Протокол для оценки относительного воздействия окружающей среды и генетики на рога и рост тела для долгоживущих Cervid

Краткое содержание

Фенотипические различия среди cervid населения может быть связано с уровня населения генетики или питания; различение, которое трудно в дикой природе. Этот протокол описывает, как мы разработали контролируемого исследования, где питания вариация была ликвидирована. Мы обнаружили, что фенотипические изменения мужской белохвостый олень был более ограниченным питания чем генетика.

Аннотация

Cervid фенотипом могут быть помещены в одну из двух категорий: эффективность, которая продвигает выживание более экстравагантные морфометрические роста и роскоши, которая способствует росту большого размера вооружения и тела. Население того же вида отображения каждого фенотипа, в зависимости от условий окружающей среды. Хотя рога и тела размер мужской белохвостый олень (рода виргинский) зависит от физико-географических региона в Миссисипи, США и сильно коррелирует с региональные различия в питательные качества, нельзя игнорировать влияние уровня населения генетики из собственных запасов и предыдущие усилия повторное хранение. Этот протокол описывает, как мы разработали контролируемого исследования, где другие факторы, которые влияют фенотип, таких как возраст и питания, находятся под контролем. Мы принесли поймали дикого беременные самки и молодые олени шести месячный из трех различных физико-географических регионов в Миссисипи, США Миссисипи государственного университета ржавые Докинз Мемориал оленей группе. Олень из того же региона были разведены для получения второго поколения потомства, что позволяет нам оценить поколений ответы и эффектов со стороны матери. Все оленей ели же высокое качество (20% сырого протеина оленей Пелле) диета ad libitum. Мы однозначно отмечен каждый новорожденный и записал тело массы, задние ноги и длине всего тела. Каждого последующего падения, мы седативные лица через дистанционного инъекций и отведать же морфометрии плюс пантов взрослых. Мы обнаружили, что все морфометрии увеличилась в размерах от первого до второго поколения, с полной компенсации рога размер (больше нет региональных вариаций) и частичной компенсации массы тела (некоторые данные о региональных вариаций) очевидно во втором поколении. Второе поколение мужчин, которые возникли из наших бедных качества почвы региона отображается о 40% увеличение размера рога и 25%, увеличение массы тела, когда по сравнению с их диких собранного. Наши результаты показывают, фенотипические изменения диких мужчин белохвостый олень в Миссисипи больше связаны с различиями в питании качества чем уровень населения генетики.

Введение

Экологические факторы, которые испытывает мать во время беременности и лактации может повлиять на ее потомство фенотип, независимо от генотипа^1,2,3. Матери, которые населяют высокого качества окружающей среды скорее всего будет производить потомство, что выставка роскоши фенотип (большие рога и тела размер⁴), тогда как матерей, которые населяют среде низкого качества может производить потомство, которые демонстрируют эффективность фенотип (небольшие рога и тела размер⁴). Таким образом сохранение в условиях высокого качества может позволить мать производить мужского потомства с большими фенотипические характеристики, которые могут непосредственно влиять на потомство репродуктивные возможности^5,6,,78 и косвенно влиять на матери приспособленность.

Хотя питания непосредственно влияет фенотипические характеристики различных таксонам (Ursus americanus, Ursus arctos⁹; Водяные питоны fuscusI ¹⁰; Larus michahellis ¹¹), белохвостый олень фенотипы в Миссисипи, США могут влиять несколько факторов. Размер тела и рога являются примерно одну треть больше для некоторых групп населения по сравнению с другими¹². Эта разновидность сильно коррелирует с кормом качества^13,14; крупнейший мужчины находятся в районах с наивысшего качества кормов. Однако исторической реставрации усилия белохвостый олень в Миссисипи могут привели к генетическим узких мест и/или основатель эффекты^15,16, которая может частично объяснить некоторые из наблюдаемых региональные различия в фенотипе белохвостый олень.

Мы предоставляем протокол, который мы использовали для контроля питания качества поймали дикого белохвостый олень, что позволило нам оценить ли мужчин фенотип ограничивается уровня населения генетики. Этот протокол также позволило нам оценить ли отставание материнской последствия были представлены в наших народов. Наш контролируемых дизайн является предпочтительным для исследования, проведенные на бесплатный диапазоне населения, которые ограничиваются использованием экологических переменных как прокси для питания ограничение^3,17. Наши контролируемых дизайн также позволяет для других переменных, такие, как потенциал хронический стресс связанные с социальных взаимодействий для проводиться постоянно, как все люди подвергаются аналогичного жилья и практики животноводства. Кроме того потому что питание непосредственно влияет на другие аспекты жизни истории от воспроизводства до выживания^18,19, контроль питания позволяет для следователей, чтобы оценить другие переменные, которые влияют на млекопитающих истории жизни аспекты. Были описаны аналогичные протоколы для оценки вопросов, связанных с аспектами истории жизни для других копытных в Северной Америке (например,^{, 20}-²¹).

