Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Количественная оценка инфра-медленной динамики спектральной мощности и частоты сердечных сокращений у спящих мышей

9.6K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/55863

⸱

2 августа 2017 г.

 ,  ,  ,  ,  , 

В этой статье

Краткое содержание

Здесь мы представляем экспериментальные и аналитические процедуры для описания временной динамики нейронных и сердечных переменных не-REM-сна у мышей, которые модулируют реакцию сна на акустические стимулы.

Аннотация

Три состояния бдительности доминируют над жизнью млекопитающих: бодрствование, неточное движение глаз (non-REM) и REM-сон. По мере того, как у свободно перемещающихся животных выявляются больше нейронных коррелятов поведения, это трехкратное подразделение становится слишком упрощенным. Во время бодрствования ансамбли глобальной и местной кортикальной активности вместе с периферическими параметрами, такими как диаметр зрачков и симпатовагиальный баланс, определяют различные степени возбуждения. Остается неясным, в какой степени сон также образует континуум состояний мозга, в пределах которого степень устойчивости к сенсорным стимулам и возбудимости и, возможно, другие функции сна, постепенно меняются и как периферические физиологические состояния меняются. Исследования, продвигающие методы мониторинга нескольких параметров во время сна, а также приписывание созвездий этих функциональных атрибутов, имеют решающее значение для совершенствования нашего понимания сна как многофункционального процесса, в течение которого многие положительные эффекты должны бытьecuted. Идентификация новых параметров, характеризующих состояние сна, откроет возможности для новых диагностических путей при нарушениях сна.

Мы представляем процедуру описания динамических изменений состояния сна, не относящихся к REM, посредством комбинированного мониторинга и анализа сигналов электроэнцефалограммы (ЭЭГ) / электрокортикограммы (ЭКГО), электромиограммы (ЭМГ) и электрокардиограммы (ЭКГ) с использованием стандартных методов полисомнографической записи. Используя этот подход, мы обнаружили, что мышь без REM-сна организована в циклы координированных нейронных и сердечных колебаний, которые генерируют последовательные 25-секундные интервалы высокой и низкой хрупкости внешним стимулам. Поэтому центральные и вегетативные нервные системы координируются, чтобы сформировать поведенчески различные состояния сна во время консолидированного сна без REM. Мы представляем хирургические манипуляции для мониторинга полисомнографического ( т. Е. ЭЭГ / ЭМГ в сочетании с ЭКГ) для отслеживания этих циклов в свободной спящей мышце, анализ на квантыИх динамику и протоколы акустической стимуляции для оценки их роли в вероятности пробуждения. Наш подход уже был распространен на человеческий сон и обещает распутать общие принципы организации не-REM-состояний сна у млекопитающих.

Введение

Сон млекопитающих является поведенческим состоянием покоя и стойкостью к экологическим стимулам. Несмотря на очевидную однородность, полисомнографические и вегетативные параметры указывают на то, что сон перемещается между качественными и количественно различными нервными и соматическими состояниями в различных временных и пространственных масштабах 1 . От минут до десятков минут происходит переключение между не-REM и REM-сном. Не-REM-сон сопровождается высокоамплитудной низкочастотной активностью в ЭЭГ со спектральным пиком около 0,5-4 Гц, тогда как сон REM показывает регулярную активность ЭЭГ в тета-диапазоне (6-10 Гц) вместе с Мышечная атон....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Все экспериментальные процедуры были выполнены в соответствии с Комитетом по лечению животных Лозанны и Службой по связям с общественностью и департаментами по делам кантона де Во.

