Методическая статья

Оценка Влияние окружающей среды химических веществ на Honey Bee развития от личности до уровня колонии

DOI:

10.3791/55296

⸱

1 апреля 2017 г.

 ,  , 
1Department of Biotechnology and Animal Science, National Ilan University

В этой статье

Краткое содержание

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Здесь мы представляем способ кормить пестицид зараженной пищей как для индивидуальной медоносной пчелы и улой колонии. Процедура оценивает влияние пестицидов на отдельных пчелах медоносных по кормлению в естественных условиях основной личиночной диеты , а также на естественном состоянии улой колонии.

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Присутствие пестицидов в среде пчеловодства является одной из самых серьезных проблем, влияющих на жизнь медоносной пчелы. Пестициды могут быть возвращены в улей после того, как пчелы поедят цветы, которые были опрысканы пестицидами. Зараженная пестицидами пища может обмениваться между рабочими, которые затем кормят личинок, и, следовательно, потенциально могут повлиять на развитие медоносных пчел. Таким образом, остаточные пестициды в окружающей среде могут стать хроническим повреждающим фактором для популяций медоносных пчел и постепенно приводить к разрушению колонии. В представленном протоколе описаны способы кормления медоносных пчел, которые применяются либо к отдельной медоносной пчеле, либо к колонии. Здесь в качестве пестицида используется регулятор роста насекомых (IGR) пирипроксифен (PPN), который широко используется для борьбы с насекомыми-вредителями и вреден для развития личинок и куколок медоносных пчел. Процедура представления может быть применена к другим потенциально вредным химическим веществам или патогенам медоносных пчел для дальнейших исследований.

Введение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Присутствие пестицидов в окружающей среде является одной из самых серьезных проблем , которые влияют на жизнь медоносных пчел 1, 2, 3. Несколько исследований продемонстрировали общее присутствие остатков пестицидов в медоносных пчел и продуктов пчеловодства. На Тайване, в среднем применение пестицидов было 11-12 кг / га каждый год (с 2005 по 2013 год). Количество пестицидов используется в Тайване выше , чем в странах ЕС, а также страны Латинской Америки 4, 5. Другими словами, среда пчеловодства страдает серьезный стресс пестицида, особенно на Тайване и, возможно, в других странах.

Мед пчелы Apis MELLIFERA является одним из основных опылителей в сельскохозяйственных системах 6 и она также производит ценные продукты , такие как мед. Тем не менее, мед пчелы экспоред различных пестицидов , и эти пестициды могут быть возвращены в ульях после кормления на цветы, которые опрыскивают пестицидами при сборе нектара и пыльцы 7, 8. Они также могут быть подвержены воздействию пестицидов на пчеловоды самих с целью контроля проблем с вредителями внутри ульев 9, 10, 11. Поскольку личинки мед пчелы кормят пчел кормилиц для их развития, личинок трутней и даже королева может подвергаться воздействию этих загрязненных пестицидами нектаров и пыльцы 12. Токсичность различных пестицидов для медоносных пчел необходимо решить 13.

Много усилий было сделано, чтобы оценить проблемы остатков пестицидов окружающей среды. Ян и др. протестировали влияние нейротоксическое инсектицидов имидаклоприд на развитие личинок медоносных пчел вулья и сообщила , что к югу от летальной дозы имидаклоприда привела к обонятельному ассоциативному поведению взрослых пчел 14. Кроме того , Urlacher и др. исследовали сублетального воздействие на фосфорорганических пестицидов, хлорпирифоса, на производительность обучения мед пчелы работника в лабораторных условиях 15. В нашем предыдущем исследовании мы оценивали влияние регулятора роста насекомых (IGR), пирипроксифеном (ППН), на личиночной медоносных пчел 16.

