Традиционное моделирование частичной обструкции выходного отверстия мочевого пузыря у грызунов чревато гибелью животных. Травма денервации от рассечения вокруг проксимальной уретры и шейки мочевого пузыря также вызывает серьезную обеспокоенность. Мы разработали и оценили безопасную и надежную модель обструкции середины уретры, избегая при этом недостатки традиционной модели.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Нервосберегающая Середина-уретральная обструкция (Nemo) у самок мелких грызунов
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Частичная обструкция инфравезикальной (pBOO) имеет высокую распространенность, вызывает значительное бремя для пациента, и огромные затраты на здравоохранение. Наиболее распространенная модель животных для изучения ремоделирования мочевого пузыря в pBOO являются женскими грызунами, подвергающихся частичной обструкцию у проксимального мочеиспускательного канала. Изменчивость степени обструкции и гибели животных являются основными проблемами с проксимальной обструкцией. Кроме того, рассечения вокруг проксимальной уретры и шейки мочевого пузыря ставит под угрозу иннервацию мочевого пузыря.
Мы разработали модель нервосберегающая середине уретры обструкции (Nemo) для pBOO избежать недостатков традиционной модели. Мы подошли к уретре только уступающую лобковому симфизу, что устранило необходимость в лапаротомию, а также для рассечения в этой области; Кроме того, поперечно-полосатый сфинктер уретры остался нетронутым. Мы провели NEMO у самок крыс линии Sprague-Dawley (12 препятствий, 6 фиктивных животных), а также у самок C57 / BL6 мышей (20 обструкциис, 18 фиктивных животных). Через две недели мы оценивали функцию мочевого пузыря, мочевой пузырь массу и массу тела.
У нас не было среди obstructed- смертности или ложнооперированными самок крыс; как описаны для традиционных проксимального pBOO-методы, мы связали шов вокруг проксимальной уретры и временно помещаются 0,9 мм металлического стержня. NEMO вызвало увеличение массы мочевого пузыря 85% после двух недель, средний остаточный объем мочи было 0,4 мл в частично закупоренных крысах в то время как только 0,03 мл в фиктивных животных. У мышей, мы тестировали 3 размеров канюль, что мы, расположенных вдоль уретры при перевязке шва. Мы обнаружили, что с использованием 27 калибра канюли в результате более чем на 50% смертности животных; помещая 25 калибра канюли не дают желаемого ответа в увеличении массы мочевого пузыря; с использованием 26 калибра канюли дали положительные результаты с минимальной гибелью животных (1/8) еще значительным увеличением в 2 раза в массах мочевого пузыря.
Введение
Частичная инфравезикальная обструкция (pBOO) имеет высокую распространенность и может привести к серьезной дисфункции мочевого пузыря 1; спектр колеблется от врожденных пороков развития, таких как задней уретры клапаны или гипоспадии, более приобретенных стриктур уретры к доброкачественной гиперплазии предстательной железы. Последнее влияет на более чем 30% мужчин шестидесяти лет и старше 2. Большое бремя пациента и огромные затраты на здравоохранение , связанные с pBOO гарантируют значительное исследовательское усилие , приложенное в изучении ремоделирования мочевого пузыря в ответ на сопротивление увеличились отток
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Следующий экспериментальный протокол был одобрен комитетом по уходу за животными учреждения.
1. NEMO у самок крыс
- подготовка
- Поместите женского пола Sprague-Dawley крыс весом примерно 200 г под 3% изофлуран анестезии, взвешивать животное, и бритье и дезинфицировать prepubic область 3 раза с использованием йода хирургической скраб.
- На грелку, ленты задних конечностей и хвоста вниз и катетеризировать мочевой пузырь с 20-го калибра ангиокатетер, который также аккуратно тесьмой вниз, чтобы предотвратить скольжение.
- рассечение
- Используйте скальпель, чт....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Нервосберегающая Середина-уретральная обструкция (Nemo) у самок крыс
смертность
Мы провели в середине уретры препятствие на более чем 40 самок крыс до сих пор и не было смертности.
