Method Article

Простой метод Автоматизированная твердофазной экстракции водных образцов для анализа иммунологических малых загрязнителях

DOI:

10.3791/53438

⸱

January 1st, 2016

 ,  ,  ,  ,  , 
1Centre Suisse d'Electronique et de Microtechnique, 2Department of Chemistry and Applied Biosciences, ETH Zurich, 3Department of Information Technology and Electrical Engineering, ETH Zurich

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Представлен протокол экстракции и предварительного концентрирования эстрадиола из проб воды с использованием автоматизированной и миниатюризированной системы.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Новый метод для извлечения твердой фазы (SPE) в пробах окружающей среды, водных предлагается. Разработанная прототип является экономически эффективным и удобным, а также позволяет выполнять быстрый, простой и автоматизированной SPE. Предварительно концентрированный раствор совместим с помощью иммунологического анализа, с содержанием низкой органическом растворителе. Описан метод для извлечения и предварительной концентрации естественного гормона 17 -эстрадиола в пробах воды 100 мл. С обращенной фазой НПП выполняется с октадецил-кремнезема сорбента и элюирование проводится с 200 мкл метанола 50% об / об. Элюент разбавляют добавлением ди-воды, чтобы снизить количество метанола. После подготовки вручную столбец SPE, общая процедура выполняется автоматически в течение 1 часа. В конце процесса, концентрация эстрадиола измеряется с использованием коммерческого энзим-связанного иммунного-сорбента анализа (ELISA). 100-кратное предварительно концентрация достигается и содержание метанола в только 10% объем / объем. Полное восстановление молекулыдостигаются с 1 нг / л шипами образцы деионизированной и синтетические морской воды.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Подготовка образца является важным шагом в любом аналитическом процессе. В частности, удаление матричных эффектов, уменьшения помех, и обогащение аналита необходимы для получения точных результатов и достичь низких пределов обнаружения. Эндокринные нарушения соединения (СЭД) имеют особый интерес в связи с их действием на живые организмы, даже когда присутствующие на очень низких уровней в окружающей среде. Естественный гормон эстрадиол 17β-присутствует на загрязнение воды ЕС Наблюдать список и склонны быть добавлены в список приоритетных веществ, регулируемых в рамках Рамочной директивы Европейской Водной. Твердофазная экстракция (ТФЭ) обычно применяется для анализа ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Примечание: Следующий протокол описывает SPE выполнены на 100 мл воды образца с C18 сорбента и элюирование 50% об / об метанол. Обогащенный образец разбавляют, чтобы достичь 10% об / об метанол перед анализом с твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA) комплект.

1. Подготовка реагентов

  1. Подготовка проб воды
    1. Перед любой другой стадии, фильтрации каждой выборки 100 мл воды с размером 0,2 мкм фильтров пор.
    2. Шип образца с требуемой концентрации разбавлением соответствующего объема раствора сравнения в объеме воды. Например, приготовить 100 мл пробы воды с 100 нг / л Е2 разбавлением 3,3 мкл контрольного раствора ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Воспроизводимость сорбента упаковки оценивали путем сушки и взвешивания пипеткой сорбента в стеклянных флаконах, и результат показан на рисунке 1. Воспроизводимость момент инъекции тестировали на образцах 100 мл, как показано на рисунке 2. Концентрация в начальной и предварительно Концентрированный шипами образцы определяется с использованием коммерческого ELISA комплекта для 17 -эстрадиола и показаны на рисунке 3.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Предложен новый способ получения проб воды с последующим анализом с помощью иммуноферментного анализа. Прибор позволяет выполнять извлечение твердой фазы в автоматизированном и удобный способ.

Фильтрация пробы воды до его введения в систему является критическим. Любые частицы, все еще присутствующие в растворе потенциально вызвать засорение жидкостного сети и препятствуют колонку SPE. Еще одним важным шагом является подготовка колонке SPE. Количество частиц в колонке решающее значение для до.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Авторам нечего раскрывать.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Эта работа финансировалась Седьмой рамочной программой Европейского Союза FP7/2007-2013 в рамках грантового соглашения No 265721. Авторы благодарят Институт безопасности пищевых продуктов RIKILT (NL) за поддержку в этом проекте.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Фильтрующая мембрана 0,2 мкм; m размер порMerck MilliporeGNWP04700Для фильтрации проб
Нейлоновая мембрана 11 μ m размер порMerck MilliporeNY1104700Для колонки SPE
Одноразовый биопсийный перфоратор 5 ммMedical Budget39302439
Nucleodur C18 ec Macherey Nagel713550.0150 μ m диаметр частиц
Синтетическая морская водаSigma AldrichSSWS500-500ML
МетанолVWR
17бета-эстрадиол стандартEnzo Life Science300 нг/мл
17бета-эстрадиол ИФА наборEnzo Life ScienceADI-900-00896 лунок, диапазон 30 - 3 000 нг/л

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Chang, H. S., Choo, K. H., Choi, S. J. The methods of identification, analysis and removal of endocrine disrupting compounds (EDCs) in water. J. Hazard. Matter. 172, 1-12 (2009).
  2. Azzouz, A., Souhail, B., Ballesteros, E.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Solid Phase ExtractionAutomated SPEWater Sample AnalysisImmunoassay CompatibilityEstradiol DetectionOctadecyl Silica SorbentMethanol ElutionELISA AnalysisEnvironmental MonitoringPollutant Pre concentration

Related Articles