В этой статье мы представляем методы для оценки химического воздействия на развитие медоносных пчел. Мед метода кормления пчел были описаны и применяется к или отдельным пчел меда или в колонию. Во - первых, мы тестировали различные концентрации пестицида загрязненных основной личиночной диеты (BLD) на личинок в колониях , чтобы оценить влияние пестицидов на отдельных пчел медоносных в естественных условиях. Затем мы приступили к имитации естественного Кондитионы пестицида с использованием пестицидов загрязненного сиропа в пределах ульев. В этом методе, ППН, который широко используется против насекомых - вредителей 17 и является вредным для развития личинок медоносных пчел и куколок 16, 18, 19, будет являться показателем для представления негативного эффекта пестицида в полевых условиях .

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Подготовка

  1. Сделать 1 л 50% сахарного сиропа. Растворите 1 кг сахарозы в 1 л DDH 2 O.
  2. Приготовьте раствор пирипроксифеном (ППН) в BLD. Сделать 1,1 л 10000 частей на миллион ППН исходного раствора и разбавляют 100 мл раствора ППН в 1 л стерилизованного DDH 2 O. Хранить при 4 ° С.
  3. Разбавляют исходный раствор ППН до конечных концентраций 0,1, 1, 10 и 100 мг / кг (частей на миллион) в BLD для следующего эксперимента.
  4. Сделать ППН-сироп (для уровня колонии). Развести запас ППН до конечных концентраций 10 и 100 частей на миллион в 50% сахарного сиропа для следующего эксперимента.
  5. Мед пчелы разведение.
    Примечание: Здесь, экспериментальное место является Национальный Илан (МИУ) пасека, Yi-Lan-Сити, Тайвань; (GPS - координаты: N24.747278, E121.746200).
    1. Проверьте мед пчелы (Apis MELLIFERA L.) колонии еженедельно для количества пищи и корма с 1 литр 50% сахарного сиропа , если это необходимо (область хранения меда пуста). Определение здоровогоколонии, как 9 кадров пчелиных сот в каждой колонии с королевой укладкой яйца обычно.
  6. Приготовьте 100 мл основной личиночной диеты (BLD). Растворите 6% D-глюкозы, 6% фруктозы и 1% дрожжевой экстракт в стерилизованной дистиллированной деионизированной водой (DDH 2 O) , и дополнить с 50% маточного молочка. Хранить при 4 ° С, но не более чем на 3-х дней.
    Примечание: Предварительно нагревают до 35 ° С перед экспериментом и использовать в течение 3-х дней.

