Method Article

HSV-опосредованной Transgene экспрессия химерных конструктов для изучения поведенческой Функция GPCR гетеромеров у мышей

DOI:

10.3791/53717

⸱

July 9th, 2016

 ,  , 
1Department of Psychiatry, Icahn School of Medicine at Mount Sinai, 2Department of Neurology, Icahn School of Medicine at Mount Sinai, 3Friedman Brain Institute, Icahn School of Medicine at Mount Sinai, 4Department of Physiology and Biophysics, Virginia Commonwealth University Medical School

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

В данной статье описывается, как вводить вирусные векторы в лобной коре мыши, чтобы проверить поведенческие анализы, которые требуют GPCR гетеромерных образования.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Комплекс гетеромерных рецепторов между 5-HT2A и mGlu2 был вовлечен в некоторые поведенческие фенотипы в мышиных моделях психоза1,2. Следовательно, исследование структурных деталей взаимодействия между 5-HT2A и mGlu2, влияющих на поведение, связанное с шизофренией, представляет собой мощный инструмент трансляции. Как было показано ранее, реакция на подергивание головы (HTR) у мышей вызывается галлюциногенными препаратами, и эта поведенческая реакция отсутствует у мышей с нокаутом 5-HT2A (KO)3,4. Кроме того, путем условной экспрессии рецептора 5-HT2A только в коре головного мозга было продемонстрировано, что зависимые от рецептора 5-HT2A сигнальные пути на корковых пирамидальных нейронах достаточны для того, чтобы вызвать подергивание головы в ответ на галлюциногенныепрепараты. Наконец, было показано, что поведенческая реакция на подергивание головы, индуцированная галлюциногенами DOI и диэтиламидом лизергиновой кислоты (ЛСД), значительно снижена у мышей mGlu2-KO5. Эти данные свидетельствуют о том, что mGlu2, по крайней мере частично, необходим для 5-HT2A рецептор-зависимых психоз-подобных поведенческих эффектов, индуцированных ЛСД-подобными препаратами. Тем не менее, это не дает доказательств того, необходим ли рецепторный комплекс 5-HT 2A-mGlu2 для этого поведенческого фенотипа. Чтобы ответить на этот вопрос, были использованы конструкции вируса простого герпеса (ВПГ), экспрессирующие либо mGlu2, либо mGlu2ΔTM4N (химерная конструкция mGlu2/mGlu3, которая не образует рецепторный комплекс 5-HT2A-mGlu2) в лобной коре мышей mGlu2-KO.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Галлюциногены, такие как ЛСД, псилоцибин и мескалин вызывают значительные изменения в сознании человека, познания и эмоций 7-9. Инактивация серотонина 5-HT 2A рецепторов сигнализации либо генетических или фармакологических подходов вызывает заметно ослабляется поведенческие реакции на галлюциногены в обеих моделях грызунов 3,10 и человека 11. Несмотря на то, галлюциногены связывает другие подтипы рецепторов 8, рецептор 2A 5-НТ считается необходимым для уникальной поведенческой активности этих химических веществ.

Группа II метаботропных глутаматных рецепторов (то есть., MGlu2 и mGlu3) стали объектом пристального внимания в отношении молекулярного механизма галлюциногенов и их интегральной роли , лежащей в основе психоз 12. Ранее было показано, что у мышей, не имеющие экспрессии белка mGlu2 (mGlu2-KO мышей) не чувствительны к клеточных и поведенческих эффектов HALlucinogens 5. Кроме того , было предложено , что 5-НТ 2А и mGlu2 рецепторы образуют специфический гетеромерных комплекс , через который серотонин и глутамат лиганды модулировать образец сочетания белков G в живых клетках 1,2.

Конструктивно, трансмембранный (ТМ) домены 4 и 5 mGlu2 играют фундаментальную роль в формировании гетеромерного с 5-HT 2A рецепторов 5. Кроме того, дальнейшее исследование показало , что три остатка , расположенных на внутриклеточном конце TM4 из mGlu2 необходимы для формирования 5-HT 2A -mGlu2 гетерокомплекса рецепторов в живых клетках 6.

