Методическая статья

Запись синаптической пластичности в острой гиппокампа ломтики в малообъемной рециркуляции-, перфузии и погружения типа камерная система

DOI:

10.3791/55936

⸱

1 января 2018 г.

 ,  ,  , 
1The Institutes of Brain Science, the State Key Laboratory of Medical Neurobiology, the Collaborative Innovation Center for Brain Science, Fudan University

В этой статье

Краткое содержание

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Этот протокол описывает стабилизации уровня кислорода в небольшой объем переработанной буфера и методологические аспекты записи активности зависимых синаптической пластичности погруженной острый гиппокампа ломтиками.

Аннотация

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Даже несмотря на то, что эксперименты на срезах головного мозга были в эксплуатации с 1951 года, сохраняются проблемы, которые снижают вероятность достижения стабильного и успешного анализа синаптической передачи модуляции при выполнении поле потенциальных или внутриклеточных записи. Эта рукопись описывает методологические аспекты, которые могут быть полезны в улучшении экспериментальных условий для поддержания острого мозга ломтиками и записи полевых возбуждающих постсинаптических потенциалов в камере коммерчески доступных погружения с блоком отток carbogenation. Отток carbogenation помогает стабилизировать уровень кислорода в экспериментах, которые полагаются на рециркуляции небольшой буфер водохранилища для повышения эффективности затрат наркотиков экспериментов. Кроме того рукопись представляет представитель эксперименты, которые изучить последствия различных carbogenation режимы и стимуляции парадигмы на деятельность зависимых синаптической пластичности синаптической передачи.

Введение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

В 1951 году сообщил первый острый мозга срез эксперименты были проведены1. В 1971 году, после успеха в vitro записей от piriform коры2,3 и обнаружения, что Нейроны гиппокампа поперечно взаимосвязаны вдоль оси septotemporal гиппокампа4, один из Первые записи в vitro гиппокампа нейронной активности было достигнуто5. Схожесть нейрофизиологических или neurostructural параметров нейронов в vivo и in vitro условиях по-прежнему являются предметом некоторых прений6, но в 1975 году, Schwartzkroin7 указал, что базальная свойства нейронов поддерживаются в пробирке и что ВЧ-стимуляция (например, тетанизацией) афферентов гиппокампа формирования вызывает длительное облегчение синаптический потенциал8. Электрофизиологические запись активности нейронов в vitro значительно расширил изучение клеточных механизмов деятельности зависимых синаптической пластичности9,10, которая была обнаружена в 1973 году Блисс и др. 11 в в естественных условиях экспериментов с кроликов.

Исследование активности нейронов или сигнальные пути в срезах головного мозга и особенно в острой срезах гиппокампа, теперь является стандартным инструментом. Однако удивительно, в пробирке эксперименты еще быть стандартизированы, что подтверждается несколько подходов, которые все еще существуют для подготовки и ведения острой гиппокампа ломтиками. Рид и др. (1988) 12 обзор методологических проблем для поддержания острого мозга ломтики в различных видов камер срез и выбор купать уровень средний, рН, температуры и кислорода. Эти параметры являются по-прежнему трудно контролировать в зале записи благодаря заказные элементы в vitro фрагментов записи установок. Публикации можно найти, что может помочь преодолеть некоторые из методологических проблем и что описывают новые типы погружения срез камер, например системы интерстициальных 3D microperfusion13, камере с расширенной ламинарного потока и кислорода 14, система с компьютеризированной температуры управления15, поставок и многокамерные записи системы16. Поскольку эти камеры не легко строить, большинство ученых полагаться на срез коммерчески доступных камер. Эти камеры может быть установлен на систему микроскопа, таким образом позволяя для комбинации электрофизиологии и флуоресценции изображений17,18,19. Поскольку эти камеры сохранить срезы мозга, погруженной в искусственных спинномозговой жидкости (ФАГО), высокий расход потока буфера решения необходимо поддерживать, увеличение за счет применения наркотиков. С этой целью мы включили системы рециркуляции перфузии с отток carbogenation, который обеспечивает достаточную стабильность для длительной записи потенциалов поля в камере фрагментов погружения с помощью относительно небольшого фаго тома. Кроме того мы кратко, как использование этой экспериментальной carbogenation/перфузии системы влияет на результат деятельности зависимых синаптической пластичности10 и как модулирует синаптическую ингибитированием киназы эукариотических удлинение фактор-2 (eEF2K) передачи20.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Животные были сохранены в соответствии с установленными стандартами ухода за животными и процедур институтов мозга науки и государственного ключ лаборатории медицинского нейробиологии из Фудань университета, Шанхай, Китай.