2. In vivo - метод кормления

Заметка: В естественных условиях метод подачи был изменен с Хэнли и соавт. 20

  1. Мед пчелы селекция личинок и маркировка.
    1. Вставьте ферзь Excluder разделить 9 кадров здоровой колонии в 4 кадров и 5 кадров при ограничении ферзя на участок 4 кадра. Оставьте хотя бы одну пустую рамку в секции 4 рамы для откладки яиц.
    2. После того, как матка откладывает яйца на 1 деньПроверьте кадры для появления яйца и держать яйцо внутри ульев в течение 72 ч (4 - я день) до 1 суточных вылупляются личинки. Возьмите один из кадров, содержащих 1-дневные личинка, уборщицы (вылупившиеся в течение 24 часов) из тестового улья вручную и удалить рабочую пчелу мед из рамы с пчелиной щеткой.
    3. Накройте рамку с прозрачным слайдом (размер = длина х ширина х = толщина 29,7 мм х 21 мм х 0,1 мм) и ногти прозрачными скользить по краю кадров с Thumbtacks (фиг.1А).
    4. Для каждой обработки, случайным образом выбрать один 50-дневных личинок (4 - й день) и пометить каждый расплода ячейку с помощью постоянных фломастеров на прозрачный слайд (фиг.1А и 1В).
      Примечание: Написать информацию о каждой обработки на раме и прозрачном слайде, а также с помощью постоянных фломастеров, чтобы избежать путаницы между различными процедурами. Удалить отмеченные слайды и держать в естественных условиях </ EM> кормление и наблюдение.
  2. В естественных условиях кормления.
    1. Добавить различные концентрации ППН-BLD (0,1, 1, 10 и 100 частей на миллион) к каждой меченой расплода ячейки с помощью пипетки на 1-й день, 2 и 3 с помощью 10 мкл, 10 мкл и 20 мкл, соответственно, в соответствии с количеством всасываемого из личинки возраста. Добавьте такое же количество BLD (без ППН) в контрольной группе. Таким образом, общая доза ППН-BLD в каждой меченой расплода ячейки накапливается до 4, 40, 400 и 4000 мкг.
      Примечание: Признать меченые выводки клетку, отмеченные прозрачными слайдами и удалить отмеченные прозрачные слайды после кормления. Используйте свежую BLD для кормления, чтобы предотвратить очистку выводковых клеток рабочих пчел.
    2. Возвращение ППН-обработанных кадров в исходных колоний для дальнейших наблюдений.
      Примечание: Каждая процедура имеет четыре биологических повторов в четырех колониях.
  3. Наблюдение обработанных личинок на 7 -й день.
    1. Для наблюдения тысе ППН обработанных личинок, возвращают меченых прозрачные слайды кадров для записи смертности и укупорки ставок в маркированных расплода клеток.
  4. Наблюдение обработанных куколок и вылупления ставки на 13 -й день.
    1. Удалить пчелиный воск блокированных выводковых клеток.
    2. Положите мягкие наконечники пинцета в потомстве клетку и зажать куколки слегка затем принять куколка мягко.
    3. Передача куколок в 24-луночных культуральных планшетах с двойным слоем лабораторных тканей под каждую лунку. Запись повреждений и смертности во время куколки передачи.
    4. Хранить в 24-луночные культуральные планшеты в термостате при 34 ° С и 70% относительной влажностью до появления (около 8 дней).
    5. И записывают куколок и появились медоносных пчел.
  5. Статистика
    1. Вычислить записанные данные и присутствует в виде среднего значения ± SD
    2. Анализ данных с помощью дисперсионного анализа (ANOVA) с помощью SAS и использовать наименьшее значимое различие (LSD) тест для анализа различий между двумя средствами различных видов лечения. Определить статистически значимыми , как P -значение <0,05. Различные буквы в одной и той же колонке таблицы показали существенное влияние на статистическом анализе.