Основываясь на этих выводах , наблюдаемых в гетерологичных системах экспрессии, здесь мы опишем использование HSV-опосредованной экспрессии дикого типа mGlu2 и mGlu2 / mGlu3 химерных конструкций в лобной коре мышей mGlu2-KO , чтобы проверить , является ли гетеромерные образование между 5-HT 2A и mGlu2 необходимо дляповедение головы подергивание , индуцированный галлюциногенными агонистов рецептора 2A 5-HT.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Примечание: Все процедуры для животноводства и заботами были проведены в соответствии с регламентом Institutional Animal Care и использование комитета (IACUC) из Икан школы медицины на горе Синай. Обязательно используйте стерильные перчатки на протяжении всей процедуры.

1. Наркомания и Вирус Подготовка

  1. Лекарственный препарат
    1. Готовят 15,0 мл кетамина / ксилазина анестезию путем растворения 1,35 мл 100 мг / мл кетамина и 0,75 мл 20 мг / мл ксилазина в 12,9 мл 0,9% физиологического раствора. Тщательно перемешать раствор.
  2. Подготовка Вирус
    1. Клонирование mGlu2 и mGlu2ΔTM4N строит в бицистронный вирус простого герпеса (ВПГ) вектора следующие стандартные протоколы описаны ранее 6. Пакет вирусных частиц , как описано ранее 6,13,14. Замена остатков Ala-677 4.40, Ала-681 4,44 и 4,48 Ala685 в mGlu2 для Ser686 4.40, PhE690 4,44 и Gly-694 4,48 в mGlu3 (HA-mGlu2ΔTM4N) были описаны ранее 6.
      Примечание: Ранее было показано , что химерный конструкт HA-mGlu2ΔTM4N выражается в плазматической мембране с неповрежденными G белок-зависимой сигнализации 6.
    2. Храните вирусные векторы в -80 ° C, когда он не используется. Оттепели вирусный вектор на льду, а затем аликвоту в 10 мкл аликвоты. Для хирургической процедуры, держать на льду.