Протокол

Заявление об этике: Институциональный комитет по уходу за животными и их использованию Университета штата Миссисипи одобрил все методы отлова, обработки и маркировки в соответствии с протоколами 04-068, 07-036, 10-033 и 13-034.

1. Создание мест отлова, обездвиживание и транспортировка диких белохвостых оленей

1. Определите государственные и частные владения, которые участвуют в программе помощи в управлении оленями²², и создайте участки отлова ≥29 в трех исходных регионах в Миссисипи, США.
   1. Определите несколько мест захвата в каждом исходном регионе, чтобы убедиться в том, что диапазон генетических вариаций, присутствующих в региональной популяции, захвачен.
   2. Примечание: Здесь исходные регионы включали Дельту, которая составляет почти 17% от общей площади суши в Миссисипи, США, и считается регионом с высококачественной почвой с сельским хозяйством в качестве основного землепользования^"xref">24. Все исследуемые животные были отловлены из этого региона в пределах распространения O. v. virginianus²⁵. Другие регионы включали регион Тонкого Лёсса (верхний и нижний Тонкий Лёсс вместе взятые), который составляет почти 14% от общей площади суши в Миссисипи, США и считается регионом почвы среднего качества. Сельское хозяйство также является основным видом землепользования в регионе Тонкий лёсс, хотя и не так распространено, как в классе Delta^23,24. Все исследуемые животные были отловлены из этого региона в пределах распространения O. v. virginianus²¹. Наконец, почвенный регион Нижней прибрежной равнины (LCP) составляет почти 22% территории Миссисипи и классифицируется как почвенный регион низкого качества. Основными видами землепользования в LCP являются производство древесины сосны и выпас скота^23,24. LCP также перекрывает географическое распространение O. v. osceola; четыре из шести исходных популяций находились в пределах 21 км от этого распределения²⁵. Этот подвид был описан как меньший, чем O. v. virginianus²⁶.

Рисунок 1: Исходные популяции. Физико-географические районы, где вылавливались беременные самки и детёныши в штате Миссисипи, США. Этот рисунок был изменен из reference³¹. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

2. Выберите потенциальные места отлова, которые соответствуют следующим критериям: характеристики среды обитания, способствующие передвижению оленей, близость к дорогам для доступа и распределение по исследуемой территории.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Места захвата должны позволять скрыть техника захвата.
   1. Приманки с примерно 10 кг очищенной кукурузы, чтобы привлечь оленей и оценить использование на основе потребления приманки и оленей, сфотографированных камерами, чувствительными к движению. Переселяйтесь на альтернативные участки, если олени не посещают места с приманкой в течение 5-7 дней.
3. Во время захвата сядьте на скрытую «стойку».
   1. Поставьте стойку примерно в 20 м с подветренной стороны от кучи приманки, учитывая преобладающее направление ветра, чтобы олени, приближающиеся к приманке, были менее способны учуять техника по поимке.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Настоятельно рекомендуется использовать приподнятые трибуны, и требуются страховочные ремни. Существует несколько вариаций стендов с различными коммерческими источниками, а использование варьируется в зависимости от личных предпочтений. Например, подставка с фиксацией будет включать в себя сидячие места с лестницей для доступа, прикрепленной к дереву ремнями. Портативные стойки для скалолазания могут переноситься техником по захвату и обеспечивают повышенную мобильность, поскольку техник может выбрать конкретное дерево по прибытии на место захвата. Портативные стойки для лазания ограничены для использования на прямых деревьях без ветвей на выбранную высоту.
4. Используйте дротик в сочетании с 3-кубовым радиотелеметрическим дротиком для подачи смеси телетамина HCl (4,4 мг/кг) и ксилазина HCl (2,2 мг/кг).
   1. Планируйте усилия по захвату так, чтобы они совпадали с типичным циклом сумеречной активности deer²⁷. Начинайте каждую попытку съемки за 2-3 часа до захода солнца.
   2. Продолжайте съемку в течение 2-3 часов после захода солнца, используя очки ночного видения и лазер с красной точкой для размещения выстрелов, если олени не были пойманы в светлое время суток.
   3. Стреляйте в оленей, когда они находятся на борту и неподвижны.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Задняя четверть оленя является целью, потому что она имеет значительную мышечную ткань и расположена вдали от сердца и легких.
   4. Подождите около 15 минут, пока брошенные целевые животные (шестимесячные детёныши любого пола или беременные взрослые самки) полностью обездвижятся, прежде чем обнаружить их с помощью радиотелеметрического оборудования.
   5. Убедитесь, что люди находятся под действием седативных препаратов, проверив зрительные рефлексы (мигание). Затем нанесите офтальмологическую мазь на глаза и завяжите глаза оленям для снижения стресса.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Потеря терморегуляции является следствием иммобилизации.
   6. Используйте ректальный термометр для оценки температуры тела после выздоровления. Согрейте оленей одеялами с подогревом, если температура животного ниже 37,7 °C. Охладите оленей пакетами со льдом, если температура животного выше 40,0 °C.
   7. Поместите оленей в кормовое положение на каталку в военном стиле и перевезите оленей с места поимки в закрытый прицеп.
   8. После помещения оленя в трейлер обратите действие ксилазина HCl с помощью 0,125 мг/кг йохимбина HCl²⁸.
   9. Перевезите всех пойманных оленей в нужное место содержания в неволе (например, в Мемориальное подразделение оленей Расти Докинза Университета штата Миссисипи; MSU Deer Unit) и хранить их отдельно по регионам источника.

