музыкальным воспроизведением и диммер освещения.
    2. Напишите соответствующее животное и пробную информацию (т.е. количество животных, изо дня в сроки и пробный номер) на небольшой белой доске. Поместите эту доску перед зеркалом.
    3. Нажмите запись на видеокамеру с белой доске перед зеркалом, возьмите крысу вблизи основания Oе хвост, поместите крысу в цилиндре и зафиксировать крышку. Отойди в сторону цилиндра, чтобы избежать вмешательства с возможностью записи видео.
    4. Удалите белую доску от перед зеркалом и пусть рекорд видео камера крысу в цилиндре в течение 5 минут (используйте таймер для записи 5 мин от момента, когда белая доска удаляется). Это одно испытание.
    5. Очистите цилиндр с бумажным полотенцем и водой после суда.
    6. Повторите шаги 1.2.2-1.2.5 еще два раза, чтобы достичь в общей сложности трех испытаний. Там должно быть 20-30 мин между пробный время, чтобы уменьшить вероятность привыкания к цилиндру. В течение этого времени запуска цилиндров испытаний для других крыс.
  3. Анализ видео
    1. Видеокамеры Импорт файлов в программе редактирования видео (т.е. IMOVIE)
    2. Компиляция видео на клипы для каждого испытания. Отключение звука громкость видео и уменьшить скорость видео до 25% от оригинала.
    3. Подсчитайте количество контактов передних конечностейсо стенкой цилиндра для левой и правой передних конечностей. Для одновременных левых и правых контактов, рассчитывать эти контакты как передних конечностей "и". Имейте в виду, что видео записывается через зеркало, то, как представляется, левая передняя конечность в видео соответствует правой передней лапы животного в реальности.
    4. Рассчитайте использование процентов пораженной передних конечностей (контралатеральной к обводке), используя следующее уравнение: [{(затронутый контакты + ½ двусторонние контакты) / общее количество контактов} х 100]. Производительность обеих групп мышей дикого типа и трансгенного группе без инсульта считаются группы сравнения, чтобы оценить презентацию проблем болезни, вызванной.

2. Балка прогулка Задача для оценки моторики

  1. Установка оборудования
    1. Приобретают гладкая запечатанный деревянный брус, который составляет 2 см в ширину и длину приблизительно 120 см (оптимальная ширина для 200-600 г крысы).
    2. Поместите две таблицы или стеллаж ипего 100 см друг от друга. Поверхности каждого блока должна быть примерно 40 см над поверхностью земли.
    3. Закрепите оба конца балки к столу или стеллаж поверхность с помощью липкой ленты. Приблизительно 1 м неподдерживаемого длины балки должна теперь быть поднята на 40 см над землей.
    4. Настройка видеокамеры на подставке, захватывая по всей длине балки. Для усиления контраста в видео, рассмотреть вопрос о введении черного фона позади луча при использовании белых крыс.
  2. Экспериментальная процедура
    1. Перемещение крыс в экспериментальной комнате 30 минут до начала первого судебного процесса акклиматизации крыс в комнату с музыкальным воспроизведением и диммер освещения.
    2. Поместите дом клетке или окружающей среды с обогащением трубки крысы на одном конце балки и поместите крысу на другом конце балки.
    3. Провести несколько незаписанный трасс за два дня до экспериментальных испытаний. Пусть крыса исследовать область и направлять крысу в направлении луча, удерживая основание крысы'Хвост.
    4. После того, как крыса пересечет луч, перемещать клетку или трубки к другому концу балки и повторите. Когда крыса пересекает луч свободно в любом направлении, тренировка закончилась. Держите количество тренировочных заездов согласуется среди всех животных.
    5. Напишите соответствующее животное и пробную информацию (т.е. количество животных, изо дня в сроки и пробный номер) на небольшой белой доске. Лента эта белая доска на стене позади луча.
    6. Поместите домашней клетки или среды обогащения трубки крысы на одном конце балки.
    7. Пресс-запись на видеокамеру и выбрать крысу вверх по основанию хвоста и место на конце балки, противоположной домашней клетки или трубки.
    8. Запишите полноту судебного процесса, который заканчивается, когда крыса успешно завершил обход по всей длине надземной пучка. Если крыса делает паузу на полпути поперек пучка, осторожно загривок крысы на основании хвоста или коснуться хвоста крысы нежносодействовать движению поперек пучка. Не толкайте крысу вперед каким-либо образом.
    9. Повторно делать испытания, когда крыса поворачивается в то время как на коромысле, неоднократно останавливается при ходьбе или ходит непоследовательно. Если крыса падает и продолжает висеть на балке, аккуратно выкопать крысу и поместить его обратно на балку в положении падения и продолжить судебный процесс.
    10. Перемещение дом клетке или трубки на другом конце балки, изменить пробный # на белой доске и записывают последующее исследование.
    11. Повторите эту процедуру до тех пор, в общей сложности 6 испытаний не были завершены, с 3-мя испытания регистрируются для каждого направления. Все 6 испытаний для крысы могут быть записаны перед началом испытания на следующей крысы.
  3. Анализ видео
    1. Импорт видео камеры файлы в программу для редактирования видео (т.е. IMOVIE).
    2. Компиляция видео на клипы для каждого испытания и приглушить громкость видео. Анализ каждого видеоклипа кадр за кадром.
    3. Подсчитайте числоот общего количества шагов крыса требуется, чтобы ходить по всей длине луча и общее количество левых и правых задних конечностей и передних конечностей промахов и общее количество падений. Производительность обеих групп мышей дикого типа и трансгенная группа без инсульта считаются по сравнению с коморбидными группе оценить появление дефицита уникальных для совместного болезненного состояния.