2. хирургия

  1. хирургия Подготовка
    1. Взвесьте мышь и впрыснуть мышь с соответствующей дозой кетамин / ксилазина коктейль (подробнее см 1.1.1).
    2. Проверьте мышь, чтобы увидеть, если правильно наркозом, выдавить ногу и хвост для ответа боли, если не в состоянии вызвать ответ, мышь правильно наркозом.
    3. Бритье головы мыши от основания черепа до кончика носа с помощью машинки для стрижки. Применить офтальмологических гель на аф мышиterward, чтобы предотвратить слепоту мыши.
    4. Загрузите каждый шприц на стереотаксической рамы. Затем наклонить перпендикулярную часть каждого плеча стереотаксической рамы таким образом, что они находятся на 10 градусов от нормали. Убедитесь, что оружие, наклонены таким образом, что иглы обращены друг к другу.
    5. Очистите каждый шприц, заполнив иглу с 70% этанола. Заполните иглу, по крайней мере три раза, чтобы убедиться, что шприц чист.
    6. После того , как игла была очищена, промойте иглу, заполнив иглу с двойным дистиллированной H 2 O. После того, как покраснел, заполнить каждую иглу с 1,3 мкл бидистиллированной H 2 O. Поверните поршень шприца , чтобы выпустить 0,3 мкл бидистиллированной H 2 O. Если шарики воды на кончике иглы, тщательно вытереть воду. Если ничего не выходит из шприца, толкать поршень полностью вниз, а затем повторить чистку шприца.
    7. После заполнения водой, а затем подтянуть шприц, заполняющий шприц с0,5 мкл воздуха.
    8. После того, как воздух и вода в шприц, аккуратно заполнить шприц с 1,3 мкл раствора вируса. В этот момент убедитесь, что общий объем в шприце составляет 2,8 мкл. Снова скрутить кончик шприца, чтобы выпустить 0,3 мкл вируса. Если жидкость попала в шарики на острие иглы, тщательно вытрите жидкость. Если ничего не выходит из шприца, толкать поршень полностью вниз, а затем повторить чистку шприца.
  2. Хирургия
    1. Подключите мышь к стереотаксической рамы, убедившись в том, чтобы настроить стереотаксической рамы, так что череп ровную горизонтальную поверхность. Применение povodine-йод на открытую кожу головы. Используя скальпель, сделайте сагиттальный разрез по средней линии черепа в открытой бритой области. Затем прикрепите Buret зажимы к коже в месте надреза, чтобы убедиться, что череп остается открытой.
    2. Используйте H 2 O 2 для растворения надкостницу , чтобы выставить швами из самыхчереп. Теперь, когда брегма и швы видны, не забудьте настроить стереотаксической рамы, чтобы убедиться, что череп является уровень.
    3. Совместите иглы кончики шприцы с темени и записывать координаты темени. Вычислить координаты, где иглы будут вставлены.
      1. Для плоскости Ростральная-Cauldal (RC), добавьте 1,6 мм к записанным координатам RC темени (+1.6 от брегмы). Для плоскости Спинной-вентральной (DV), вычесть 2,4 мм из записанных DV координат темени (-2,4 от брегмы).
      2. Наконец, для плоскости медиальной боковой (ML), добавьте 2,6 мм к записанным координатам ML темени (+2.6 от брегмы). Для всех координат не забудьте записать обе левые и правые координаты, так как это является двусторонним инъекции.
    4. Принесите иглы до нужных координат. Отметьте места, где иглы будут вставлены и с дрелью просверлить отмеченных областях.
    5. При помощи ватного наконечника аппликатора Wiпэ прочь любой избыток крови или костного фрагмента.
    6. Принесите иглы к черепу, где кончики игл прикасаясь к поверхности мозга. Затем опустите иглы до нужных координат медленно опуская их.
    7. После того, как иглы в нужных координат, медленно вводят содержимое шприца путем скручивания на поршень иглы 0,1 мкл в минуту в течение 5 мин (всего 0,5 мкл).
    8. После того, как инъекция была сделана оставить шприц в коре головного мозга в течение еще 5 мин.
  3. Заделывая / Уход
    1. Удалите иглы из коры головного мозга мыши постоянно и медленно. Затем удалите мышь от стереотаксической рамы.
    2. Применяют Цианоакрилат (кожная клей) к базовым лоскутов кожи от разреза, а затем с пинцетом захватить лоскуты кожи и поместить их вместе.
    3. Дайте цианакриловый высохнуть. Поместите мышь в клетке над грелку (грелку не является обязательным, если Surgскую люкс выдерживают при комнатной температуре 37 ° С - в противном случае нет необходимости). Обязательно поместите мышь на бумажное полотенце, чтобы убедиться, что постельное белье не прилипает к операционному полю.
    4. В зависимости от продолжительности хирургической процедуры, убедитесь, что мышей из анестезии в течение 30 - 60 мин после процедуры. После операции животное помещают в его собственную клетку и контролировали, пока она не станет сознательным, прежде чем вернуться к своей комнате, чтобы восстановить. Нет анальгетики не используются после операции, так как они могут изменить результаты наших экспериментов, изменяя некоторые из мозговых биохимических путей. Тем не менее, животные контролируются, пока они не будут восстановлены после анестезии в день операции и ежедневно после операции на признаки инфекции и оценки боли / дистресса.