1. решение подготовка

Примечание: Смотрите в таблице материалов.

  1. Подготовить нарезки буфера (изменение Gey раствор): 92 мм NaCl, 2,5 мм KCl, 1,25 мм NaH2PO4, 30 мм NaHCO3, глюкоза 25 мм, 20 мм HEPES, 3 мм Na+-пируват, 10 мм MgSO4и 0,5 мм2CaCl.
  2. Отрегулируйте пэ-аш 7.6, используя 1 M NaOH без carbogenation.
  3. Магазин буфера при 4 ° C.
    Примечание: Титрование разъясняет облачно жидкости. Осмотического давления составляет 305-310 мОсм. Карбоген21 содержит 5% углекислого газа и 95% кислорода.
  4. Подготовьте фаго путем разбавления 10 x Стоковый раствор фаго, которые не содержат бикарбонат и глюкозы, давая окончательный состав: 124 мм NaCl, 2,5 мм KCl, CaCl 2,5 мм2, 2 мм MgCl2и 1,25 мм х2PO4.
  5. Добавление бикарбоната и глюкозы до 10 мм глюкозы и 26 мм NaHCO3.
  6. Carbogenate фаго через перфорированные кремния трубку с заблокированных конец сразу после добавления NaHCO3.
  7. Измерение pH во время carbogenating (рН 7,3-7.4).
    Примечание: Емкость буфера может быть отрегулирован слегка изменяя количество NaHCO3. Поскольку результирующая рН зависит от температуры, необходимо проверить полученный pH при carbogenating при рабочей температуре (например, 30 ° C).

2. Подготовка острого гиппокампа фрагментов

Примечание: Смотрите в таблице материалов.

  1. Место ломтик Холдинг сетки в инкубации камеру для острой мозга ломтиками, заполнить камеры с фаго и carbogenate (4-6 Л/ч) для по крайней мере 30 минут22 на 28-30 ° C.
  2. Прохладный хирургических инструментов до 2-4 ° C.
  3. Место стекла стакан, наполненный холодной и carbogenated, нарезка буфера (2-4 ° C), поддерживается в смеси льда и воды, возле vibratome.
  4. Анестезировать крыс или мышей до роговицы рефлексы исчезают (30-50 s) с помощью изофлюрановая, приняв 500 мкл в стеклянный кувшин емкостью 2 Л или 12,5 мкл в 50 мл трубки.
  5. Изолировать мозга с помощью метода описано и визуализированы в деталях в публикациях Матис et al. (2011) 23 и Yuanxiang и др. (2014) 24.
  6. Прохладный мозг до 2-4 ° C в ледяной нарезки буфера (для по крайней мере 2 мин) до рассекает мозжечка и отделяя полушарий.
  7. Используйте холодную хирургическое лезвие вскрыть кусок спинной коры вдоль наспинная края каждого полушария25 получить поперечных срезов от вентральной и промежуточной части гиппокампа, под углом 70°, как показано на рисунке 1C и E.
  8. Шпателем холодной стоматологического цемента передать полушария кусок фильтровальной бумаги кратко сухой поверхности созданной (1-2 сек).
  9. Подключить два полушария с свежесрезанных поверхностей на платформе ледяной нарезки, используя быстродействующий клей клей; у хвостовой конец полушарий лица лезвие бритвы (рис. 1D).
  10. Место среза платформы в камеру охлаждения vibratome и заполнить эту камеру с нарезки буфера (2-4 ° C). Carbogenate с помощью перфорированных силиконовой трубки.
  11. Вырезать 350 мкм фрагментов с помощью адекватных vibratome параметров (например, лезвием вперед скорость: 1,2 мм/с, амплитуда Клинок: 1 мм).
  12. Изолировать гиппокампа формирования от subiculum и entorhinal коре, с использованием двух инъекций канюли (> 28 G) как ножницы.
  13. Удалите пузырьки из сетки срез Холдинг ранее подготовленных инкубации камеры с помощью пипетки Пастера.
  14. Передача фрагментов, которые имеют некоторые прозрачности на пласт pyramidale от платформы нарезки на сетке палаты инкубации. Избегайте любой складные, растяжения, перекрытия и плавающие, аспирационных фаго и срез в пипетку Pasteur большой рот.
    Примечание: Вся процедура (шаг 2,5-2.14) может занять 5-10 мин; Таким образом важно проверить температуру буферного раствора с течением времени поддерживать его на 4 ° C.
  15. Инкубации срезов при 30 ° C для по крайней мере в 1,5-2 ч в камере инкубации и обеспечивают Карбоген на 4-6 Л/ч.
    Примечание: Отрегулируйте скорость потока Карбоген распространить буфер в инкубаторе, но запретить плавающие фрагменты.