3. Моррис Водный лабиринт для гиппокампа-зависимой пространственного обучения и долговременной памяти

  1. Установка оборудования
    1. Закрепить видеокамеру, расположенную над центром круглого бассейна (диаметром 148 см и глубиной 58 см). Совместите четыре квадранта, обозначенные должным образом с контуром бассейна в программе слежения.
    2. Заполните круговой бассейн с водой около 36 см в глубину. Вода должна быть нагрета до комнатной температуры путем наполнения бассейна через несколько дней до начала экспериментального протокола.
    3. Добавить черный нетоксичного акриловая краска ООНсезам вода непрозрачна при использовании белых крыс. Используйте светлый цвет, например белый, для более темных цветных крыс.
    4. Окружите бассейн с пустыми стенных поверхностей, в том числе перегородок, если это необходимо. Когда в бассейне, крыса не должна быть в состоянии видеть экспериментаторов.
    5. Вырезать 4 больших различной формы пространственные сигналы из различных цветов ватмана и прикрепите одну форму на стене в назначенный север, восток, юго-восток и юго-запад местах бассейна. Эти сигналы должны быть немного выше, чем край бассейна.
    6. Включите радио на низком уровне громкости в северо-западном секторе, чтобы предотвратить крысу от отвлекаясь на неожиданных громких звуков во время тестирования.
    7. Поместите круглую платформу (диаметр 11,5 см, поверхность на 2-3 см ниже уровня воды) в центре мишени квадранте.
    8. Выключите основной комнате освещение и поверните на пол торшер на противоположной стороне делителя комнаты к бассейну, чтобы осветить зону.
  2. Конфигурация компьютера
    1. Используйте программу отслеживания, которая предназначена для выполнения задач поведения в водном лабиринте Morris и настроить протокол до начала экспериментов. Пример возможной программы предусмотрена на рисунке 4.
    2. Установить 4 дня подряд с 4 испытаний 90 сек каждого пространственного обучения эксперимента.
    3. Набор 2 отдельных экспериментов зонд 30 с каждой через 24 часа после последнего пространственного обучения методом проб и через 1 неделю после первого эксперимента зонда.
    4. Набор учебных испытаний подают реплики на 4 испытаниях в день в течение 2 дней подряд, начиная через 24 ч после второго эксперимента зонда. Каждое испытание должно быть 60 с общей.
    5. Для каждого этапа, установить порядок тестирования таким образом, что существует 20 мин между пробный интервал между каждым испытанием для любого данного животного. Другие животные могут быть запущены в течение Внутриструктурные испытательного интервала, до тех пор, как каждое животное сохраняет 20 мин между пробный интервал.
    6. Убедитесь, что положение платформы должна быть определена экспериментатором и что все другие зоны деоштрафован назначенным положением платформы.
    7. Установите программу для ручного запуска и завершения каждого испытания.
  3. Пространственное обучение Эксперимент
    1. Поместите круглую платформу в юго-западном секторе. Он должен быть совмещен с круговой обозначенной "платформы" области в квадранте на компьютерной программе.
    2. Стартовые позиции вокруг бассейна должны быть рандомизированы для каждой крысы. Представляют все стартовые позиции в каждой группе лечения. Ни одна крыса не начинается с позиции северо-восточного для любых пространственных учебных испытаний в парадигме, представленных для обеспечения новой стартовой позиции во время тестирования зонда.
    3. Держите крысу у основания хвоста и аккуратно поместить его в воду вдоль стенки бассейна в указанном месте старта и быстро выйти из поля зрения крысы.
    4. Есть другой экспериментатор запустить программное обеспечение для отслеживания, как только крыса находится в воде. Таймер должен начать отсчет от 0 до о программе слежения.
    5. Если крыса находит платформу, имеют другой экспериментатор остановить судебный процесс на компьютере и оставить крыса на платформе, по крайней мере, 30 секунд перед извлечением его. Если крыса прыгает с платформы до суда останавливается на компьютере, судебный процесс продолжается.
    6. Если крыса не находит платформу в отведенное время судебного разбирательства, направлять крысу на платформу, используя ваши руки (либо делает крыса следовать за руку или направлять крысу основания хвоста). Держите крысу на платформе в течение 30 сек.
    7. Удалить крысу из пула с помощью основания хвоста на руку экспериментатора, которая покрыта полотенцем или пусть крыса забираются на портативном поверхности.
