Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

В Vivo Исследовании антимикробной Синяя Светотерапии для Полирезистентного Acinetobacter baumannii Ожог инфекции с помощью биолюминесценции визуализации

8.8K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/54997

⸱

28 апреля 2017 г.

 ,  ,  ,  ,  , 
1Wellman Center for Photomedicine, Massachusetts General Hospital, Harvard Medical School, 2Department of Medical Oncology, Beijing Institute of Translational Medicine, Chinese Academy of Sciences, 3Cancer Center, Aviation General Hospital, Beijing, 4Infectious Disease Service, Brooke Army Medical Center

В этой статье

Краткое содержание

Инфекции, вызванные штаммами бактерий с множественной лекарственной устойчивостью (MDR), стали серьезной угрозой для общественного здравоохранения, что требует разработки альтернативных методов лечения. Мы представляем протокол для оценки эффективности антимикробной терапии синим светом (aBL) инфекций MDR Acinetobacter baumannii при ожогах мышей с помощью биолюминесцентной визуализации.

Аннотация

Ожог инфекция продолжает оставаться важной причиной заболеваемости и смертности. Растущее появление множественных лекарственной устойчивости (МЛ) бактерий привело к частым неудачам традиционного лечения антибиотиков. Альтернативные терапевтические срочно необходимы для борьбы с МЛ бактерий.

Инновационный подход, не антибиотик, противомикробный синий свет (ABL), показал многообещающую эффективность против МЛ-инфекции. Механизм действия ABL пока еще недостаточно хорошо изучен. Это обычно выдвинута гипотеза , что в природе эндогенных фотосенсибилизирующих хромофоров бактерий (например, железа , свободные порфирины, флавины и т.д.) возбуждается ABL, который в своей очереди , производит цитотоксические активные формы кислорода (ROS) через фотохимический процесс.

В отличие от другого света на основе антимикробного подхода, противомикробное фотодинамическая терапия (APDT), ABL терапия не требуют участия экзогенного photosensitizэ. Все, что нужно, чтобы вступить в силу является облучением синего света; Поэтому, это просто и недорого. В ABL рецепторы эндогенные клеточные фотосенсибилизаторов в бактериях, а не ДНК. Таким образом, ABL, как полагают, значительно менее генотоксичен к клеткам-хозяевам, чем ультрафиолетового-С (УФС) облучения, которое непосредственно вызывает повреждение ДНК в клетках-хозяевах.

В этой статье мы приводим протокол для оценки эффективности терапии ABL для MDR Acinetobacter baumannii инфекций в мышиной модели ожоговой травмы. При использовании сконструированного биолюминесцентном штамма, мы смогли неинвазивно контролировать степень заражения в режиме реального времени в живых животных. Этот метод также является эффективным инструментом для мониторинга пространственного распределения инфекций у животных.

Введение

Ожог инфекции, которые часто сообщалось из - за термических повреждений кожных, по- прежнему является важной причиной заболеваемости и смертности 1. Управления ожоговых инфекций еще более скомпрометированы увеличивающегося появления множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ) штаммов бактерий 2 в связи с массовым применением антибиотиков. Одним из важных MDR грамотрицательные бактерии Acinetobacter baumannii, который , как известно, связано с недавними боевыми ранами и устойчив к воздействию практически всех доступных антибиотиков 3. Наличие биопленок на травмированных очагах было сообщено 4, 5 и , как полагает, усугубить толерантность к антибиотикам и иммунной защите 6, 7, вызывая хронические инфекциям 8, 9. Таким образом, существует прессовог потребность в разработке альтернативных методов лечения. В недавно объявленной Национальной стратегии по борьбе с устойчивыми к антибиотикам бактерий, развитие альтернативных терапевтических антибиотикам было отмечено как действие со стороны правительства Соединенных Штатов 10.

Легкие на основе противомикробные подходы, как указано в названии, требует облучения светом с или без других агентов. Эти подходы включают в себя антимикробной фотодинамической терапии (APDT), ультрафиолет-С (УФС) облучение, и противомикробное синий свет (ABL). В предыдущих исследованиях, они показали многообещающую эффективность в уничтожении MDR бактериальных штаммов 11, 12, 13. Среди трех легких подходов , основанный, ABL привлекает все большее внимание в последние года из - за его собственные антибактериальные свойства без применения фотосенсибилизаторов 14. В COMPARисоном к APDT, ABL предполагает использование только света, в то время как APDT требует сочетания света и фотосенсибилизатора. Поэтому, ABL является простым и недорогим 14. По сравнению с УФС, ABL , как полагают , будет намного меньше цитотоксических и генотоксичен к клеткам - хозяевам 15.