3. Токсичность ППН в колонии уровня в улей

  1. Настроенный мед пчелы группы.
    1. Вставьте куин Excluder вертикально, чтобы разделить 9 кадров здоровой колонии в 4 кадра (часть A) и 5 ​​кадров (часть В), в то время как ограничивающих ферзя в секцию 4 рамы. Оставьте хотя бы одну пустую рамку в секции 4 кадра для откладывания яиц.
      Примечание: Положите еще одна дамы Excluder на вершине ферзя части, чтобы предотвратить ферзь от перемещения между частями.
    2. После того, как матка откладывает яйца на 1 день, проверьте рамки появления яиц. Возьмите соответствующие кадры, содержащие яйца из части А вручную и удалить рабочую пчелу медаиз рамы с пчелиной щеткой.
    3. Накройте рамку с прозрачным стеклом и гвоздь прозрачного слайда к краю кадра с чертежными кнопками.
    4. Произвольно выбрать 100 выводковых клеток, содержащих яйца и пометить каждый расплода ячейки, используя постоянный маркер на прозрачном стекле. Назначают эти 100 расплода ячейки как группа 1. Напишите информацию о каждой обработки на раме и прозрачном слайде, используя постоянный маркер, чтобы избежать путаницы между различными процедурами.
    5. Возвращение меченого кадр в части А в течение 3 дней, а затем передать королеве часть B, чтобы отложить яйца.
    6. Через 1 день, проверьте кадры части В, выбрать одну соответствующую рамку и этикетку 100 выводковых клеток, содержащих яйца, как описано на этапе 3.1.4. Назначают эти 100 выводок клетки, как 2-й группы.
    7. Возвращение меченого кадра в часть В течение 3 дней, а затем передать царицу к части А, чтобы отложить яйца.
    8. Повторите обмен между ферзя части А и части В более 6 раз и назначить группы численно,соответственно (рисунок 2). Там должно быть в общей сложности 9 групп.
  2. Т расно мед пчелы колонии с ППН сахарного сиропа на 13 -й день (рисунок 2).
    1. Добавить 1 л 50% ППН сахарный сироп, содержащий 10 или 100 частей на миллион в пластиковой коробке фидера пчелиный (Ш х Д х Н = 20 см х 30 см х 3,5 см) и положить коробку на верхней части рамы в экспериментальных колоний.
      Примечание: Группа 1 не получает ППН на 13 дней, как выводок клетки были запечатаны.
    2. Поток контрольную группу с 1 л 50% сахарного сиропа (без ППН), как описано на стадии 2.2.
  3. Количество 1-дневных личинок и запись в качестве инкубационных яиц скорости 100 меченых клеток выводка для каждой группы на 5 -й день (рисунок 2). Мед пчелы яйца обычно принимают 3 дней вылупляются личинки 0 день; Таким образом, проверка и этикетка 100 яиц-содержащих выводок клетки на 1-й день, и подсчитать число 1 дневных личинок для каждой группы на 5-й день, чтобы получить процент от скорости выведения.
  4. Ср а ф о блокирован выводке клетки и записи в качестве укупорки скорости личиночной 100 меченых клеток выводки для каждой группы в 11 -е дня (рисунок 2). 6 до 7 клеток личиночной выводок однодневных будет ограничен с пчелиным воском медом рабочих пчел для личинок окукливания.
  5. Заметим , куколки созревание и записывают скорость Eclosion 100 меченых клеток выводка для каждой группы в 17 -й день (рисунок 2).
    1. Удалить пчелиный воск блокированных выводковых клеток и принять куколка с мягкими Чаевыми пинцет мягко. Передача куколок в 24-луночных культуральных планшетах с двойным слоем лабораторных тканей под каждую лунку.
    2. Хранить в 24-луночные культуральные планшеты в термостате при 34 ° С и относительной влажностью 70% до появления.
    3. И записывают куколок и появились медоносных пчел для каждой группы до группы 9 (49 экспериментальных дней).
      Примечание: Каждая процедура имеет четыре биологических повторов.
  6. Статистика
    1. Вычислить записанные данные и представить в виде среднего± стандартное отклонение.
    2. Анализ существенных различий между парами обработок (например , 0 частей на миллион / 10 частей на миллион, 10 частей на миллион / 100 частей на миллион и 0 частей на миллион / 100 частей на миллион) в каждой группе, используя Стьюдента Стьюдента -TEST. Определить как статистически значимым , если P -Value <0,05.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Для полевых испытаний медоносной пчелы, матка была ограничена секцией 4 кадра для укладки яиц. Этот шаг может привести к увеличению плотности расплода в одном кадре и облегчение последующих наблюдений. Каждая процедура была помечена, и развитие меда пчел было ясно наблюдать через прозрачный слайд. В естественных условиях кормления ППН-BLD на личинок медоносных пчел в улье была выполнена точно оценить влияние ППН на развитие медоносных пчел в колонии. Используя виво мето...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Метод полуторным ограничена яйцекладкой и полуторный обмен методы критические шаги для создания меда пчелиных групп для проведения полевых испытаний в рамках этого протокола. Метод яйцекладки полуторной ограничено допускает синхронизацию жизненного цикла медоносных пчел. Следовательно, исследователи могут выбрать 1 день старые личинок тот же возраст для лечения с различными дозами пестицидов. Для метода полуторной обмены, была обменена матка между частями А (4 кадра) и B (5 кадров), чтобы получить различные стадии разви...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих финансовых интересов.