1. Хирургия для записей ЭЭГ / ЭМГ-ЭКГ

  1. Жилье и выбор животных.
    1. Держите животных (C57Bl / 6J, 7-9 недель, 25-30 г) в 12: 12-часовом темном / световом цикле, отдельно и в стандартных условиях (40% влажность, 22 ° C), с пищей и водой Доступный ad libitum .
    2. Используйте только мужчин, чтобы избежать всех влияний гормонального цикла на сон.
  2. Подготовка электродов.
    1. Пост....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Рисунок 2 A (верхняя панель) показывает 100-минутные отрезки спонтанного поведения во время сна, записанные через полисомнографические электроды, имплантированные, как описано (см. Рис. 1 ). Наблюдается заметное увеличение и уменьшение амплитуды ЭЭГ и ЭМГ при не-REM-сонном наступлении. Прерывистый сон REM характеризуется уменьшением амплитуды ЭЭГ и последующим уменьшением тона ЭМГ, который не виден на этой сжато.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Здесь мы покажем, как установить непрерывный временный профиль не-REM-сна, который объединяет переменные ЭЭГ, ЭМГ и ЭКГ. Это первый шаг к разработке интегративного описания спящего режима мыши, который может помочь идентифицировать ранее непризнанный временной шкал, по которому организована высокая и низкая устойчивость к шуму во время сна без REM 1 . Аналогичная временная структура была также описана в человеческом не-REM-сон через аналогичный анализ 1 .

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих финансовых интересов.

Благодарности

Мы благодарим всех членов лаборатории за их вклад в письмо и тщательное прочтение этой рукописи. Мы благодарны Полю Франкену за стимулирование дискуссий, доктор Гизель Ферран за полезные комментарии к хирургическому протоколу и д-р Жан-Ив Чаттон за предоставление оригинальных исполняемых файлов Labview для воздействия шума. Финансирование предоставило Швейцарский национальный научный фонд (гранты 31003A_146244 и 31003A_166318) и Etat de Vaud.

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
2-х компонентный эпоксидный клейHenkelLoctite EA 3450
Рассасывающееся шовное волокно (пролен)Ethicon5-0 FS-3
Щипцы АдсонаFST11006-12
Антисептический тампонVWR149-0332
Аттан ИзофлуранПирамалИзофлуран 250 мл
Коннекторы 3 x 2-канальныеENA AG2.316Растр 2,54 x 2,54 мм; размер 5 x 8 x 9 мм; размер контакта 5 мм; http://www.ena.ch/
Коллектор DragonflyModel #SL-10
EMBLA усилительEMBLAA10
ножницыFST14108-09
Плоская головка Винт из позолоченной сталиJ.I. MorrisFF00CE125 https://jimorrisco.com/
Золотая проволокаCMSAT.69 5грhttp://www.cmsa.ch/en/
Губка гемостатическаяPfizerГельпеноа,
дезинфицирующее средство на основе йода (Бетадин)Mundipharmaстандартный раствор 60 мл
Комета буровая сталь 1/005PM104UNOR AG22310
Программное обеспечение для анализа MatlabMathWorksR2016bhttps://ch.mathworks.com/products/matlab.html
MicrodrillFine Science Tools96758
Держатель головки для газовой анестезии мышиKopf InstrumentsМодель 923-Bhttp://kopfinstruments.com/product/model-923-b-mouse-gas-anesthesia-head-holder/
Офтальмологическая мазьPharmamedicaVITA-POS
Paladur (жидкость)UNOR AG2260215для стоматологического цемента
Палавит (порошок)UNOR AG5410929для стоматологического цемента
Stereotaxic Frame для мелких животныхKopf InstrumentsМодель 930http://kopfinstruments.com/product/model-930-small-animal-stereotaxic-frame-assembly/
Паяльная проволокаStannol593072
Регулятор температуры - Мини ректальный зондPhymep4090502http://www.phymep.com/produit/dc-temperature-controller/
Регулятор температуры- грелкаPhymep4090205http://www.phymep.com/produit/dc-temperature-controller/
Тонкие

Ссылки

  1. Lecci, S., et al. Coordinated infra-slow neural and cardiac oscillations mark fragility and offline periods in mammalian sleep. Sci Adv. 3 (2), 1602026(2017).
  2. Rechtschaffen, A., Kales, A. A manual of standardized terminology, techniques and scoring system for sleep of human subjects. U.S. Department of Health, Education, and Welfare. , Washington, DC. (1968).
  3. Blake, H., Gerard, R. W.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Анализ ЭЭГ и ЭКоГмониторинг ЭМГ и ЭКГполисомнографическая записьциклы небыстрого снапротокол акустической стимуляциидинамика мощности сигма-ритма