3. изменения Carbogenation для фаго переработки небольших водохранилищ

  1. Добавьте соединитель 3-полосная трубки к оттоку системы рециркуляции (рис. 2B).
  2. Подключите средней руки соединитель 3-полосная трубки с Карбоген питания трубки и регулирования скорости потока воздуха метр (3-4 Л/ч, Рисунок 2D и рис. 4C).
  3. Добавьте второй соединитель 3-полосная трубки приток системы рециркуляции. Подключите средней руки к трубка, обращенная Встроенный нагреватель, плеча для тонких кремниевых трубки (длина 10 см) и нижнего рычага на трубу притока из водохранилища (НЧ-фильтр; Рисунок 4 C).
  4. Место для тюбиков на тонких кремниевых трубки (OD: 2 мм) на позиции вдоль трубы где пульсации фаго в зале срез, порожденных Перистальтический насос, минимален.
    Примечание: Отток carbogenation (отток-карбюратора.) модификация уменьшает чувствительность на carbogenation уровне объем фаго водохранилища, фаго, показатель, переработки и относительной трубки позиций в рамках небольших фаго водохранилищ (< 50 мл; Рисунок 3). Что касается НЧ-фильтр определенное количество воздуха в тонких кремниевых трубки уменьшает пульсации потока фаго; Таким образом трубки должен быть заполнены основном с воздухом.

4.Запись синаптических ответы в камере фрагментов погружения

Примечание: Смотрите в таблице материалов.

