Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Патч Ангиопластики в Rat аорте или НПВ

10.4K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/55253

⸱

27 февраля 2017 г.

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 

В этой статье

Краткое содержание

Мы создали модель ангиопластики перикардиального пятна, которая может быть использована как в венах малого диаметра, так и в артериях. Данная модель может быть использована для сравнения формирования венозной и артериальной неоинтимальной гиперплазии.

Аннотация

Перикардиальные пластыри обычно используются в сосудистой хирургии, чтобы закрыть сосуды. Для облегчения исследований по гиперплазии неоинтимы, которая образуется на пластыря, мы разработали модели крысы патч-пластической операции на сосудах, которые могут быть использованы либо в вену или артерию, создавая патч venoplasty или патч артериопластика соответственно. Технические аспекты этой модели обсуждаются. Инфра-почечные IVC или аорта расчленены, а затем зажимают проксимально и дистально. 3 мм венотомия или артериотомия выполняется в инфраренального нижней полой вены или аорты от 6 до 8-недельных крыс линии Вистар. КРС экссудативный пластырь (3 мм х 1,5 мм х 0,6 мм) используется для закрытия сайта с помощью 10-0 нейлоновую нить. По сравнению с артериальных пластырей, венозные заплаты показывают увеличение толщины неоинтимы на день после операции 7. Эта новая модель перикарда патч ангиопластики может быть использован для изучения гиперплазию неоинтимы на сосудистых биоматериалов, а также сравнить различия между артериальной и венознойсред.

Введение

Сосудистые хирурги часто близкие кровеносные сосуды с перикарда пятнами, либо крупного рогатого скота или свиней, чтобы уменьшить риск рестеноза 1, 2. В артериальной хирургии, экссудативный пластырь ангиопластика снижает скорость рестеноза по сравнению с первичным закрытием 3, 4. Патч venoplasty также аналогичным образом выполняется , чтобы закрыть вены, хотя и реже по сравнению с артериальным процедурами 5, 6. Патчи обычно развиваются гиперплазию неоинтимы на их просвете поверхностях; Тем не менее, механизм образования неоинтимы, остается неясным, особенно в сравнении различий в образовании неоинтимы между артериальной и венозной среде. Ранее мы показали, что перикарда участки привлекают клеток-предшественников в обоих артериальных и венозных среде и что венозная заплаты ангиопластики показывает большеформирование ggressive неоинтимы по сравнению с артериальными участками 7, 8.

В данном исследовании мы описываем крысиную модель перикардиальной патч ангиопластики, который является общим для закрытия как вены и артерии и которые могут быть использованы для изучения образования неоинтимы; Этот метод является малой животной моделью оперативной техники, обычно используемой в человеческих пациентов. Модель крысы имеет больший диаметр, чем модели мыши, облегчая технические аспекты хирургии и улучшения кривой обучения для модели.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Об утверждении соответствующих институциональных животных по уходу и использованию Комитетом должны быть получены, указывая, что ваш протокол соответствует рекомендациям Комитета по этике исследований на животных вашего учреждения.

1. Обезболивание и Дооперационные процедуры

  1. Обезболить самцов крыс линии Вистар, весом около 200 г, с испарившейся 3% изофлуран и 1 л / мин кислорода вводят в акриловой индукции камеры.
  2. Подтверждение адекватной анестезии через отсутствие реакции на носок и хвост крайнем случае. Поместите мазь на глаза, чтобы предотвратить сухость в то время как животные находятся под анестезией. Расположите лежа на спине каждой крысы на рабочей плите пластиковой и поместите силиконовую маску для доставки испаряются 2 - 3% изофлуран при непрерывном вдыхании. Не оставляйте животное без присмотра, пока он не пришел в сознание достаточное для поддержания грудины лежачее.
  3. В то время как носить стерильные перчатки, удалить вентральной живота волосы с помощью удаления волос. Buprenorphine, подкожно или внутрибрюшинно, часто дается в этой точке.

