Здесь мы представляем экспериментальные и аналитические процедуры для описания временной динамики нейронных и сердечных переменных не-REM-сна у мышей, которые модулируют реакцию сна на акустические стимулы.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Здесь мы представляем экспериментальные и аналитические процедуры для описания временной динамики нейронных и сердечных переменных не-REM-сна у мышей, которые модулируют реакцию сна на акустические стимулы.
Три состояния бдительности доминируют над жизнью млекопитающих: бодрствование, неточное движение глаз (non-REM) и REM-сон. По мере того, как у свободно перемещающихся животных выявляются больше нейронных коррелятов поведения, это трехкратное подразделение становится слишком упрощенным. Во время бодрствования ансамбли глобальной и местной кортикальной активности вместе с периферическими параметрами, такими как диаметр зрачков и симпатовагиальный баланс, определяют различные степени возбуждения. Остается неясным, в какой степени сон также образует континуум состояний мозга, в пределах которого степень устойчивости к сенсорным стимулам и возбудимости и, возможно, другие функции сна, постепенно меняются и как периферические физиологические состояния меняются. Исследования, продвигающие методы мониторинга нескольких параметров во время сна, а также приписывание созвездий этих функциональных атрибутов, имеют решающее значение для совершенствования нашего понимания сна как многофункционального процесса, в течение которого многие положительные эффекты должны бытьecuted. Идентификация новых параметров, характеризующих состояние сна, откроет возможности для новых диагностических путей при нарушениях сна.
Мы представляем процедуру описания динамических изменений состояния сна, не относящихся к REM, посредством комбинированного мониторинга и анализа сигналов электроэнцефалограммы (ЭЭГ) / электрокортикограммы (ЭКГО), электромиограммы (ЭМГ) и электрокардиограммы (ЭКГ) с использованием стандартных методов полисомнографической записи. Используя этот подход, мы обнаружили, что мышь без REM-сна организована в циклы координированных нейронных и сердечных колебаний, которые генерируют последовательные 25-секундные интервалы высокой и низкой хрупкости внешним стимулам. Поэтому центральные и вегетативные нервные системы координируются, чтобы сформировать поведенчески различные состояния сна во время консолидированного сна без REM. Мы представляем хирургические манипуляции для мониторинга полисомнографического ( т. Е. ЭЭГ / ЭМГ в сочетании с ЭКГ) для отслеживания этих циклов в свободной спящей мышце, анализ на квантыИх динамику и протоколы акустической стимуляции для оценки их роли в вероятности пробуждения. Наш подход уже был распространен на человеческий сон и обещает распутать общие принципы организации не-REM-состояний сна у млекопитающих.
Сон млекопитающих является поведенческим состоянием покоя и стойкостью к экологическим стимулам. Несмотря на очевидную однородность, полисомнографические и вегетативные параметры указывают на то, что сон перемещается между качественными и количественно различными нервными и соматическими состояниями в различных временных и пространственных масштабах 1 . От минут до десятков минут происходит переключение между не-REM и REM-сном. Не-REM-сон сопровождается высокоамплитудной низкочастотной активностью в ЭЭГ со спектральным пиком около 0,5-4 Гц, тогда как сон REM показывает регулярную активность ЭЭГ в тета-диапазоне (6-10 Гц) вместе с Мышечная атон....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Все экспериментальные процедуры были выполнены в соответствии с Комитетом по лечению животных Лозанны и Службой по связям с общественностью и департаментами по делам кантона де Во.
1. Хирургия для записей ЭЭГ / ЭМГ-ЭКГ
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Рисунок 2 A (верхняя панель) показывает 100-минутные отрезки спонтанного поведения во время сна, записанные через полисомнографические электроды, имплантированные, как описано (см. Рис. 1 ). Наблюдается заметное увеличение и уменьшение амплитуды ЭЭГ и ЭМГ при не-REM-сонном наступлении. Прерывистый сон REM характеризуется уменьшением амплитуды ЭЭГ и последующим уменьшением тона ЭМГ, который не виден на этой сжато.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Здесь мы покажем, как установить непрерывный временный профиль не-REM-сна, который объединяет переменные ЭЭГ, ЭМГ и ЭКГ. Это первый шаг к разработке интегративного описания спящего режима мыши, который может помочь идентифицировать ранее непризнанный временной шкал, по которому организована высокая и низкая устойчивость к шуму во время сна без REM 1 . Аналогичная временная структура была также описана в человеческом не-REM-сон через аналогичный анализ 1 .
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих финансовых интересов.
Мы благодарим всех членов лаборатории за их вклад в письмо и тщательное прочтение этой рукописи. Мы благодарны Полю Франкену за стимулирование дискуссий, доктор Гизель Ферран за полезные комментарии к хирургическому протоколу и д-р Жан-Ив Чаттон за предоставление оригинальных исполняемых файлов Labview для воздействия шума. Финансирование предоставило Швейцарский национальный научный фонд (гранты 31003A_146244 и 31003A_166318) и Etat de Vaud.
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 2-х компонентный эпоксидный клей | Henkel | Loctite EA 3450 | |
| Рассасывающееся шовное волокно (пролен) | Ethicon | 5-0 FS-3 | |
| Щипцы Адсона | FST | 11006-12 | |
| Антисептический тампон | VWR | 149-0332 | |
| Аттан Изофлуран | Пирамал | Изофлуран 250 мл | |
| Коннекторы 3 x 2-канальные | ENA AG | 2.316 | Растр 2,54 x 2,54 мм; размер 5 x 8 x 9 мм; размер контакта 5 мм; http://www.ena.ch/ |
| Коллектор Dragonfly | Model #SL-10 | ||
| EMBLA усилитель | EMBLA | A10 | |
| ножницы | FST | 14108-09 | |
| Плоская головка Винт из позолоченной стали | J.I. Morris | FF00CE125 https://jimorrisco.com/ | |
| Золотая проволока | CMSA | T.69 5гр | http://www.cmsa.ch/en/ |
| Губка гемостатическая | Pfizer | Гельпеноа, | |
| дезинфицирующее средство на основе йода (Бетадин) | Mundipharma | стандартный раствор 60 мл | |
| Комета буровая сталь 1/005PM104 | UNOR AG | 22310 | |
| Программное обеспечение для анализа Matlab | MathWorks | R2016b | https://ch.mathworks.com/products/matlab.html |
| Microdrill | Fine Science Tools | 96758 | |
| Держатель головки для газовой анестезии мыши | Kopf Instruments | Модель 923-B | http://kopfinstruments.com/product/model-923-b-mouse-gas-anesthesia-head-holder/ |
| Офтальмологическая мазь | Pharmamedica | VITA-POS | |
| Paladur (жидкость) | UNOR AG | 2260215 | для стоматологического цемента |
| Палавит (порошок) | UNOR AG | 5410929 | для стоматологического цемента |
| Stereotaxic Frame для мелких животных | Kopf Instruments | Модель 930 | http://kopfinstruments.com/product/model-930-small-animal-stereotaxic-frame-assembly/ |
| Паяльная проволока | Stannol | 593072 | |
| Регулятор температуры - Мини ректальный зонд | Phymep | 4090502 | http://www.phymep.com/produit/dc-temperature-controller/ |
| Регулятор температуры- грелка | Phymep | 4090205 | http://www.phymep.com/produit/dc-temperature-controller/ |
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.