2. Помещения в неволе и общие методы содержания подопытных животных

ПРИМЕЧАНИЕ: Оленеводческое подразделение МГУ подразделяется на пять загонов площадью от 0,4 до 0,8 га.

1. Накройте каждую сторону загона затеняющей тканью, чтобы она служила визуальным и физическим барьером между загонами. Затеняющая ткань помогает уменьшить травматизм и обеспечивает тень в летние месяцы.
2. Разместите 1-2 приподнятых коробчатых жалюзи на одном конце каждого загона, чтобы облегчить проведение соревнований во время сбора данных.
3. Разместите две кормушки в виде корыта в разных концах каждого загона, чтобы уменьшить конкуренцию за пищу среди оленей. Также предусмотрите в каждом загоне поилку.
4. Обеспечьте оленей высококачественным рационом (20% сырого белка из оленьих гранул) в неограниченном количестве.< / > ПРИМЕЧАНИЕ: Здесь включены дополнительные доступные корма в загонах (Trifolium spp) и овсяница (Festuca spp), а также добровольные травы и разнотравье.
5. Если они присутствуют, поддерживайте доступные корма в загонах, используя смесь гербицидов для борьбы с широколиственными сорняками и травами, используя нормы смеси, указанные на соответствующих этикетках.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Вероятно, потребуется использование помещений за пределами кампуса для размещения мальчиков в возрасте ≥5,5 месяцев. Эти объекты состояли из двух загонов площадью 0,7 га на каждом из трех участков с практикой содержания, аналогичной оленеводческому подразделению MSU.

Рисунок 2: Локации объектов кэптива. Исследуемая территория, где располагались спутниковые объекты и подразделение по оленям Университета штата Миссисипи (MSU). Закрашенными областями обозначены округа Октиббеха (A), Ноксуби (B), Аттала (C), Скотт (D) и Копия (E), штат Миссисипи, США. Этот рисунок был изменен из reference³⁴. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

3. Борьба с паразитами и болезнями

1. Мониторинг исследуемых животных на наличие паразитов круглых червей (Strongyloides spp) с использованием фекальной флотации с паразитами, измеряемыми в яйцах на грамм (EPG).
   1. При наличии высоких доз обеспечьте борьбу с паразитами путем введения гранулированного гельминтизатора (действующее вещество фенбендазол) из расчета около 0,77 кг гранулированного гельминтизатора на 22,7 кг корма в течение мая.
   2. Если уровень паразитов остается высоким после первоначального лечения, используйте средство для налива ивермектина (5 мг/мл)²⁹, смешайте в дозе 2 мл/0,45 кг и дайте животным из расчета 0,45 кг обработанного корма на 45,4 кг массы животного.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Эпизоотическая геморрагическая болезнь иногда является смертельным вирусным заболеванием, распространяемым кусающей мошкой (Culicoides spp) в летние и осенние месяцы. При наличии инсектицида обрабатывайте исследовательскую установку инсектицидом (5% инсектицида сверхмалого объема) 2-3 раза в неделю с 1 июля по 1 октября, чтобы снизить распространенность переносчиков среди исследовательских животных. Распылите этот инсектицид в каждом загоне и по периметру объекта примерно за 90 минут до официального захода солнца с помощью туманообразователя. Предпочтительные методы борьбы с паразитами и болезнями уникальны для каждого объекта содержания в неволе. Во время любых исследований дикой природы в неволе необходимо консультироваться с ветеринарами, чтобы обеспечить здоровье и безопасность животных.