    8. Повторите шаги 3.3.3-3.3.7 в общей сложности 4 испытаний на крысу. Там должно быть между пробный интервал 20 мин для каждой крысы.
    9. Возвращение крыс в их родную клетку под нагревательной лампой в течение по крайней мере 10 минут после последнего пространственного обучения суда крысы.
    10. Продолжить EXAкт же пространственный протокол обучения для 2-й день через 4-й день пространственного обучения.
    11. В день 2-4, не держат крыса на платформе больше. Дайте крысе сидеть на платформе без посторонней помощи в течение 30 секунд с экспериментаторами из виду. Это может быть сделано в ходе последующих испытаний на 1-й день по случаю.
  4. зонд Эксперимент
    1. Извлеките платформу из пула. Убедитесь, что предыдущее положение платформы по-прежнему определяется на компьютере (круг в юго-западном секторе).
    2. Поместите крысу в воде вдоль стенки бассейна в положении к северо-востоку и быстро выйти из поля зрения крысы. Использование романа на северо-восток начальная позиция гарантирует, что крыса напоминает позицию платформы, независимой от ранее подготовленных стартовых позиций.
    3. Есть другой экспериментатор запустить программное обеспечение для отслеживания, как только крыса находится в воде. Таймер должен начать отсчет от 0 до на отслеживания программного обеспечения.
    4. Получить крысу изк юго-западу квадранта бассейна основанием хвоста и держать на полотенце покрытой рукой или пусть крыса забираются на портативном поверхности.
    5. Возвращение крыс в их родную клетку под нагревательной лампой в течение по крайней мере 10 минут после суда зонда каждой крысы.
    6. Повторите этот эксперимент (шаги 3.4.1-3.4.5) 1 неделю спустя.
  5. Cued обучения Эксперимент
    1. Используйте ленту, чтобы обеспечить диаметр 4 см белый сферическую кий на подставке, которая составляет 8,5 см в высоту на платформе (общая высота кия составляет 12,5 см). В верхней части сферического реплике будет по меньшей мере 8,5 см над уровнем воды.
    2. Удалите пространственные сигналы от стен, окружающих бассейн.
    3. Перемешайте позиции платформы и начать позиции для каждой крысы в ​​каждой группе. Все позиции платформы и начала должна быть представлена ​​для каждой экспериментальной группы.
    4. Поместите платформу в обозначенном районе платформы и определить в программном обеспечении отслеживания.
    5. Поместите Растворим в воде вдоль стенки бассейна при Тон назначил стартовую позицию и быстро выйти из поля зрения крысы.
    6. Есть другой экспериментатор запустить программное обеспечение для отслеживания, как только крыса находится в воде. Таймер должен начать отсчет от 0 до на отслеживания программного обеспечения.
    7. После того, как крыса достигает платформы, есть другой экспериментатор остановить судебный процесс на компьютере. Если крыса прыгает с платформы, судебный процесс продолжается. Перед получением крысу, позволяют крысы сидеть на платформе в течение 15 сек.
    8. Получить крыса из пула с помощью основания хвоста и держать на полотенце покрытой рукой или пусть крыса забираются на портативном поверхности.
    9. Проверьте положение платформы для следующей крысы и перемещения платформы в соответствующей области, определенной в программе слежения.
    10. Повторите шаги 3.5.4-3.5.9 для следующих 3 испытаний. Там должно быть между пробный интервал 15 мин.
    11. Возвращение крыс в их родную клетку под нагревательной лампой в течение по крайней мере 10 минут после FINA каждой крысыл подают реплики обучения суда.
    12. Продолжить тот же протокол для 2-й день обучения подают реплики.
  6. Анализ данных
    Примечание: Время, проведенное в зонах, расстояние, пройденное в зонах, средняя скорость, количество записей в зоны и время до первого въезда в зоны часто используются.
    1. Анализировать время и расстояние, чтобы добраться до зоны платформы и среднюю скорость в день пространственного и обучения отдельно подают реплики. Для экспериментов с зондами, анализировать латентность первой записи в целевую зону в качестве исходного времени или изменения в процентах от зонда 1 до зонд 2.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Поведенческие задачи, описанные были использованы для демонстрации влияния инсульта в качестве APP21 трансгенной крысиной модели болезни Альцгеймера. Сочетание инсульта и трансгена APP21, как ожидается, приведет к большему дефициту двигателя в пораженных конечностей, а также к усилению нарушения памяти.