Целью данного протокола является исследование эффективности ABL для лечения ожоговых инфекций , вызванных МЛУ А. baumannii в мышиной модели. Мы используем биолюминесцентные патогенные бактерии разрабатывать новые модели мышей ожоговых инфекций, которые позволяют неинвазивный мониторинг бактериальной нагрузки в режиме реального времени. По сравнению с традиционным методом отбора проб жидкости тела / ткани и последующего покрытия и колонии подсчета 16, этот метод дает точные результаты. Процесс отбора проб ткани может ввести другой источник погрешности эксперимента. Поскольку интенсивность свечения бактерий линейно пропорциональна соот- ветствоватьзапруживании бактериальных КОЕГО 17, мы можем измерить непосредственно выживание бактерий после определенной дозы облучения света. Контролируя бактериальной нагрузки в живых животных, получавших светолечение в режиме реального времени, кинетика бактериального убийства могут быть охарактеризованы с использованием значительно меньшего числа мышей.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

1. Подготовка бактериальной культуры

  1. Добавить 7,5 мл Brain Heart Infusion (BHI) среда к 50 мл центрифужной пробирки. Семенной А. baumannii клеток в среде BHI , а затем инкубировать А. baumannii культуры в орбитальном инкубаторе (37 ° С) в течение 18 часов.
  2. Центрифуга культуры клеток при 3500 х г в течение 5 мин, удалить супернатант, и мыть гранул в фосфатно-солевом буфере (PBS).
  3. Повторные приостановить гранулы бактерий в свежей PBS и тщательно пипетка суспензии.
  4. Собрать 100 мкл бактериальной суспензии и сделать разведение 1:10 с использованием свежих PBS.
  5. Передача разбавление до 1,5 мл полу-микро кювету и измеряют оптическую плотность (OD) при длине волны 600 нм (OD 600 нм).
  6. Вычислить OD 600 нм исходного (неразбавленном) виде суспензии в PBS в соответствии с измеренной OD 600 нм величины разбавления и коэффициент разбавления (10).
  7. Отрегулировать-йе оригинальные суспензии в PBS до OD 600 нм = 0,6 ( что соответствует плотности клеток 10 8 КОЕ / мл).

2. Модель мыши ожоговой инфекции , вызванной Биолюминесцентный A. baumannii

  1. Использование взрослых самок мышей BALB / с в возрасте 7-8 недель и весом 17-19 г. Разрешить мышей, чтобы акклиматизироваться в лабораторных условиях в течение по крайней мере 3 дней до начала эксперимента. Поддерживать мышей в течение 12 ч свет / темнота цикла при комнатной температуре 21 ℃ и дать им пищу и воду без ограничений.
  2. Обезболить мышей с внутрибрюшинной инъекцией кетамина-ксилазином коктейля (100 мг / кг - 20 мг / кг). Прикоснувшись к palpebra каждой мыши с помощью ватного тампона; отсутствие глазного рефлекса предполагает соответствующую глубину анестетика. Закройте глаза мыши с ветеринаром мазью, чтобы предотвратить глаза от сухости во время анестезии.
  3. Бритье мышей на спине, чтобы выставить как можно больше кожи, как это возможно с помощью 50 лезвие машинки для стрижки волос.
  4. Поместите крышку на 35 мм чашку Петри под брюшком мышей, чтобы держать их спинами в относительно горизонтальном положении.
  5. Кипение вода в 250-мл стакана (80% полный) с использованием 10" х 10" , 220 В переменном токе конфорки. Погружают медный блок (1 см в поперечном сечении х 1 см) в химическом стакане до теплового равновесия с водой, пока не будет достигнута. Термическая уравновешивания обычно занимает <5 мин и обозначается повторным кипячением воды в химическом стакане.
  6. До создания ожогов, администрировать преимущественные анальгетики (подкожную инъекцию 0,1 мг / кг бупренорфина) для облегчения боли.
  7. Через десять минут после того, как преимущественных анальгетиков, слегка нажмите на медную блок нагревают до бритой области на задней части мышей в течение 7 секунд, чтобы вызвать ожог раны.
    Примечание: Для того, чтобы избежать тепловой травмы работающего персонала, износ термостойких перчаток при выполнении процедуры записи.
  8. Администрирование 0,5 мл стерильного физиологического раствора через subcutaneouинъекции s, чтобы предотвратить обезвоживание.
  9. Через пять минут после индукции термической травмы, инокуляции 50 мкл бактериальной суспензии , содержащей 5 × 10 6 КОЕ в PBS на ожоги мыши с помощью пипетки. При перемещении стерильного ватного тампона в зигзагообразном движении по коже, намазать аликвот на ожогах, чтобы распределить бактериальные клетки в обожженной области настолько равномерно, насколько это возможно.
  10. Сразу же после бактериальной инокуляции, выполняет визуализацию биолюминесценции для инфицированных ожогов, как описано в разделе 4.
  11. Поместите мышей на водяной нагреваемый хирургической кровати (37 ° C, область восстановления) до тех пор, пока у мышей полностью извлекают из анестезии. Дом мыши с максимальным числом 5 в клетку в биологической безопасности уровня 2 животных комнаты.
  12. Администрирование анальгетиков (подкожная инъекция 0,1 мг / кг бупренорфина) два раза в день в течение первых трех дней после ожога.