Благодарности

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Это исследование было поддержано грантом 105AS-13.2.3-BQ-B1 от бюро животных и растений инспекции здравоохранения и карантина, Совет сельского хозяйства, Исполнительный Юань и Грант 103-2313-B-197-002-MY3 Министерства науки и техники (МОСТ).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Ящик для медоносных пчелSAN-YI Honey FactoryW1266Исключение для выращивания матки медоносных пчел
(между рамами)SAN-YI Honey FactoryI1575Матка ограничение 
Исключение Queen (сверху)SAN-YI Honey FactoryI1566Queen ограничение сверху 
Щеткадля пчел SAN-YI Honey Factory, ТайваньW1414аккуратно очистить пчел на раме
Кормушкадля пчел SAN-YI Honey Factory, ТайваньP0219подавать сахарный сироп в колонию
Прозрачная горкаWan-Shih-Chei, Тайвань (http://www.mbsc.com.tw/a01goods.asp?s_id=40)1139Отметьте область личинки на рамках (Материал: полиэтилентерефталат, ПЭТ) (Размер = Длина * Ширина * толщина = 29,7 мм * 21 мм * 0,1 мм)
24 скважины тиссу культуральная пластинаGuangzhou Jet Bio-Filtration Co., LtdTCP011024Выращивание куколок из экстракции
AutoclaveTomin medical equipmenco., LTD.TM-321Сделать стерилизованную дистиллированную деионизированную воду (ddH2O)
P20 пипетманGilsonF123600Добавить PPN в бассейн с кормом для личинок пчел
Инкубатор Yihder Co., Ltd.LE-550RDВыращивание куколок из экстракции
KimwipesCOW LUNG INSTRUMENT CO., LTDВыращивание куколок из экстракции
Маточное молочкоНациональный университет Илан (NIU)NIUСоставление базового рациона для личинок (BLD)
D-(+)-глюкозаSigmaG8270Составление базового рациона для личинок (BLD)
D-(-)-фруктозыSigmaF0127Составление базового рациона для личинок ( BLD)
Дрожжевой экстрактCONDA, pronadisa1702Составить базовый рацион для личинок (BLD)
СахарозаТайваньская сахарная E01071010Приготовить сахарный сироп для корма для пчел
Пирипроксифен (11%)LIH-NUNG CHEMICAL CO.. LTD.Регистрационный No 1937Регулятор роста насекомых (IGR), использованный в эксперименте
KCS34155