Задача цилиндра оценивали валовой функции передней конечности двигателя и представлена ​​как использование пораженной передне...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Сочетание инсульта и приводит к болезни Альцгеймера в очень различных поведенческих патологий, которые могут повлиять как двигатель и когнитивные функции в зависимости от тяжести состояния каждого. Таким образом, необходимо использовать разнообразные поведенческие задачи, чтобы определить отдельные вклады этих условий, а также дают некоторое представление о комбинированную и потенциально интерактивных эффектов в коморбидными состоянии. Представленные данные показывают три экономически эффективным, эффективный по времени...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих финансовых интересов.

Acknowledgements

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Эта работа стала возможной благодаря финансированию Канадского института исследований в области здравоохранения (CIHR), и авторы хотели бы поблагодарить CIHR за их финансовую поддержку.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
ЦилиндрWestern UniversityPlexiglas Cylinder
Диаметр цилиндра: 23 см
Высота цилиндра: 40 см
Высота платформы: 30 см
Длина зеркала: 35 см
Ширина зеркала: 26,5 см
Это было сделано специально для нашей лаборатории. Пожалуйста, свяжитесь с выбранным вами производителем для разработки этого продукта.
Ручная видеокамераJVCGZ-E200
Видеокамера ШтативSlikF163
AM / FM Часы РадиоSylvaniaSCR1388
Белая доскаWalmartШирина: 71,12 см< > Высота: 55,88 смИх можно приобрести в любом магазине (например, Walmart, университетские книжные магазины)
Маркер для сухого стиранияExpo ExpoDry-стираемый Оригинал МаркерИх можно приобрести в любом магазине (например, в Walmart, книжных магазинах университета)
Деревянная балкаRonaPly
Ширина: 2 см
Длина: 100 см
VWR Лабораторная лента общего назначенияVWR Intl.89097-920
iMovie '11Apple Inc.Версия 9.0.9 (1795)Эта версия использовалась в этой рукописи, но можно использовать любую другую версию iMovie или программное обеспечение для редактирования видео.
Бассейн Morris Water Maze с платформойStoelting Co.60136/60035Это не совсем те продукты, которые используются в видео, но по сути они идентичны.
Platform Cue-Используемый платформенный кий был создан с использованием небольшой металлической подставки и белого сферического поролонового шара. Скорее всего, их можно приобрести в любом магазине с материалами для обустройства дома (например, в Walmart, Rona и т. д.).
Основные 71-дюймовые торшерыWalmartHW-F0377SLV
ANY-Maze Программное обеспечение для отслеживания поведенияStoelting Co.60000Существуют комплекты ANY-maze®, которые включают в себя камеру с компьютером или без него и аксессуары.
Компактная видеокамераLogitechV-U0023
НоутбукHewlett-PackardHP Pavilion dv6 НоутбукОсобенности: AMD A6-3420M APU с графикой Radeon HD 1.50 ГГц, 6.00 ГБ ОЗУ, 64-битная операционная система.
Нетоксичная акриловая краска AmericanaDecoArtDAO67-9Ее можно заказать на сайте DecoArt или приобрести в магазине у розничных продавцов DecoArt.
Плакатная доскаWalmartPA-1961