  1. Предварительно теплой фаго решение на водяной бане до около 28-30 ° C (это предотвратит формирование пузырь в зале записи).
  2. Запуск системы рециркуляции (4-5 мл/мин) и активировать встроенный обогреватель для макроэкономическую систему для по крайней мере 1 час.
  3. Замачивают небольшой кусок объектив очистки бумаги и нейлоновые сетки фиксированной на U-образный провод платины в зале фрагментов погружения на несколько минут (рис. 4).
  4. Выньте провод платины U-образный.
  5. Выключить рециркуляции и Поместите кусочек на объектив, салфетки.
  6. Сразу же место срез Холдинг сетки поверх фрагмента, включите насос и пусть срез сбалансировать 30 мин без погружения в фаго цель.
  7. Заполните микропипеткой боросиликатное (т.е., запись электрода) с Фаго (совет сопротивления: 1-2 MΩ, заполнены 1/3 с фаго) и смонтировать его в держатель пипеткой.
  8. Проверка изоляции электрода металлический стимуляции, поместив его в NaHCO3 раствор (> 40 мм). Подключить электрод отрицательный полюс напряжения генератора постоянного тока (1-2 V, положительный полюс: серебра или платины проволока) и наблюдать образование пузырьков на кончике под микроскопом диссекции (> 60 x увеличением).
  9. Место испытания эпоксидной изоляцией вольфрама электрод стимуляции в держателе манипулятор и ссылка провода в зале срез.
  10. Добавьте второй электрод сравнения в камеру и подключите его к разъему ссылка headstage электрода записи (Рисунок 4A).
  11. В программном обеспечении управления усилитель нажмите на поле «нулевой режим зажим» и продолжить, дважды щелкнув поле «выходной получить список». Выберите получить «100», дважды «высокий перевал поле списка фильтров (Бесселя),» выбрать «0,1 Гц» и дважды щелкните «low pass фильтр список (AC)» выбрать «3 кГц.»
  12. В программное обеспечение для записи, нажмите на «получить | Открытый протокол». Выберите протокол, который имеет параметры, позволяющие эпизодических стимуляцию и оцифровка усиливается потенциалов на 10-20 кГц для 50-100 мс и что автоматически запускает стимул изолятор 10 мс после начала записи эпизодические.
  13. Место стимуляции и записи электродов в линии и параллельно pyramidale пласта, например (Рисунок 4B и 5).
  14. Нажмите кнопку «приобрести | Протокол» и затем выберите вкладку «триггер» (во всплывающем окне). Нажмите на поле «триггере источник» и выбрать «пробел», как источник триггер. Нажмите кнопку «ОК». Нажмите кнопку «запись», чтобы начать приобретение и отмечаем всплывающее окно с кнопкой триггера.
  15. В программном обеспечении изолятор стимул нажмите на поле «контроля напряжения» и введите «0». Нажмите на кнопку «Загрузить». Нажмите в окне «записи программного обеспечения» и нажмите клавишу пробела. Повторяйте этот цикл, последовательно вводить значения от 1 до 8, например, на 1 mV шаги в поле «контроля напряжения».
  16. Коррелируют стимуляции силой с fEPSP склона значения и определяют прочность стимуляции, обязаны получить максимум 40% fEPSP-склона. Нажмите поле «управления напряжения» и введите значение определяется. Нажмите на кнопку «Загрузить».
    Примечание: Стимул используется для применения краткого напряжения или импульсов тока к мозговой ткани. Двухфазные импульсы могут иметь 100 МКС на фазу.
  17. В программное обеспечение для записи нажмите кнопку Остановить, а затем в меню «Получить». Нажмите на «Редактировать протокол» и выберите вкладку «триггер» во всплывающем окне. Нажмите на поле Источник триггер и выбрал «внутреннего таймера» как источник триггер. Нажмите кнопку «ОК». Нажмите кнопку записи, которая запускает автоматическую запись потенциалов поля каждые 30 сек, например. Нажмите кнопку «Стоп», после 30-60 мин.
  18. Нажмите кнопку «Приобрести» меню, нажмите на «Открытый протокол,» выбрать желаемый индукции протокол синаптической пластичности и нажмите кнопку «ОК». Нажмите кнопку «запись» для того чтобы автоматически активировать высокой частоты стимуляции и записи. Нажмите кнопку «Стоп».
    Примечание: В случае исследования, связанные с синаптической пластичности, примените один из стандартных индукции парадигмы для долгосрочного потенцирование или долгосрочной депрессии после длительного базовой записи. Типичные примеры результате модуляции синаптической передачи изображены на рис. 7 и 8 цифра.
  19. В программное обеспечение для записи, нажмите кнопку «получить | Откройте протокол» и выберите тот же протокол как шаг 4.12. Нажмите кнопку «OK» и затем нажмите кнопку «запись». Держите автоматически работает поле потенциальных записей для 2-4 ч, например. Нажмите кнопку «Стоп», чтобы прекратить запись.
  20. В случае фармацевтических исследований, применять соединения непосредственно к фаго водохранилище, если постоянное соединение администрация желаемого (рис. 6).

5. Очистка установки и подсказки

Примечание: Ниже приведены общие советы.