4. Сбор данных

Рисунок 3: Сбор данных о новорожденных олененках. Измерение длины задней лапы новорожденного олененка в Мемориальном олене-отделении Расти Докинза Университета штата Миссисипи в округе Октиббеха, штат Миссисипи, США. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

1. Ежедневно обыщите помещение в неволе в поисках детёнышей во время сезона родов.
   1. Пометьте новорожденных детёнышей ушными бирками из пластика среднего размера с помощью ушной бирки с антибиотиком, наносимым на мужской конец бирки для предотвращения потенциального заражения. Поместите ушную бирку примерно в центр уха олененка.
   2. Измерьте массу тела (с точностью до 0,01 кг) с помощью цифровых подвесных весов и измерьте длину задней лапы и общую длину тела (с точностью до мм).
   3. Соберите образцы волос и отправьте их на удаленное место для установления родства (см. Таблицу материалов).
      ПРИМЕЧАНИЕ: Установление родства было произведено с использованием ДНК на основе проприетарной, нестатистической базы данных структурированного языка запросов. При попарном сравнении аллелей удаленный участок присвоения родства определил родство, когда они исключили всех, кроме одного производителя и одной матери, на основе общего аллеля от каждого родителя во всех протестированных локусах (B. G. Cassidy, личное сообщение). Этот метод определения родства также использовался в предыдущих исследованиях, проведенных на содержащихся в неволе белохвостых оленях^30,31.
   4. Подкожно ввести 2 мл антитоксина Clostridium perfringens типов C и D и антитоксина Clostridium perfringens типов C и D и ввести 0,3 куб.см/кг ивермектина в пропиленгликоле (Ветеринарная школа Университета штата Миссисипи, Миссисипи, США) перорально.
2. Химическая иммобилизация взрослых самцов (≥1,5 года) в октябре и ноябре для сбора данных.
   1. Обездвижите взрослых особей с помощью той же комбинации телетамина HCl и ксилазина HCl, которая используется для отлова диких животных (шаг 1.4).
   2. Во время седативных мероприятий проведите техника, который будет бежать к концу загона, где расположены приподнятые жалюзи. В каждой из двух жалюзи должно быть по одному технику.
   3. Пусть человек, который проводил техника до слепого, вернется к противоположному концу загона.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Олени отходят от этих техников и располагаются перед жалюзи, где техники могут сделать этичные выстрелы в каждого оленя.
   4. Стреляйте в оленей, когда они находятся на борту и неподвижны (раздел 1.4).
   5. Подождите около 15 минут, пока брошенные животные полностью обездвижятся, прежде чем приближаться к нему.
   6. Убедитесь, что люди находятся под действием седативных препаратов, проверив зрительные рефлексы (мигание). Нанесите офтальмологическую мазь на глаза и завяжите глаза оленям, чтобы снизить стресс.
   7. После того, как дротики успешно успокоят отдельного оленя, следите за его жизненными показателями.
      1. Используйте ректальный термометр для оценки температуры тела после выздоровления. Согрейте оленей одеялами с подогревом, если температура животного ниже 37,7 °C. Охладите оленей пакетами со льдом, если температура животного выше 40,0 °C.
   8. Погрузите оленя на каталку военного образца и перевезите его на служебном транспортном средстве в заранее определенную зону сбора данных.
   9. После транспортировки запишите те же морфометрические измерения, которые были зарегистрированы при рождении (шаг 4.1).
      1. Измерьте массу тела (с точностью до 0,01 кг) с помощью цифровых весов и измерьте длину задних лап и общую длину тела (с точностью до мм).
         Примечание: Отдельные олени по-разному реагируют на комбинацию препаратов, используемых во время седативных препаратов, поэтому вводите около 0,1-0,3 мл смеси телетамина HCl и ксилазина HCl (в зависимости от массы тела отдельного оленя), если особь выходит из седации до завершения сбора данных.
   10. Введите соответствующие по размеру количества антибиотики, ивермектина, клостидриальную вакцину и вакцину против лептоспироза всем оленям после их транспортировки в зону сбора данных (см. разделы 1 и 3).
3. Сделайте три измерения рогов у взрослых самцов с помощью измерительной ленты для рогов, пока животное находится под действием успокоительных.
   1. Перед удалением рогов измерьте внутренний размах (наибольшее расстояние между основными балками), базальную окружность (наименьший диаметр, расположенный между заусенцем и зубцом G1) и длину главного пучка (расстояние от основания рога до кончика основного луча)
   рогов.
   2. Удалите рога примерно на 3 см выше заусенца с помощью сабельной пилы. Не удаляйте рога меньше 3 см.