масса мочевого пузыря
Средняя от.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Смертность животных является одной из основных проблем традиционной модели pBOO в проксимальной уретре, на 15% или более во многих докладах 10, 11, 13. NEMO, как представляется, имеет минимальную смертность при применении у самок крыс. Проксимальные непроходимости мочеиспускательного канала у мышея является технически более сложным, чем у крыс и, таким образом, еще более склонны к осложнениям. Использование 26 .......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторам нечего раскрывать.
Благодарности
Работа финансировалась за счет операционного гранта CHIR (DJB).
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Самка крысы | Чарльз-Ривер Канада | Спрэг Доули Крыс (Crl:SD); Код штамма: 400 | около 200 г |
| Изофлорановый испаритель | Benson medical industries inc. | TEC III Изофлуран; код товара: 53-T3ISO | |
| Изофлоран | Фрезениус Каби Здоровье животных | Изофлоран; код продукта CP0406V2 | Бутылка 250 мл |
| Одноразовый скальпель | Ted Pella, Inc. | #15 Стерильные скальпели из нержавеющей стали; каталожный номер 549-9-15S | |
| Микроскопические щипцы | Ted Pella, Inc. | Щипцы для микроскопии Aesculap, Finepoint, 115 мм; номер продукта 5443 | |
| Щипцы Адсона | Ted Pella, Inc. | Щипцы для рассечения Aesculap Adson, изогнутые, 120 мм; номер продукта 5002-9 | |
| Изогнутые хирургические ножницы | Ted Pella, Inc. | Ножницы хирургические, изогнутые, S/S, 105 мм; каталожный номер 1376 | |
| 0,9 мм Металлический стержень из нержавеющей стали 0,9 мм | goodfellow.com | стали - AISI 316L Диаметр проволоки: 0,9 мм; код заказа 911-684-65 | |
| Крючки для кожи - изготовлены из нержавеющей стали | goodfellow.com | нержавеющей стали - AISI 316L Диаметр проволоки: 0,9 мм; код заказа 911-684-65 | |
| 4-0 Шелковый шовный материал | esutures.com | 4-0 Sofsilk черный 98 дюймов; номер товара LS640 | |
| 5-0 Vicry шовный | esutures.com | 5-0 Викрил неокрашенный 27" RB-1 конус; номер товара J213H | |
| Иглодержатель | Medsupplier.com | Integra Miltex Carb-N-Sert Baumgartner Иглодержатель - 5 1/2"; код товара SKU NEE4484-8-40TC Артикул NEE4484-8-40TC Артикул NEE4484-8-40TC | |
| Темгезик (Бупренорфин) | первая ветеринарная поставка | Бупренекс 0,3 мг/мл для инъекций; артикул #075701 | |
| 1 мл шприц с иглой 27 G | Fisher Scientific | BD Туберкулиновый шприц, BD 309623 | |
| 20 г ангиокат | Fisher Scientific | Andwin Scientific АНГИОКАТ 20 GA; Каталожный No | |
| Восстановительная диета | clearh2o | DietGel 31M; 72-08-5022 | |
| C57Bl/6 самок мышей | Charles-River Canada | C57BL/6 мышей (C57BL/6NCrI); Код штамма: 027 | около 18 г |
| 24 г ангиокат | Fisher Scientific | Hanna Pharmaceutical Supply Co., Inc. IV КАТЕТЕРИЗАЦИЯ АНГИОКАТ 24GX3/4IN; Каталожный No | |
| 5-0 Ethibond | esutures.com | 5-0 Ethibond зеленый 30" RB-1 конус; номер продукта X550H | |
| 26 G игла для шприца | Sigma-Aldrich | BD Precisionglide игла для шприца, калибр 26; z192392 | |
| Нормальный физиологический раствор | Baxter | 0,9% натрия хлорид для инъекций, USP, мини-сумка 100 мл; код товара 2B0043 |
Ссылки
- Andersson, K. E. Storage and voiding symptoms: pathophysiologic aspects. Urology. 62 (5), 3-10 (2003).
- Boyle, P., et al. The prevalence of lower urinary tract symptoms in men and women in four centres. The UrEpik study. BJU Int. 92 (4)....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