3. Антимикробная Синий свет терапия для A. & #160; baumannii инфекции у мышей

  1. Начать ABL терапии в течение 24 ч после бактериального заражения.
  2. Используйте светоизлучающий диод (СИД) с пиковой эмиссии при 415 нм для облучения ABL. Смонтировать светодиод на радиаторе , чтобы предотвратить тепловое воздействие на облученной области у мышей 18. Закрепить светодиод оптического опорного стержня с зажимом разъемов, чтобы индикатор для перемещения вверх и вниз.
  3. Включите питание / счетчика энергии и нажмите на кнопку длины волны, чтобы выбрать 415 нм. Сброс счетчика мощности / энергии для вычитания фона (окружающего света).
  4. Перенесите измеритель мощности / энергии прямо под светодиодом. Надевайте голубой свет защитные очки. Включите свет СИД и отрегулировать расстояние между светодиодом отверстием (объектив, который сходится свет от светодиода) и датчиком света (2 см в диаметре) измерителя мощности / энергии так, что световое пятно покрывает всю площадь датчик освещенности.
  5. Тщательно настроить светодиодный драйвер и записать чтение Poweг / счетчик энергии. Вычислить освещенности в соответствии с чтением: облученность = Чтение (Ш) / Площадь (см 2). Регулировка освещенности светодиода до 100 мВт / см2, настраивая светодиодный драйвер.
  6. Выключите светодиод. Измерьте расстояние между СИД диафрагмы и датчика света измерителя мощности / энергии.
  7. Обезболить мышей с внутрибрюшинной инъекцией кетамина-ксилазином коктейля (100 мг / кг - 20 мг / кг). Отсутствие рефлекса глазного предполагает соответствующую глубину анестетика.
  8. Случайным разделить мышей в ABL-обработанной группы (п = 10) и необработанной контрольной группы (n = 10).
  9. Для ABL-обработанной группы, покрывают глаза мышей с алюминиевой фольгой, чтобы избежать чрезмерного воздействия света. Поместите ожоги мышей непосредственно под светодиодом, с крышкой чашки Петри 35 мм под живот мыши, чтобы держать их спины в горизонтальном положении.
  10. Заменить измеритель мощности / энергию, упомянутый в шаге 3.5 с помощью мыши на квадратную чашку дишиллинг Отрегулируйте высоту мыши обратно в положение, в котором расстояние между светодиодом отверстием и поверхностью ожога мышей равно, что между светодиодом отверстием и уровнем светового датчика силовым / счетчиком энергии (как описано на стадии 3,5).
  11. Облучают инфицированные ожоги при освещенности 100 мВт / см 2. Не Deliver ABL в дозах 72 Дж / см 2 до общей дозы 360 Дж / см 2 достигается (например, 0, 72, 144, 216, 288 и 360 Дж / см 2). После каждой дозы света, выполняет визуализацию биолюминесценции для мышей, как описано в разделе 4.
  12. Для необработанной контрольной группы, выполняет биолюминесценцию визуализацию ожогов мыши, как описано в разделе 4, используя те же временные интервалы, как используемые для ABL-обработанной группы.
  13. Перед восстановлением мышей, мышей поместить на воде нагреваемого хирургической кровати, чтобы предотвратить потерю тепла и гипотермии. Обратите внимание на активность и глазной рефлекс мышей до выздоровления. После того, как гое восстановление мышей, дом их 2-3 в клетке.
  14. После того, как ABL терапии, выполняют визуализацию биолюминесценции, как описано в Разделе 4, ежедневно в течение первых 3 дней, а затем в разные дни, чтобы следить за временной био-бремя инфекций у мышей.