Рисунок 4: Сбор данных о взрослых самцах. Удаление рогов с помощью сабельной пилы у содержащегося в неволе взрослого самца белохвостого оленя. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.

4. После того, как все данные будут собраны от особи, находящейся под действием седативных препаратов, поместите оленя в соответствующий загон и введите либо 0,125 мг/кг йохимбина HCl²⁸, либо 4,0 мг/кг толазолина HCl³². Следите за особями, чтобы убедиться, что они остаются в положении грудины до тех пор, пока они не выйдут из седации и не будут полностью в сознании.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Если возникают осложнения и животное необходимо усыпить, то эвтаназия путем вывиха мозга с помощью оглушителя болта и перерезания яремной вены является этичным способом отправки животного.
5. Поднесите рога в специально отведенное место, чтобы закончить измерение размера рогов.
   1. Измерьте каждый отдельный зубец, выступающий из дальнего света (G1, G2, G3 и т.д.) и дополнительные аномальные точки с помощью проволоки.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Точки, которые не имеют соответствующего аналога на противоположном дальнем свете или не согласуются с определением типичного набора рогов, определяются по классификации Boone and Crockett Club³³.
   2. Оберните проволоку вокруг места, где зубья пересекают главный луч, и отметьте эту точку для ориентира.
   3. Измерьте расстояние от этой точки отсчета до кончика пальца и повторите для каждого пальца.
   4. Соберите данные об остальных измерениях окружности, определив наименьшую точку между зубьями G1 и G2 (окружность H2), зубьями G2 и G3 (окружность H3) и зубьями G3 и G4, если таковые имеются (окружность H4).
   5. Если зубья G4 отсутствуют, измерьте расстояние между средней точкой зубьев G3 и концом дальнего света и измерьте окружность H4 в средней точке.
   6. Измеряйте менее четырех окружностей, если рога содержат менее трех зубцов.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Например, дальний свет с двумя типичными точками включает только три измерения окружности. Физические лица могут использовать другие рекомендации (Safari Club International) для расчета размера рогов; Тем не менее, для достоверного сравнения для каждого животного необходимо использовать согласованные методы.
   7. После проведения всех измерений рассчитайте оценку рога, аналогичную грубой нетипичной оценке Буна и Крокетта ³³.
   8. Взвесьте рога с точностью до 0,1 г с помощью научной цифровой шкалы и назначьте минимальную критическую массу рогов 1 г для животных-первогодок с рогами короче 3 см.
6. Химически обездвижить несовершеннолетних в возрасте примерно 5,5 месяцев с использованием тех же методов для взрослых (раздел 4.2) и пометить несовершеннолетних большой пластиковой ушной биркой (шаг 4.1.1).
   1. Для обездвиживания взрослых особей в неволе используйте те же нормы лекарственной смеси, что и для обездвиживания диких оленей (раздел 1).
   2. Соберите те же измерения, которые были собраны при рождении (шаг 4.1.2) и применяйте те же профилактические средства, что и взрослые (раздел 4.2).
      ПРИМЕЧАНИЕ: После того, как все данные собраны, перевезите каждого молодого самца к его случайно назначенному вспомогательному объекту на трейлере.