Ссылки

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Ruffi nengo, S. R., et al. Integrated pest management to control Varroa destructor and its implications to Apis mellifera colonies. Zootecnia Trop. 32 (2), 149-168 (2014).
  2. Mullin, C. A., et al. High levels of miticides and agrochemicals in North American apiaries, implications for honey bee health. PLoS One. 5, e9754(2010).
  3. Lu, C. A., Chang, C. H., Tao, L., Chen, M. Distributions of neonicotinoid insecticides in the Commonwealth of Massachusetts, a temporal and spatial variation analysis for pollen and honey samples. Environ. Chem. 13, 4-11 (2016).
  4. Tsai, W. T. Analysis of coupling the pesticide use reduction with environmental policy for agricultural sustainability in Taiwan. Environ. & Pollut. 2, 59-65 (2013).
  5. Weng, Z. H. Pesticide market status and development trend (in Chinese). PRIDE. , https://pride.stpi.narl.org.tw/ (2016).
  6. Kevan, P. G. Pollinators as bioindicators of the state of the environment, species, activity and diversity. Agric. Ecosys. Environ. 74 (1-3), 373-393 (1999).
  7. Kevan, P. G. Forest application of the insecticide fenitrothion and its effect on wild bee pollinators (Hymenoptera: Apoidea) of lowbush blueberries (Vaccinium SPP.) in Southern New Brunswick, Canada. Biol. Conserv. 7, 301-309 (1975).
  8. Crane, E., Walker, P. The impact of pest management on bees and pollination. , IBRA. Cardiff, UK. (1983).
  9. Haouar, M., Decormis, L., Rey, J. Fluvalinate applied to flowering apple trees-contamination of honey-gathering bees and hive products. Agronomie. 10 (2), 133-137 (1990).
  10. Chauzat, M. P., et al. A survey of pesticide residues in pollen loads collected by honey bees in France. J. Econ. Entomol. 99 (2), 253-262 (2006).
  11. Bonzini, S., Tremolada, P., Bernardinelli, I., Colombo, M., Vighi, M. Predicting pesticide fate in the hive (part 1), experimentally determined τ-fluvalinate residues in bees, honey and wax. Apidologie. 42 (3), 378(2011).
  12. Sanchez-Bayo, F., Goka, K. Pesticide residues and bees-a risk assessment. PLoS One. 9 (4), e94482(2014).
  13. Johnson, R. M., Ellis, M. D., Mullin, C. A., Frazier, M. Pesticides and honey bee toxicity-USA. Apidologie. 41, 312-331 (2010).
  14. Yang, E. C., Chang, H. C., Wu, W. Y., Chen, Y. W. Impaired olfactory associative behavior of honeybee workers due to contamination of imidacloprid in the larval stage. PLoS One. 7, e49472(2012).
  15. Urlacher, E., et al. Measurements of chlorpyrifos levels in forager bees and comparison with levels that disrupt honey bee odor-mediated learning under laboratory conditions. J. Chem. Ecol. 42 (2), 127-138 (2016).
  16. Chen, Y. W., Wu, P. S., Yang, E. C., Nai, Y. S., Huang, Z. Y. The impact of pyriproxyfen on the development of honey bee (Apis mellifera L.) colony in field. J. Asia Pac. Entomol. 19 (3), 589-594 (2016).
  17. Dennehy, T. J., DrGain, B. A., Harpold, V. S., Brink, S. A., Nichols, R. L. Whitefly Resistance to Insecticides in Arizona: 2002 and 2003 Results. , San Antonio, TX, USA. http://ag.arizona.edu/crop/cotton/insects/wf/whiteflyresistance0204.pdf 1926-1938 (2004).
  18. Yang, E. C., Wu, P. S., Chang, H. C., Chen, Y. W. Effect of sub-lethal dosages of insecticides on honey bee behavior and physiology. Proceedings of international seminar on enhancement of functional biodiversity relevant to sustainable food production, ASPAC, Tsukuba, Japan, , http://www.niaes.affrc.go.jp/sinfo/sympo/h22/1109/paper_06.pdf (2010).
  19. Fourrier, J., et al. Larval exposure to the juvenile hormone analog pyriproxyfen disrupts acceptance of and social behavior performance in adult honey bees. PLoS One. 10, e0132985(2015).
  20. Hanley, A. V., Huang, Z. Y., Pett, W. L. Effects of dietary transgenic Bt corn pollen on larvae of Apis mellifera and Galleria mellonella. J. Apicult.Res. 42 (4), 77-81 (2003).
  21. Kaftanoglu, O., Linksvayer, T. A., Page, R. E. Rearing honey bees, apis mellifera, in vitro 1, effects of sugar concentrations on survival and development. J. Insect Sci. 11 (96), 1-10 (2011).
  22. Vandenberg, J. D., Shimanuki, H. Technique for rearing worker honey bees in the laboratory. J. Apicult. Res. 26 (2), 90-97 (1987).
  23. Peng, Y. S. C., Mussen, E., Fong, A., Montague, M. A., Tyler, T. Effects of chlortetracycline on honey bee worker larvae reared in vitro. J. Invertebr.Pathol. 60 (2), 127-133 (1992).
  24. Bitondi, M. M., Mora, I. M., Simoes, Z. L., Figueiredo, V. L. The Apis mellifera pupal melanization program is affected by treatment with a juvenile hormone analogue. J. Insect Physiol. 44 (5-6), 499-507 (1998).
  25. Zufelato, M. S., Bitondi, M. M., Simoes, Z. L., Hartfelder, K. The juvenile hormone analog pyriproxyfen affects ecdysteroid-dependent cuticle melanization and shifts the pupal ecdysteroid peak in the honey bee (Apis mellifera). Arthropod Struct. Dev. 29 (2), 111-119 (2000).
  26. Santos, A. E., Bitondi, M. M., Simoes, Z. L. Hormone-dependent protein patterns in integument and cuticular pigmentation in Apis mellifera during pharate adult development. J. Insect Physiol. 47 (11), 1275-1282 (2001).
  27. Brouwers, E. V. M. Glucose/Fructose ratio in the food of honeybee larvae during caste differentiation. J. Apicult.Res. 23 (2), 94-101 (1984).
  28. Howe, S. R., Dimick, P. S., Benton, A. W. Composition of freshly harvested and commercial royal jelly. J. Apicult. Res. 24 (1), 52-61 (1985).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

Похожие статьи