4. Биолюминесценция Визуализация инфекций у мышей

  1. Изображение мышей с использованием системы визуализации с низким уровнем света , который включает в себя усиленную камеру прибора с зарядовой связью, контроллер камеры, образец камеру, и процессор 19 изображения.
  2. Обезболить мышей с внутрибрюшинной инъекцией кетамина-ксилазином коктейля (100 мг / кг - 20 мг / кг). Прикоснувшись к глазным мышей с помощью ватного тампона; отсутствие глазного рефлекса предполагает соответствующую глубину анестетика.
  3. Запустите программное обеспечение живого изображения. В панели управления, которая появляется, нажмите кнопку Initialize. Подождите, пока цвет коробки температура не станет зеленым, указывая, что температура на стадиив камере образца достигла 37 ° C.
  4. Поместите мышей на стадии (37 ° C) в камере образца системы формирования изображения, с инфицированными ожогами непосредственно под камерой.
    Примечание: биолюминесценции бактерий может уменьшиться, если ожоги становятся сухими. Поэтому рекомендуется увлажнять ожоги мыши с PBS, прежде чем визуализации.
  5. В панели управления, поставьте галочку рядом с «люминесценцией.» Выберите «Автоматическую экспозицию», так что время экспозиции для получения изображения будет оптимизировано с помощью программного обеспечения живого изображения на основе интенсивности биолюминесценции.
  6. Выберите «C» из «поля зрения» в раскрывающемся списке. Выберите опцию «Сканирование в середине диапазона», чтобы программа определения фокусного расстояния. Поставьте галочку рядом с Overlay.
  7. Нажмите «Приобретать», чтобы захватить изображение. В поле "Edit Image Label", нажмите кнопку "OK"; «Окно изображения» и «Toll Palette» появится.
  8. Настройка параметров автоматического ROI для автоматического выбора.
  9. Количественно интенсивность биолюминесценции как относительные единицы люминесценции (RLUS) и отображать биолюминесценции в ложном цветовой гамме , начиная от розового (наиболее интенсивных) до синего ( не менее интенсивного) 19, 20.
  10. Вычислить фракцию выживаемости бактерий в ожогах мыши при различных моментов времени, основанные на анализе интенсивности биолюминесценции. Фракция выживаемости бактерий в данный момент времени = интенсивность биолюминесценции измеряется в этот момент времени / интенсивность биолюминесценции измеряется непосредственно перед воздействием ABL 17.