  1. Чистая системы каждую неделю путем переработки 10% H2O2 не более 20 мин, после стирки с дейонизированной H2O.
    Примечание: Этанола не рекомендуется для очистки. Также не рекомендуется погружать ссылка провода и цель в H2O2.
  2. Удаления осажденного соли на поверхности объектива или камеры окрестности с 0,1 N HCl, а затем водой.
  3. Вымойте Карбоген барботер в дистиллированной воде или 0,1 N HCl.
  4. Погружать зале инкубации фрагмента в 10% H2O2 для 5 мин один раз в неделю и затем тщательно промойте отсек для инкубации с дейонизированной H2O.
  5. В случае металлических стимуляция электродов промойте стимулирования электрода с дейонизированной водой после каждого эксперимента и осторожно протрите стимулирования электрода ватный тампон, пропитанный этанола для удаления остаточной ткани.
  6. Уменьшите сопротивление электродов коммерческих металлический стимуляции, удалив изоляцию на кончике через тщательно проведите с наждачной бумагой.
  7. Снизить потери Карбоген от фаго при рециркуляции через трубы, заменив силиконовой трубки политетрафторэтилен трубок.
  8. Держите серебряные провода записи электрода и электрод сравнения в отбеливатель на несколько дней в форме AgCl на поверхности проволоки.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

В разделе протокол мы описали подготовку острого гиппокампа фрагменты из брюшной и промежуточной части гиппокампа формирования (рис. 1) самцов мышей C57BL/6 и самцов крыс Wistar (5-8 недель). Положение полушарий на платформе среза помогает держать их стабильными и устраняет необходимость стабилизации с агар или агарозы. Сама система перфузии основана на Перистальтический насос работает на высокой ротации дать требуемый расход жидкости. Таким образом, быстрое ...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Хотя интерфейс ломтик камеры более надежные синаптических ответы25,26,27,28, погружения камеры обеспечивают дополнительное удобство для записи патч зажим и флуоресценции обработки изображений. Таким образом мы описали несколько аспектов потенциальных записей поля в острой гиппокампа ломтики с использованием коммерческих погружения ломтик палаты, который может быть легко расширен для визуализаци...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Авторы заявляют, что исследование проводилось в отсутствие каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

W.W. провела, проанализированы и разработали экспериментов и написал рукопись. D.X. и К.П. помощь в подготовке рисунок и экспериментов. Эта работа была поддержана NSFC (31320103906) и 111 проекта (B16013) т.б.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
<Требуются сильно>Реагенты
NaClХимический реагент, Китай10019318
Химический реактив KClSinopharm, Китай10016318
KH2PO4Sinopharm Chemical Reagent, Китай10017618
MgCl2 · 6H2OХимический реагент Sinopharm, Китай10012818
CaCl2Sinopharm Chemical Reagent, Китай10005861
NaHCO3Sinopharm Chemical Reagent, Китай10018960
GlucoseSinopharm Chemical Reagent, Китай10010518
2 PO4Sinopharm Chemical Reagent, Китай20040718
HEPESSigmaH3375
Пируват натрияSigmaA4043
MgSO4Sinopharm Chemical Reagent, Китай20025118
NaOHSinopharm Chemical Reagent, Китай10019718
Инструменты и материалы для вскрытия
DecaptorsГарвардский аппарат55-0012для обезглавливания крыс
Бинтовые ножницыSCHREIBER12-4227для обезглавливания мышей
двухлезвийное лезвиеFlying Eagle,Китай 74-C
IRIS НожницыRWD, КитайS12003-09
Костяные РонгерыRWD, КитайS22002-14
ЛожкаХаммахер HSN 152-13
шпатель для стоматологического цементаHammacher HSN 016-15
стоматологический двухсторонний экскаваторBlacksmith Surgical, СШАBS-415-017
Вибрационный микротомLeica, ГерманияVT1200S
хирургическое лезвие RWD,Китай S31023-02
хирургический держательRWD, КитайS32007-14
Электрофизиологическое оборудование и материалы
Вертикальный пипеточный пуллерNarishige,Япония PC-10
Виброизоляционный столMeirits, ЯпонияADZ-A0806
запись погружного типа камераWarner InstrumentsRC-26GLP
4-осевой микроманипуляторСаттер, СШАMP-285, MP-225
Платиновая проволокаWorld Precision InstrumentsPTP406
Усилитель Молекулярные устройства, СШАMulticlamp 700B
Система сбора данныхМолекулярные устройства, СШАDigidata 1440A
Anaysis программное обеспечениеМолекулярные приборы, СШАClampex 10.2
Nikon, ЯпонияFN1
Светодиодный источник светаLumen Dynamics Group, КанадаX-cite 120LED
микропипеткиГарвардский аппаратGC150TFвнеклеточной записи
боросиликатных микропипетокSutter, СШАBF150-86патч-зажим
Вольфрамовый электродA-M Systems, США575500
перистальтический насосLonger, КитайBT00-300T
трубки для перистальтического насосаISMATEC, Вертхайм, ГерманияSC0309 1xприток, ID: 1,02 мм
трубки для перистальтического насосаISMATEC, Вертхайм, ГерманияSC03192x трубки для оттока, ID: 2,79 мм
CCD камераPCO, Германияpco.edge sCMOS
бумага для чистки объективаKodak
50 мл коническая центрифужная трубкаThermo scientific339652
предкамерныйWarner InstrumentsBSC-PC
Встроенный нагревательWarner InstrumentsSF-28
Регулятор температурыWarner InstrumentsTC-324B
Флуоресцентный микроскоп