Эксперимент 3. Руководитель Twitch Response

  1. Настроить
    1. Провести все поведенческие тестирование между 10:00 и 2:00 вечера, 2 - 3 дня после stereotaCTIC инъекции вирусных частиц.
    2. Растворите (±) -1- (2,5-диметокси-4-йодофенил) -2-аминопропана гидрохлорид (DOI) в 0,9% -ном солевом растворе до 2,0 мг / кг. Также готовят раствор 0,9% солевой.
    3. Приготовить домашнюю клетку (28 х 18 х 15 см) без каких-либо постельных принадлежностей и используя три-стручка, настроить камеру так, чтобы вид видеокамеры непосредственно над домашней клетки.
    4. Приучить мышей в комнате, по крайней мере 4 часа до начала эксперимента.
    5. Настройка видеокамеры для записи головы подергивание.
  2. эксперимент
    1. Установите камеру так, чтобы она находилась непосредственно над домашней клетки. Калибруйте камеру так, чтобы вся домашняя клетка находится в поле зрения.
    2. Взвесьте мышь и впрыснуть мышь внутрибрюшинно с соответствующей дозой либо 0,9% физиологического раствора или DOI (0,01 мл / г). Примечание: Если мышь весит 25 грамм, администрировать дозы до общего объема 0,25 мл.
    3. Поместите каждую мышь обратно в их родной клетке Foг 10 мин. Через 10 минут, место мыши в центре пустого дома клетку и проверить, что нет белых пятен в поле зрения камеры. Нажмите запись на видеокамере. Покинуть комнату.
      Примечание: движения мыши и различные поведенческие реакции в них (... Голова дергаться, ухо царапин и т.д. Пожалуйста , обратитесь к справочной таблице 1 данных из Gonzalez-Maeso и др 2007 для полного списка поведенческих реакций , индуцированных DOI) 3, будет записываться в течение 30 минут. Поэтому, важно нет белых пятен в поле зрения записано.
    4. Через 30 мин остановки записи на видеокамере и место мыши обратно в оригинальной домашней клетке. Повторите этот процесс для каждой мыши.
  3. Обзор
    1. У каждого обзора рефери ленты закрывать глаза на экспериментальных условиях мыши (то есть., Лекарственные средства , используемые во время головы дергаются эксперимент или вирус , используемый при внутричерепной инъекции)). Ручная запись каждого голова дергается через вХаут видео.
      Примечание: Head-подергивание определяется как быстрое движение трясущейся головой, проведенного мыши (дополнительного видео).
    2. Для каждой мыши, в среднем окончательный ответ HTR из трех сумм слепых судей. Тогда группа эти значения условия эксперимента и провести статистический анализ (то есть., Т-критерия или ANOVA).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Предыдущие результаты показывают , что руководитель сокращающихся мышиный поведенческую реакцию надежно и энергично вызвавшую галлюциногенами, и он отсутствует в 5-HT 2A мышей -ko 3. Кроме того, было показано , что ответ голова сокращающихся вызванное галлюциногенными 5-HT 2A агонисты DOI и LSD было значительно снижено в mGlu2-KO мышей 5. Тем не менее, хотя предыдущие результаты убедительно показывают , что 5-HT 2A и mGlu2 собираются...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Вместе с предыдущими результатами в mGlu2-KO мышей 5, результаты с mGlu2 и mGlu2 / mGlu3 химерных конструкций , которые не образуют рецептор 2А -mGlu2 комплекс 5-НТ в культивируемых клетках позволяют предположить , что 5-HT 2A -mGlu2 гетеромерный комплекс рецептор мыши лобная кора головного мозга необходима , чтобы вызвать поведение головы сокращающихся с галлюциногенными агонисты рецептора 2A 5-HT LSD-подобный. Ограничение этого метода состоит в том, что он не измеряет тесную...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Авторам нечего раскрывать.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