2. Оперативные процедуры

  1. патч venoplasty
    1. Перед операцией, обрезать бычий перикард патч с помощью microscissor размера х 1,5 мм х 0,6 мм 3 мм. Замачивание пластыря в 10 мл стерилизованной физиологический раствор в течение 5 мин в клеточной культуральной чашке.
    2. Подготовьте место разрез с местным антисептик в соответствии с вашим местным протоколом и применить хирургическое драп. Используйте стерильные перчатки и инструменты для поддержания асептики на протяжении операции. Местная анестезия может быть введен в месте планируемого разреза кожи.
    3. Используя скальпель, сделайте надрез по средней линии живота, простирающуюся от уровня мечевидного чуть выше лобка.
    4. Вставьте втягивающим и потрошить все кишки из брюшной полости по направлению к правой стороне. Оберните кишечник в марлю, смоченным физиологическим раствором.
    5. Выставляют Infrarenal полая вена (НПВ). Место имплантации пластыря составляет приблизительно 2 мм ниже уровня возникновения почечных вен; рассекают НПВ бесплатно на этом сайте. Перевязывать и разделить все поясничные и притоки вены на этом уровне с использованием 6-0 нейлоновых наложения швов.
    6. Поместите два микрохирургические зажимы на обоих проксимальных и дистальных infarenal IVC. Выполните венотомия с 25 G иглой путем прокалывания передней стенки НПВ, а затем продлить его до примерно 3 мм с помощью ножниц (Рис . 1А)
    7. Закройте венотомия с патчем с помощью бега или прерванный 10-0 нейлоновыми швами (рис 1В).
    8. Полное закрытие venoplasty. Удалите дистального зажим сначала провентилировать участок, а затем удалите проксимальный зажим для восстановления кровотока в НПВ.
    9. Подтвердите гемостаз путем наблюдения за 30 с без сжатия. Возвращение кишечники в их естественном положении. Закройте живот с запущенным швом в соответствии с утвержденными протоколами животных.
  2. патч артериопластика
    1. Перед операцией, обрезать бычий перикард патч с помощью microscissor размера х 1,5 мм х 0,6 мм 3 мм. Замочите его в стерилизованной солевой раствор.
    2. Подготовьте место надреза с местным антисептиком и применять хирургические драпировка. Используйте стерильные перчатки и инструменты для поддержания асептики на протяжении операции.
    3. Используя скальпель, сделайте надрез по средней линии живота, простирающуюся от уровня мечевидного чуть выше лобка.
    4. Вставьте втягивающим и потрошить все кишки из брюшной полости по направлению к правой стороне. Оберните кишечник в марлю, смоченным физиологическим раствором.
    5. Выставляют аорту. В месте имплантации заплаты составляет приблизительно 2 мм ниже уровня возникновения почечных артерий; рассекают аорту бесплатно на этом сайте. Перевязывать и разделить все поясничные артерии на этом уровне с использованием 6-0 нейлоновых наложения швов.
    6. Зажмите ИНФРАРЕНАЛЬНОГО аорту. Используйте 25 G иглу для выполнения артериотомия по puncturiнг передней стенки аорты, а затем продлить его до примерно 3 мм с помощью ножниц (рис 1C).
    7. Закройте артериотомия с патчем с помощью запуска 10-0 нейлоновые швы (рис 1D). Полное закрытие артериопластика. Удалите дистального зажим сначала провентилировать участок, а затем удалите проксимальный зажим для восстановления кровотока в аорте.
    8. Подтвердите гемостаз путем наблюдения за 30 с без сжатия. Возвращение кишечники в их естественном положении. Закройте живот с запущенным швом в соответствии с утвержденными протоколами животных.

3. Послеоперационные процедуры

  1. После закрытия брюшной полости, прекратить анестезию. Применить послеоперационный уход, включая обезболивание и уход за ранами, в соответствии с инструкциями, рекомендованными по уходу и использованию комитета Institutional животных путем.
  2. Для обезболивания, используйте бупренорфина в дозе 0,1 мг / кг внутримышечно не менее, чем через каждые 12 ч в течение 24 часов не следуютИНГ хирургические процедуры. Проверьте состояние животного каждый день в животном комнате, обеспечивая правильное восстановление после периоперационной периода, а также адекватное лечение послеоперационной боли. Не возвращать животное, которое перенес операцию на компании других животных, пока он не полностью восстановилась.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

После того, как патч-пластической операции на сосудах, не было тромбоз либо венозную (n = 42) или артериях (n = 24), патч-групп. Выживание на 7-й день составила 100% в обеих группах либо с венозной или артериальной пластыря.