5. Эвтаназия мышей

  1. Конечные точки эксперимента заключаются в следующем: (а) разрешение инфекции, о чем свидетельствует потеря биолюминесценции, как определено визуализации; (Б) возникновение систематических инфекций, как показано распространение биолюминесценции снаружи сгоревший являютсяа; (С) потеря ≥15% массы тела по сравнению с нормальным соответствует возрасту мышей, или страдающий от боли и страданий, как указано на отсутствие чувствительности к ручной стимуляции, неподвижность, неспособность есть или пить. В ходе исследования, если мы сталкиваемся с ситуацией, когда мы не уверены, является ли мышь полностью достиг статуса умирающий, как указано по нашему определению, и / или мы не уверены, что нам нужно усыпить его, мы свяжемся с ветеринарным персоналом СКК для плана действий; (Г) в противном случае мышей будут умерщвлены через 30 дней после начала исследования.
  2. Перенесите мышей в закрытые клетки специально для эвтаназии и эвтаназия мышей путем доставки диоксида углерода (СО 2) сжатый газ в клетки.
    1. Открыть бак или клапан регулятора CO 2 , чтобы инициировать поток газа. Убедитесь, что регулятор читает правильный пси (фунтов на квадратный дюйм) на основе команд, размещенных в блоке, и отрегулируйте повторноне gulator к правильному фунтов на квадратный дюйм при необходимости, как правило, не выше, чем 5 фунтов на квадратный дюйм.
    2. Заполните медленно. Скорость потока не должна вытеснить не более 30% от объема камеры / клетки в минуту (для типичной клетки мыши, ~ 2 л / мин; для клетки крысы, ~ 7,5 л / мин).
    3. Подождите примерно 3-5 мин для животного, чтобы остановить движение или дыхание; глаза должны быть закреплены и расширены. Выключение CO 2 , бак или регулирующий клапан , чтобы остановить поток СО 2.
    4. Убедитесь в том, что сердце не бьется, ощупывая грудь между большим и указательным пальцами. Убедитесь в том, что нет никакого мерцания рефлекса, коснувшись глазным яблоком.
      1. Если есть сердцебиение или мигают рефлекс, повторите процесс эвтаназии или использовать ножницы, чтобы открыть грудную полость для создания пневмоторакса (животное должно быть не реагирующее на носок щепотку перед выполнением этой процедуры).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Штамм A. baumannii , что мы использовали это клинический изолят MDR, как сообщалось ранее 12, 17. Бактериальный штамм был сделан биолюминесцентным с помощью трансфекции luxCDABE оперы 11. Фигура 1А показывает последовательные бактериальные люминесценции изображения из репрезентативной мыши сжигают инфицированных 5 × 10 6 A. baumannii и подвергаются одн...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

ABL представляет собой новый способ лечения инфекций. Поскольку механизм действия полностью отличается от химиотерапии, более физиотерапии. Агент, который опосредует противомикробное действие синего света облучения (400-470 нм). С развитием синих светодиодов, мы получили доступ к эффективному и простому основе света антимикробного подходу к MDR инфекций.

В этом протоколе, мы описали развитие мышиной модели ожоговых инфекций , вызванных биолюминесценции штаммом МЛУ, А. baumannii. При...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих финансовых интересов.

Благодарности

Эта работа была частично поддержана Центром интеграции медицины и инновационных технологий (CIMIT) в соответствии с Соглашением о сотрудничестве в области закупок медицинских исследований армии США (CIMIT No. 14-1894 to TD) и Национальными институтами здравоохранения (1R21AI109172 to TD). YW был поддержан студенческим исследовательским грантом ASLMS (BS. S02.15). Мы благодарны Тайябе Хасан, доктору философии в Центре Веллмана, за ее совместное наставничество для YW.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
IVIS PerkinElmer Inc, Waltham, MAIVIS Lumina Series IIIДоклинический in vivo визуализация
Светоизлучающий диод LEDVieLight Inc, Торонто, Канада 415 нмИсточник света для освещения
Измеритель мощности/энергииThorlabs, Inc., Ньютон, Нью-ДжерсиPM100DДетектор излучения
света Mouse Чарльз Ривер Лабораториз, Уилмингтон, МассачусетсBALB/c7-8 недель, вес 17-19 г
>Brooke Army Medical Center, Форт Сэм Хьюстон, ТехасКлинический изолятСконструированный люминесцентный штамм
Инсулиновые шприцыFisher Scientific14-826-79BD Lo-Dose U-100 Инсулиновые шприцы для инъекций
Хлорид натрияFisher Scientific7210160,9% натрия хлорид
фосфата буферизованный физиологический раствор, 1x растворFisher ScientificBP24384 Стандартный фосфатный буфер, используемый во многих биомолекулярных процедурах
Мозговая инфузия сердцаFisher ScientificB11059Бактериальная культуральная среда
Falcon 15 мл Конические центрифужные пробиркиFisher Scientific14-959-70CДля бактериальной суспензионной центрифуги
Настольные инкубированные орбитальные шейкерыLaboratory Supply Network, Inc, Atkinson, NH Инку-шейкер Минидля культивирования бактерий
Инокуляционные петлиFisher Scientific22-363-605   Для нанесения бактериального иноклюма на ожоговую поверхность мышей
Наконечники для пипеток Fisher Scientific Redi-Tip, 1-200 и микро; LFisher Scientific02-707-502Наконечники для пипеток
Thermo Scientific  Центрифуга Sorvall Legend X1 FisherScientific75-004-220Для разделения бактериальной суспензии
Латунный блокSmall Parts, Inc., Майами, Флорида10 мм на 10 мм;Для создания ожогов у мышей
Перчатки для высоких температур Extreme Dragon PBI/KevlarSuperior Glove Works Ltd, Чиктовага, штат Нью-ЙоркPBI83514 Термостойкие перчатки
Посуда ГрейнераSigma-Aldrich Co. LLCP5112-740EA35 мм × 10 мм
Цифровая горячая пластина CorningCole-Parmer Instrument Company, LLCUX-84301-6510" x 10", 220 В переменного тока, для кипячения воды 
Мышь/Крыса Тонкая линия Хирургическая кровать с водяным подогревомE-Z SystemsEZ-211Предотвращает потерю тепла и переохлаждение во время операции
Ветеринарная мазьS& K Pharma, GmbHKerato Biciron 5%, офтальмологическая мазь Augensalbeдля предотвращения сухости глаз