Ссылки

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. McIlwain, H. Metabolic response in vitro to electrical stimulation of sections of mammalian brain. Biochem J. 48 (4), (1951).
  2. McIlwain, H., Richards, C. D., Somerville, A. R. Responses in vitro from the piriform cortex of the rat, and their susceptibility to centrally-acting drugs. J Neurochem. 14 (9), 937-938 (1967).
  3. Yamamoto, C., McIlwain, H. Electrical activities in thin sections from the mammalian brain maintained in chemically-defined media in vitro. J Neurochem. 13 (12), 1333-1343 (1966).
  4. Andersen, P., Bliss, T. V., Lomo, T., Olsen, L. I., Skrede, K. K. Lamellar organization of hippocampal excitatory pathways. Acta Physiol Scand. 76 (1), 4-5 (1969).
  5. Skrede, K. K., Westgaard, R. H. The transverse hippocampal slice: a well-defined cortical structure maintained in vitro. Brain Res. 35 (2), 589-593 (1971).
  6. Kirov, S. A., Sorra, K. E., Harris, K. M. Slices have more synapses than perfusion-fixed hippocampus from both young and mature rats. J Neurosci. 19 (8), 2876-2886 (1999).
  7. Schwartzkroin, P. A. Characteristics of CA1 neurons recorded intracellularly in the hippocampal in vitro slice preparation. Brain Res. 85 (3), 423-436 (1975).
  8. Schwartzkroin, P. A., Wester, K. Long-lasting facilitation of a synaptic potential following tetanization in the in vitro hippocampal slice. Brain Res. 89 (1), 107-119 (1975).
  9. Reymann, K. G., Frey, J. U. The late maintenance of hippocampal LTP: requirements, phases, 'synaptic tagging', 'late-associativity' and implications. Neuropharm. 52 (1), 24-40 (2007).
  10. Bliss, T. V., Collingridge, G. L., Morris, R. G. Synaptic plasticity in health and disease: introduction and overview. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 369 (1633), 20130129(2014).
  11. Bliss, T. V., Gardner-Medwin, A. R. Long-lasting potentiation of synaptic transmission in the dentate area of the unanaestetized rabbit following stimulation of the perforant path. J Physiol. 232 (2), 357-374 (1973).
  12. Reid, K. H., Edmonds, H. L., Schurr, A., Tseng, M. T., West, C. A. Pitfalls in the Use of Brain-Slices. Prog Neurobiol. 31 (1), 1-18 (1988).
  13. Rambani, K., Vukasinovic, J., Glezer, A., Potter, S. M. Culturing thick brain slices: an interstitial 3D microperfusion system for enhanced viability. J Neurosci Methods. 180 (2), 243-254 (2009).
  14. Hajos, N., et al. Maintaining network activity in submerged hippocampal slices: importance of oxygen supply. Eur J Neurosci. 29 (2), 319-327 (2009).
  15. Redondo, R. L., et al. Synaptic tagging and capture: differential role of distinct calcium/calmodulin kinases in protein synthesis-dependent long-term potentiation. J Neurosci. 30 (14), 4981-4989 (2010).
  16. Stopps, M., et al. Design and application of a novel brain slice system that permits independent electrophysiological recordings from multiple slices. J Neurosci Methods. 132 (2), 137-148 (2004).
  17. Behnisch, T., Matsushita, S., Knopfel, T. Imaging of gene expression during long-term potentiation. Neuroreport. 15 (13), 2039-2043 (2004).