5. Производство потомства первого и второго поколения

1. Классифицировать шестимесячных оленей, пойманных в дикой природе, и потомство, рожденное в неволе от матерей, пойманных в дикой природе, как особей первого поколения.
2. Во время сезона размножения размещайте двух самцов с 7-16 самками, чтобы среднее соотношение полов при размножении составляло один самец на восемь самок.
   ПРИМЕЧАНИЕ: Выбирайте племенных самцов из вспомогательных учреждений на основе внешнего вида, потому что самые здоровые самцы (самые большие рога и размер тела), скорее всего, будут обслуживать самок в течение всего сезона размножения, не страдая от травм из-за агрессивного характера самцов в период размножения.
   1. Разрешайте оленям размножаться только с другими особями из того же исходного региона (например, самцы дельты разводят самок дельта, самцы тонкого лёсса размножаются с самками тонкого лёсса, а самцы LCP разводят самцов LCP).
3. Классифицируйте оленей, зачатых родителями в первом поколении, как потомков во втором поколении. Выращивайте этих особей в неволе с рождения и кормите их таким же высококачественным питанием><, как и их родителей. ПРИМЕЧАНИЕ: Самки могут производить потомство несколько лет, но, как правило, каждый год с разными быками-производителями. Собирайте те же данные о потомстве во втором поколении, что и о первом поколении и особях, пойманных в дикой природе.

Результаты

Индивидуальные возраста, питательные качества и генетики влияние мужской белохвостый олень фенотип. Наш дизайн исследования позволили нам контролировать качество питания оленя были потребления и позволил нам определить возраст каждого оленя для допустимых сопоставлений в рамках года классы. Контролируя питания и возраста с дизайн нашего исследования, мы смогли лучше понять ли генетики уровня населения ограничения фенотип мужчин от двух исследуемых групп населения. Улучшение питания имели ...

Обсуждение

Есть несколько шагов, связанных с нашей протокола; Однако есть четыре важнейшие шаги, которые должны быть приняты для обеспечения успеха с настоящим Протоколом. Во-первых во время захвата диких оленей, должны быть несколько захвата мест во всем регионе единого источника (шаг 1.1.1). Наличие нескольких местах захвата гарантирует, что любой генетической изменчивости, связанные с областью источника будут представлены среди оленей. Во-вторых олень должен храниться разлученных региона-источника во время сезона размножения (ша...

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье

Имя	Компания	Каталожный номер	Комментарии
Лущенная кукуруза
Приподнятая подставка
Страховочный ремень
Шторка
Модель 196 Проектор	Pneu-Dart, Пенсильвания, США
3cc Радиотелеметрические дартсы	(Pneu-Dart, Пенсильвания, США)
Различные размеры Дартс	(Pneu-Dart, Пенсильвания, США)
Teletamine HCl	(Телазол, Форт Додж Animal Health, Айова, США)
Ксилазин гидрохлорид;	(Аптека Западного Техаса Rx, Амарилло, Техас, США)
Yhoimbine HCl
Tolazoline HCl
Военная каталка
ректального термометра
Салфетка
20% сырого белка Оленьи гранулы	(Purina AntlerMax Professional High Energy Breeder 59UB, Пурина, Миссури, США)
Кормушки
Коммерческий клевер	(Дурана Кловер, Pennington Seed Co., Джорджия, США)
Коммерческая овсяница	(Max-Q Focue, Pennington Seed Co., Джорджия, США)
Одеяла
Пакеты
Борьба с широколистными сорняками (2, 4-DB Herbacide, Butyrac 200)
Борьба с травой	(Poast Herbacide, BASF Co.)
Гранулированный гельминтизатор	Safeguard Co.,		действующее вещество фенбендазол
Средство от паразитов	(Ивомек, Мериал Ко.)
Инсектицид	Riptide, McLaughlin Gormley King Co.)
Средние и большие пластиковые ушные бирки	(Allflex, Техас, США)
который назначил родство	DNA Solutions Animal Solutions Manager (DNA Solutions, Оклахома, США)
Цифровые весы	(Моултри, EBSCO Industries, Inc.)
Рулетка
Clostridium perfringens типов C и D Анатоксин эссенциальный 3	(Колорадская сывороточная компания)
Clostridium perfringens типов C и D Антитоксин лошадиного происхождения	(Colorado Serum Co.)
Ивермектин в антибиотике пропиленгликоля
	(Nuflor, Schuering-Plough Animal Health Corp., Нью-Джерси, США)
Ивермектин	(Norbrook Labratories, LTD., Даун, Северная Ирландия, Великобритания)
Клостидриальная вакцина	(Vision 7 с SPUR, Ivesco LLC, Айова, США)
Вакцина против лептоспироза	(Лептоферм-5, Pfizer, Inc., Нью-Йорк, США)
Прицеп для транспорта
Сабельная пила	(DEWALT, Мэриленд, США)
Научный цифровой масштаб	(Global Industrail, Global Equipment Company Inc)
Измерительная лента
туманообразовательная
пластиковая ушные бирки	(Allflex, Техас, США)
Пластиковая палочка для ушей	(Allflex, Техас, США)