Комары Aedes aegypti несут ответственность за некоторые из наиболее важных арбовирусов в мире, включая денге и чикунгунья, Зика1передачи. Эти вирусы становятся растущей угрозой для глобального здравоохранения, как широкое распространение А.е. aegypti в тропиках продолжает расширяться2,3,4. Женщины А.е. aegypti преференциально питаются человеческой кровью5 и таким образом, как правило, живут в непосредственной близости от людей, особенно в городских районах, где население наиболее плотной. Через этой тесной связи с людьми они также адаптированы к породе в искусственной среде обитания, включая шины, горшки, желобов и водных резервуаров6,7. А.е. aegypti также легко адаптироваться к лабораторных сред, где они могут соблюдаться без каких-либо специальных требований после собираются непосредственно из поля, в отличие от некоторых других видов рода Aedes 8, 9,10. Их простота в обслуживании видел их широко изучены в лаборатории в широкий спектр областей, в конечном счете целью уничтожения комаров заболеваний могут передавать.
Традиционно арбовирусами управления сильно зависит от использования инсектицидов для сокращения популяций комаров. Однако существует растущий интерес к подходов, где выращены в лабораторных условиях и затем выпустили в природных популяциях измененных комаров. Выпущенные комаров может быть генетически модифицированных11,12,13, биологически14,15, через облучения16, химическая обработка17,18, или с совмещенной19 методы подавления популяций комаров или заменить их на комаров, которые являются тугоплавкие арбовирусами передачи20.
Wolbachia являются бактерии, которые в настоящее время используются в качестве биологического контроля агента для арбовирусов. Несколько штаммов Wolbachia были недавно внесены в А.е. aegypti экспериментально с использованием эмбриональных микроинъекции21,,2223,24. Эти штаммы снижают способность арбовирусов распространения и тиражирования в комаров, уменьшая их передачи потенциальных23,25,26,27,28 . Wolbachia инфекции передаются от матери к потомству, однако некоторых штаммов вызвать бесплодие при инфицированных мужчин спариваться с неинфицированных женщин22. Wolbachia-инфицированных мужчин, поэтому могут быть освобождены в больших количествах для подавления населения естественный комаров, как недавно продемонстрировано в других видов Aedes 15,29. Однако поскольку Wolbachia также препятствовать арбовирусами передачи в А.е. aegypti, комаров также может быть освобожден для замены коренного населения бедных векторов. А.е. aegypti экспериментально зараженных Wolbachia теперь выпускаются в поле в нескольких странах, используя этот последний подход14,30,31.
Wolbachia-основанные подходы для арбовирусами управления опираться на четкое понимание взаимодействия между Wolbachia, комаров и окружающей среды. Wolbachia происходят естественно в широком диапазоне насекомых, и штаммы, введены комаров разнообразны в их эффекты32. Как в А.е. aegypti24вводятся новые типы Wolbachia инфекции, необходимо охарактеризовать каждого штамма для их воздействия на комаров фитнес, размножение и арбовирусами вмешательства под ряда условий. Поэтому строгие эксперименты в лабораторных условиях требуется оценить потенциал для Wolbachia штаммов для достижения успеха в области.
Открытое поле релизы А.е. aegypti с Wolbachia инфекций может часто требуют тысячи, десятки тысяч комаров за релиз зоны, чтобы быть выращены каждую неделю14,30,31. Успех первоначального релизы могут быть улучшены путем выпускать комаров большого размера для максимизации их плодовитость33 и34,спаривания успех35. Комаров, также должны быть адаптированы к условиям, которые они будут испытывать в этой области, однако долгосрочные Лаборатория воспитания могут вызвать изменения в поведении и физиологии, которые могут повлиять на поле производительности36,37, 38.
Мы опишем простой протокол для выращивания А.е. aegypti в лаборатории с использованием основного оборудования. Этот протокол предназначен для обеих одичал типа и Wolbachia-инфицированных комаров, последний из которых могут потребовать особого внимания как некоторые штаммы Wolbachia имеют существенные последствия для комаров истории жизни черты39, 40. воспитание условия избежать переполненности и конкуренция за питание производить комаров постоянный размер, который имеет решающее значение для векторных компетентности и фитнес экспериментов и гарантирует, что комары являются здоровыми для поля релиз41 . Мы также принимаем меры предосторожности для сведения к минимуму Лаборатория адаптации и инбридинга путем уменьшения селективного давления, и обеспечения того, чтобы следующее поколение выборку из случайных большой бассейн. Однако лабораторных сред, заметно отличаются от полевых условиях, и долгосрочное обслуживание льготных условиях может уменьшить фитнес комаров после освобождения в поле37,42,43 . Мы поэтому Крест женщин из лаборатории линий на поле собранные мужчины периодически, приводит в колониях, которые генетически аналогичны для экспериментальных сравнения и что адаптированы к целевой области населения39. Методы не требуют какого-либо специализированного оборудования и может масштабироваться задней десятки тысяч людей в неделю для поля релизов. Протокол также устанавливает приоритеты фитнес комаров внутри и между поколениями, важным фактором для насекомых, предназначенных для создания в природных популяциях. Протокол подходит для большинства лабораторий, которые требуют обслуживания А.е. aegypti, особенно для экспериментальных сравнений, где важны стабильное качество комаров и relatability в поле.