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Auld, D., Kornecook, T., Bastianetto, S., Quirion, R. Alzheimer's disease and the basal forebrain cholinergic system: relations to β-amyloid peptides, cognition, and treatment strategies. Prog Neurobiol. 68 (3), 209245(2002).
  2. Huang, Y., Mucke, L. Alzheimer Mechanisms and Therapeutic Strategies. Cell. 148 (6), (2012).
  3. Querfurth, H., LaFerla, F. Alzheimer's disease. New Engl J Med. 362 (4), 329-344 (2010).
  4. Karran, E., Mercken, M., Strooper, B. The amyloid cascade hypothesis for Alzheimer's disease: an appraisal for the development of therapeutics. Nat Rev Drug Discov. 10 (9), 698-712 (2011).
  5. Akiyama, H., et al. Inflammation and Alzheimer's disease. Neurobiol Aging. 21 (3), (2000).
  6. Butterfield, D., Drake, J., Pocernich, C., Castegna, A. Evidence of oxidative damage in Alzheimer's disease brain: central role for amyloid β-peptide. Trends Mol Med. 7 (12), 548554(2001).
  7. Kalaria, R. The role of cerebral ischemia in Alzheimer's disease. Neurobiol Aging. 21 (2), 321-330 (2000).
  8. Selkoe, D. Alzheimer's disease: genes, proteins, and therapy. Physiol Rev. 81 (2), 741-766 (2001).
  9. Snowdon, D. A., et al. Brain infarction and the clinical expression of alzheimer disease: The nun study. JAMA. 277 (10), 813(1997).
  10. Clarke, J., et al. Overexpression of APP provides neuroprotection in the absence of functional benefit following middle cerebral artery occlusion in rats. Eur J Neurosci. 26 (7), 1845-1852 (2007).
  11. Whitehead, S., Hachinski, V., Cechetto, D. Interaction Between a Rat Model of Cerebral Ischemia and β-Amyloid Toxicity Inflammatory Responses. Stroke. 36 (1), 107-112 (2005).
  12. Agca, C., et al. Development of transgenic rats producing human β-amyloid precursor protein as a model for Alzheimer's disease: Transgene and endogenous APP genes are regulated tissue-specifically. BMC Neuroscience. 9 (1), 28(2008).
  13. Bayona, N. A., Gelb, A. W., Jiang, Z., Wilson, J. X., Urquhart, B. L., Cechetto, D. F. Propofol neuroprotection in cerebral ischemia and its effects on low-molecular-weight antioxidants and skilled motor tasks. Anesthesiology. 100 (5), 1151-1159 (2004).
  14. Langdon, K., Clarke, J., Corbett, D. Long-term exposure to high fat diet is bad for your brain: exacerbation of focal ischemic brain injury. Neuroscience. 182, 82-87 (2011).
  15. Brownlow, M., et al. Partial rescue of memory deficits induced by calorie restriction in a mouse model of tau deposition. Behav Brain Res. 271, 7988(2014).
  16. Halagappa, V., et al. Intermittent fasting and caloric restriction ameliorate age-related behavioral deficits in the triple-transgenic mouse model of Alzheimer's disease. Neurobiol Dis. 26 (1), (2007).
  17. Maalouf, M., Rho, J., Mattson, M. The neuroprotective properties of calorie restriction, the ketogenic diet, and ketone bodies. Behav Brain Res. 59 (2), (2008).
  18. Tillerson, J. L., et al. Forced limb-use effects on the behavioral and neurochemical effects of 6-hydroxydopamine. Neuroscience. 21 (12), 4427-4435 (2001).
  19. Sierksma, A., et al. Improvement of spatial memory function in APPswe/PS1dE9 mice after chronic inhibition of phosphodiesterase type 4D. Neuropharmacology. 77, (2013).
  20. D'Hooge, R., De Deyn, P. P. Applications of the Morris water maze in the study of learning and memory. Behav Brain Res. 36 (1), 60-90 (2001).
  21. Vorhees, C., Williams, M. Morris water maze: procedures for assessing spatial and related forms of learning and memory. Nat Protoc. 1 (2), 848-858 (2006).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Alzheimer Disease ModelStroke Rat ModelCylinder TaskBeam Walk TaskMorris Water MazeSpatial Learning AssessmentReference Memory TestingMotor Function EvaluationTransgenic Rat ModelBehavioral Paradigm

Related Articles