  18. Karpova, A., et al. Encoding and transducing the synaptic or extrasynaptic origin of NMDA receptor signals to the nucleus. Cell. 152 (5), 1119-1133 (2013).
  19. Karpova, A., Mikhaylova, M., Thomas, U., Knopfel, T., Behnisch, T. Involvement of protein synthesis and degradation in long-term potentiation of Schaffer collateral CA1 synapses. J Neurosci. 26 (18), 4949-4955 (2006).
  20. Weng, W., Chen, Y., Wang, M., Zhuang, Y., Behnisch, T. Potentiation of Schaffer-Collateral CA1 Synaptic Transmission by eEF2K and p38 MAPK Mediated Mechanisms. Front Cell Neurosci. 10 (247), (2016).
  21. Meduna, L. J., Jackman, A. I. Carbon dioxide inhalation therapy. Res Publ Assoc Res Nerv Ment Dis. 31, 280-286 (1953).
  22. Edwards, F. A., Konnerth, A., Sakmann, B., Takahashi, T. A thin slice preparation for patch clamp recordings from neurones of the mammalian central nervous system. Pflugers Arch. 414 (5), 600-612 (1989).
  23. Mathis, D. M., Furman, J. L., Norris, C. M. Preparation of acute hippocampal slices from rats and transgenic mice for the study of synaptic alterations during aging and amyloid pathology. J Vis Exp. (49), (2011).
  24. Yuanxiang, P., Bera, S., Karpova, A., Kreutz, M. R., Mikhaylova, M. Isolation of CA1 nuclear enriched fractions from hippocampal slices to study activity-dependent nuclear import of synapto-nuclear messenger proteins. J Vis Exp. (90), e51310(2014).
  25. Leutgeb, J. K., Frey, J. U., Behnisch, T. LTP in cultured hippocampal-entorhinal cortex slices from young adult (P25-30) rats. J Neurosci Meth. 130 (1), 19-32 (2003).
  26. Kloosterman, F., Peloquin, P., Leung, L. S. Apical and basal orthodromic population spikes in hippocampal CA1 in vivo show different origins and patterns of propagation. J Neurophysiol. 86 (5), 2435-2444 (2001).
  27. Thiemann, W., Malisch, R., Reymann, K. G. A new microcirculation chamber for inexpensive long-term investigations of nervous tissue in vitro. Brain Res Bull. 17 (1), 1-4 (1986).
  28. Shetty, M. S., et al. Investigation of Synaptic Tagging/Capture and Cross-capture using Acute Hippocampal Slices from Rodents. J Vis Exp. (103), (2015).
  29. Du, H., Lin, J., Zuercher, C. Higher efficiency of CO2 injection into seawater by a venturi than a conventional diffuser system. Bioresour Technol. 107, 131-134 (2012).
  30. Weinman, J., Mahler, J. An Analysis of Electrical Properties of Metal Electrodes. Med Electron Biol Eng. 2, 299-310 (1964).
  31. Fanselow, M. S., Dong, H. W. Are the dorsal and ventral hippocampus functionally distinct structures. Neuron. 65 (1), 7-19 (2010).
  32. Wang, M., et al. Translation of BDNF-gene transcripts with short 3' UTR in hippocampal CA1 neurons improves memory formation and enhances synaptic plasticity-relevant signaling pathways. Neurobiol Learn Mem. , (2016).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на повторное использование текста или иллюстраций этой статьи JoVE

Запросить разрешение

Теги

ACSF

Похожие статьи