NIH R01MH084894 участвовал в финансировании данного исследования. Мы хотели бы поблагодарить д-ра. Ясмин Херд и Скотт Руссо на горе Синай школы медицины для донорства мышей и использование их хирургии и поведения объектов во время съемок этой работы.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
mGlu2 бицитронный вирус простого герпеса (ВПГ) вектор MIT CoremGlu2 и mGlu2DTM4N были субклонированы в бицистронный вектор вируса HSV-GFP p1005+ HSV, экспрессирующий GFP под контролем промотора ЦМВ. Вирусные частицы были произведены с помощью Viral Core Facility в Институте Макговерна (MIT). Для получения дополнительной информации, пожалуйста, свяжитесь с директором, доктором Рэйчел Нив (rneve@mit.edu)
mGlu2Δ TM4N вектор бицитронного вируса простого герпеса (ВПГ) MIT CoremGlu2 и mGlu2DTM4N были субклонированы в бицистронный вектор вируса HSV-GFP p1005+ HSV, экспрессирующий GFP под контролем промотора ЦМВ. Вирусные частицы были произведены с помощью Viral Core Facility в Институте Макговерна (MIT). Для получения дополнительной информации, пожалуйста, свяжитесь с директором, доктором Рэйчел Нив (rneve@mit.edu)
GFP вектор бицитронного вируса простого герпеса (ВПГ) MIT CoremGlu2 и mGlu2DTM4N были субклонированы в бицистронный вектор вируса HSV-GFP p1005+ HSV, экспрессирующий GFP под контролем промотора ЦМВ. Вирусные частицы были произведены с помощью Viral Core Facility в Институте Макговерна (MIT). Для получения дополнительной информации, пожалуйста, свяжитесь с директором, доктором Рэйчел Нив (rneve@mit.edu)
Xylazine LloydList no. 4811-20ml, NADA #139-236, код(ы) NDC: 61311-481-101,35 мл кетамина (100 мг/мл) + 0,75 мл ксилазина (20 мг/мл) разведены в 12,0 мл 0,9% физиологического раствора
кетамина VedcoKetaVed-10ml, NADA #200-029, NDC Код(ы): 50989-161-061,35 мл кетамина (100 мг/мл) + 0,75 мл ксилазина (20 мг/мл) разведены в 12,0 мл 0,9% физиологического раствора
Офтальмологический гельFisher ScientificNC0550805
Burret зажимыFisher ScientificNC9268369
Feather хирургическое лезвиеFisher ScientificNC9032736
Hydrogen ПероксидФишер Сайентифик19-898-919 
Шприц HamiltonFisher Scientific14815203
Hamilton™ Съемные иглы с малой ступицей (33 Ga)Аккумуляторная14816206
Дермальный адгезив Fisher Scientific NC9089241 дермальный адгезив DermabondFisher ScientificNC0690470
-1-(2,5-диметокси-4-йодофенил)-2-аминопропана гидрохлорид (DOI)Sigma-Aldrich42203-78-1Растворен в 0,9% физиологическом растворе до концентрации 2,0 мг/кг
микродрель Fisher Scientific (±)