Ссылки

  1. Gibran, N. S. Summary of the 2012 ABA Burn Quality Consensus conference. J Burn Care Res. 34 (4), 361-385 (2013).
  2. Sommer, R., Joachim, I., Wagner, S., Titz, A. New approaches to control infections: anti-biofilm strategies against gram-negative bacteria. Chimia (Aarau). 67 (4), 286-290 (2013).
  3. Peleg, A. Y., Seifert, H., Paterson, D. L. Acinetobacter baumannii: emergence of a successful pathogen. Clin Microbiol Rev. 21 (3), 538-582 (2008).
  4. Uppu, D. S. Amide side chain amphiphilic polymers disrupt surface established bacterial bio-films and protect mice from chronic Acinetobacter baumannii infection. Biomaterials. 74, 131-143 (2016).
  5. Schaber, J. A. Pseudomonas aeruginosa forms biofilms in acute infection independent of cell-to-cell signaling. Infect Immun. 75 (8), 3715-3721 (2007).
  6. Hoiby, N., Bjarnsholt, T., Givskov, M., Molin, S., Ciofu, O. Antibiotic resistance of bacterial biofilms. Int J Antimicrob Agents. 35 (4), 322-332 (2010).
  7. Lebeaux, D., Ghigo, J. M., Beloin, C. Biofilm-related infections: bridging the gap between clinical management and fundamental aspects of recalcitrance toward antibiotics. Microbiol Mol Biol Rev. 78 (3), 510-543 (2014).
  8. Akers, K. S. Biofilms and persistent wound infections in United States military trauma patients: a case-control analysis. BMC Infect Dis. 14, 190(2014).
  9. Burmolle, M., et al. Biofilms in chronic infections - a matter of opportunity - monospecies biofilms in multispecies infections. FEMS Immunol Med Microbiol. 59 (3), 324-336 (2010).
  10. National strategy on combating antibiotic-resistant bacteria. , https://www.whitehouse.gov/sites/default/files/docs/carb_national_strategy.pdf (2014).
  11. Dai, T. Photodynamic therapy for Acinetobacter baumannii burn infections in mice. Antimicrob Agents Chemother. 53 (9), 3929-3934 (2009).
  12. Zhang, Y. Antimicrobial blue light therapy for multidrug-resistant Acinetobacter baumannii infection in a mouse burn model: implications for prophylaxis and treatment of combat-related wound infections. J Infect Dis. 209 (12), 1963-1971 (2014).
  13. Dai, T., et al. Ultraviolet C light for Acinetobacter baumannii wound infections in mice: potential use for battlefield wound decontamination? J Trauma Acute Care Surg. 73 (3), 661-667 (2012).
  14. Dai, T. Blue light for infectious diseases: Propionibacterium acnes, Helicobacter pylori, and beyond? Drug Resist Updat. 15 (4), 223-236 (2012).
  15. Yin, R. Light based anti-infectives: ultraviolet C irradiation, photodynamic therapy, blue light, and beyond. Curr Opin Pharmacol. 13 (5), 731-762 (2013).
  16. Haisma, E. M. Inflammatory and antimicrobial responses to methicillin-resistant Staphylococcus aureus in an in vitro wound infection model. PLoS One. 8 (12), e82800(2013).
  17. Wang, Y. Antimicrobial Blue Light Inactivation of Gram-Negative Pathogens in Biofilms: In Vitro and In Vivo Studies. J Infect Dis. 213 (9), 1380-1387 (2016).
  18. Chen, D., Shen, Y., Huang, Z., Li, B., Xie, S. Light-Emitting Diode-Based Illumination System for In Vitro Photodynamic Therapy. Int J Photoenergy. 2012 (2), (2012).
  19. Demidova, T. N., Gad, F., Zahra, T., Francis, K. P., Hamblin, M. R. Monitoring photodynamic therapy of localized infections by bioluminescence imaging of genetically engineered bacteria. J Photochem Photobiol B. 81 (1), 15-25 (2005).