Пластыри собирали на 7 -й день и окрашивали гематоксилином и эозином, а толщина неоинтимы сравнивали , как было описано выше 7. Из-за четкой морфологической разницы между заплатой и неоинтимы, о...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Описана заплаты ангиопластики модель у крыс, которые могут использоваться либо вен или артерий, создавая патч venoplasty или патч артериопластика соответственно. Используя эту модель перикарда патч, мы показали агрессивную и стабильную гиперплазию неоинтимы у крыс IVC venoplasty по сравнению с аортальным артериопластика (рисунок 2) 7, 8.

Некоторые технические аспекты отличаются. В аортального артериопластика, важно, ...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторам нечего раскрывать.

Благодарности

Эта работа была частично поддержана Национальным институтом здравоохранения грантов R56-HL095498, R01-HL-095498 (до нашей эры), R01-HL128406, Заслуга Обзор премии I01-BX002336 из Соединенных Штатов Департамента по делам ветеранов медико-биологических лабораторных исследований и Программа развития (до нашей эры), Йельского отделение хирургии Ohse премии (до нашей эры), а Сарнов Сердечно-сосудистые Фонд стипендий (для JMS), а также через ресурсы и использование средств в системе здравоохранения по делам ветеранов Коннектикут (West Haven, CT ). Бычьи перикарда патчи были любезно предоставлены Леметр сосудистому Inc. (Берлингтон, Массачусетс).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Бычий перикардиальный пластырьLeMaitre Vascular
Vascular ClampRoboz Surgical Instrument Co.RS-5424
Зажим для наложения щипцовRoboz Surgical Instrument CoRS-5410
10-0 Проленовый шовArosurgical Co.T05A10N10-13

Ссылки

  1. Muto, A., Nishibe, T., Dardik, H., Dardik, A. Patches for carotid artery endarterectomy: current materials and prospects. J Vasc Surg. 50 (1), 206-213 (2009).
  2. Li, X., et al. Current usage and future directions for the bovine pericardial patch. Ann Vasc Surg. 25 (4), 561-568 (2011).
  3. Biasi, G. M., Sternjakob, S., Mingazzini, P. M., Ferrari, S. A. Nine-year experience of bovine pericardium patch angioplasty during carotid endarterectomy. J Vasc Surg. 36 (2), 271-277 (2002).
  4. Papakostas, J. C., et al. Use of the vascu-guard bovine pericardium patch for arteriotomy closure in carotid endarterectomy. Early and long-term results. Ann Vasc Surg. 28 (5), 1213-1218 (2014).
  5. Ohwada, S., et al. Glutaraldehyde-fixed heterologous pericardium for vena cava grafting following hepatectomy. Hepatogastroenterology. 46 (26), 855-858 (1999).
  6. Mori, A., et al. Standard hepatic vein reconstruction with patch plasty using the native portal vein in adult living donor liver transplantation. Liver Transpl. 18 (5), 602-607 (2012).
  7. Bai, H., et al. Pericardial patch venoplasty heals via attraction of venous progenitor cells. Physiological Reports. 4 (12), (2016).
  8. Li, X., et al. Pericardial patch angioplasty heals via an Ephrin-B2 and CD34 positive cell mediated mechanism. PLoS One. 7 (6), 38844(2012).
  9. Bai, H., et al. Pretreatment of pericardial patches with antibiotics does not alter patch healing in vivo. J Vasc Surg. 63 (4), 1063-1073 (2016).
  10. Muto, A., et al. Eph-B4 prevents venous adaptive remodeling in the adult arterial environment. J Exp Med. 208 (3), 561-575 (2011).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Пэч из перикарданеоинтимальная гиперплазиямодель венопластикимодель артериопластикибычий перикарднейлон 10-0микрохирургические зажимы