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Fribourg, M., et al. Decoding the Signaling of a GPCR Heteromeric Complex Reveals a Unifying Mechanism of Action of Antipsychotic Drugs. Cell. 147 (5), 1011-1023 (2011).
  2. Gonzalez-Maeso, J., et al. Identification of a serotonin/glutamate receptor complex implicated in psychosis. Nature. 452 (7183), 93-97 (2008).
  3. Gonzalez-Maeso, J., et al. Hallucinogens Recruit Specific Cortical 5-HT(2A) Receptor-Mediated Signaling Pathways to Affect Behavior. Neuron. 53 (3), 439-452 (2007).
  4. Gonzalez-Maeso, J., et al. Transcriptome fingerprints distinguish hallucinogenic and nonhallucinogenic 5-hydroxytryptamine 2A receptor agonist effects in mouse somatosensory cortex. J Neurosci. 23 (26), 8836-8843 (2003).
  5. Moreno, J. L., Holloway, T., Albizu, L., Sealfon, S. C., Gonzalez-Maeso, J. Metabotropic glutamate mGlu2 receptor is necessary for the pharmacological and behavioral effects induced by hallucinogenic 5-HT2A receptor agonists. Neurosci Lett. 493 (3), 76-79 (2011).
  6. Moreno, J. L., et al. Identification of Three Residues Essential for 5-HT2A-mGlu2 Receptor Heteromerization and its Psychoactive Behavioral Function. J Biol Chem. 287, 44301-44319 (2012).
  7. Geyer, M. A., Vollenweider, F. X. Serotonin research: contributions to understanding psychoses. Trends Pharmacol Sci. 29 (9), 445-453 (2008).
  8. Nichols, D. E. Hallucinogens. Pharmacol Ther. 101 (2), 131-181 (2004).
  9. Hanks, J. B., Gonzalez-Maeso, J. Animal models of serotonergic psychedelics. ACS Chem Neurosci. 4 (1), 33-42 (2013).
  10. Fiorella, D., Rabin, R. A., Winter, J. C. Role of 5-HT2A and 5-HT2C receptors in the stimulus effects of hallucinogenic drugs. II: Reassessment of LSD false positives. Psychopharmacology (Berl). 121 (3), 357-363 (1995).
  11. Vollenweider, F. X., Vollenweider-Scherpenhuyzen, M. F., Babler, A., Vogel, H., Hell, D. Psilocybin induces schizophrenia-like psychosis in humans via a serotonin-2 agonist action. Neuroreport. 9 (17), 3897-3902 (1998).
  12. Moreno, J. L., Sealfon, S. C., Gonzalez-Maeso, J. Group II metabotropic glutamate receptors and schizophrenia. Cell Mol Life Sci. 66 (23), 3777-3785 (2009).
  13. Kurita, M., et al. HDAC2 regulates atypical antipsychotic responses through the modulation of mGlu2 promoter activity. Nat Neurosci. 15 (9), 1245-1254 (2012).
  14. Kurita, M., et al. Repressive Epigenetic Changes at the mGlu2 Promoter in Frontal Cortex of 5-HT2A Knockout Mice. Mol Pharmacol. 83 (6), 1166-1175 (2013).
  15. Rives, M. L., et al. Crosstalk between GABAB and mGlu1a receptors reveals new insight into GPCR signal integration. Embo J. 28 (15), 2195-2208 (2009).
  16. Milligan, G. The Prevalence, Maintenance and Relevance of GPCR Oligomerization. Mol Pharmacol. (84), Epub ahead of print 158-169 (2013).
  17. Ferre, S., et al. G protein-coupled receptor oligomerization revisited: functional and pharmacological perspectives. Pharmacol Rev. 66 (2), 413-434 (2014).
  18. Gonzalez-Maeso, J. GPCR oligomers in pharmacology and signaling. Mol Brain. 4 (1), 20(2011).
  19. Gonzalez-Maeso, J. Family a GPCR heteromers in animal models. Front Pharmacol. 5, 226(2014).
  20. Dragulescu-Andrasi, A., Chan, C. T., De, A., Massoud, T. F., Gambhir, S. S. Bioluminescence resonance energy transfer (BRET) imaging of protein-protein interactions within deep tissues of living subjects. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 108 (29), 12060-12065 (2011).
  21. Calebiro, D., et al. Single-molecule analysis of fluorescently labeled G-protein-coupled receptors reveals complexes with distinct dynamics and organization. Proc Natl Acad Sci U S A. 110 (2), 743-748 (2013).
  22. Fonseca, J. M., Lambert, N. A. Instability of a class a G protein-coupled receptor oligomer interface. Mol Pharmacol. 75 (6), 1296-1299 (2009).
  23. Hern, J. A., et al. Formation and dissociation of M1 muscarinic receptor dimers seen by total internal reflection fluorescence imaging of single molecules. Proc Natl Acad Sci U S A. 107 (6), 2693-2698 (2010).
  24. Hlavackova, V., et al. Sequential inter- and intrasubunit rearrangements during activation of dimeric metabotropic glutamate receptor 1. Sci Signal. 5 (237), 59(2012).
  25. Irannejad, R., et al. Conformational biosensors reveal GPCR signalling from endosomes. Nature. 495 (7442), 534-538 (2013).
  26. Calebiro, D., Nikolaev, V. O., Persani, L., Lohse, M. J. Signaling by internalized G-protein-coupled receptors. Trends Pharmacol Sci. 31 (5), 221-228 (2010).
  27. Celada, P., Puig, M. V., Diaz-Mataix, L., Artigas, F. The hallucinogen DOI reduces low-frequency oscillations in rat prefrontal cortex: reversal by antipsychotic drugs. Biol Psychiatry. 64 (5), 392-400 (2008).
  28. Béïque, J. -C., Imad, M., Mladenovic, L., Gingrich, J. A., Andrade, R. Mechanism of the 5-hydroxytryptamine 2A receptor-mediated facilitation of synaptic activity in prefrontal cortex. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 104 (23), 9870-9875 (2007).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

GPCR HeteromersHSV Transgene ExpressionFrontal Cortex InjectionHead Twitch ResponseStereotactic SurgerymGlu2 Knockout Mice5 HT2A ReceptorBehavioral PhenotypesImmunocytochemistryWestern Blot

Related Articles