  20. Hamblin, M. R., Zahra, T., Contag, C. H., McManus, A. T., Hasan, T. Optical monitoring and treatment of potentially lethal wound infections in vivo. J Infect Dis. 187 (11), 1717-1725 (2003).
  21. Rowan, M. P. Burn wound healing and treatment: review and advancements. Critical Care. 19, 243(2015).
  22. Marx, D. E., Barillo, D. J. Silver in medicine: The basic science. Burns. 40 (Supplement 1), S9-S18 (2014).
  23. Heyneman, A., Hoeksema, H., Vandekerckhove, D., Pirayesh, A., Monstrey, S. The role of silver sulphadiazine in the conservative treatment of partial thickness burn wounds: A systematic review. Burns. 42 (7), 1377-1386 (2016).
  24. Roberts, J. A. Individualised antibiotic dosing for patients who are critically ill: challenges and potential solutions. Lancet Infect Dis. 14 (6), 498-509 (2014).
  25. Dai, T. Blue light eliminates community-acquired methicillin-resistant Staphylococcus aureus in infected mouse skin abrasions. Photomed Laser Surg. 31 (11), 531-538 (2013).
  26. Uppu, D. S. Amide side chain amphiphilic polymers disrupt surface established bacterial bio-films and protect mice from chronic Acinetobacter baumannii infection. Biomaterials. 74, 131-143 (2016).
  27. Donlan, R. M., Costerton, J. W. Biofilms: survival mechanisms of clinically relevant microorganisms. Clin Microbiol Rev. 15 (2), 167-193 (2002).
  28. Olsen, I. Biofilm-specific antibiotic tolerance and resistance. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. , (2015).
  29. Song, H. H. Phototoxic effect of blue light on the planktonic and biofilm state of anaerobic periodontal pathogens. J Periodontal Implant Sci. 43 (2), 72-78 (2013).
  30. Rosa, L. P., da Silva, F. C., Viana, M. S., Meira, G. A. In vitro effectiveness of 455-nm blue LED to reduce the load of Staphylococcus aureus and Candida albicans biofilms in compact bone tissue. Lasers Med Sci. 31 (1), 27-32 (2015).
  31. Guffey, J. S., Wilborn, J. In vitro bactericidal effects of 405-nm and 470-nm blue light. Photomed Laser Surg. 24 (6), 684-688 (2006).
  32. Enwemeka, C. S., Williams, D., Enwemeka, S. K., Hollosi, S., Yens, D. Blue 470-nm light kills methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) in vitro. Photomed Laser Surg. 27 (2), 221-226 (2009).
  33. Bumah, V. V., Masson-Meyers, D. S., Cashin, S. E., Enwemeka, C. S. Wavelength and bacterial density influence the bactericidal effect of blue light on methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). Photomed Laser Surg. 31 (11), 547-553 (2013).
  34. Maclean, M., MacGregor, S. J., Anderson, J. G., Woolsey, G. Inactivation of bacterial pathogens following exposure to light from a 405-nanometer light-emitting diode array. Appl Environ Microbiol. 75 (7), 1932-1937 (2009).
  35. Kim, M. Optical lens-microneedle array for percutaneous light delivery. Biomedical Optics Express. 7 (1o), 4220-4227 (2016).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги

Мышиная модельполирезистентные бактерииактивные формы кислородафотохимический процессбезопасность клеток хозяина
В Vivo Исследовании антимикробной Синяя Светотерапии для Полирезистентного Acinetobacter baumannii Ожог инфекции с помощью биолюминесценции визуализации
Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.