$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Использование в естественных условиях Микро Компьютерная томография (µCT) является мощным инструментом, который включает в себя Неразрушающий изображений внутренних структур в высоких разрешениях с использованием грызунов моделей. Неразрушающий характер в vivo µCT позволяет для многократного изображений же грызунов с течением времени. Эта функция не только уменьшает общее количество грызунов в экспериментальный дизайн и тем самым снижает между предметом различия, которые могут возникнуть, но также позволяет исследователям понять долгосрочные ответы на вмешательство. С использованием µCT неоднократно в естественных условиях эксперименты на мышах и крысах освещены развития изменения в костной ткани микро архитектуры и костной минеральной плотности (BMD) на протяжении периодов в жизни 1,2,3 ,4,5,6,7,8 , а также ответ здоровья костей на мероприятия, такие как диета 9,10, овариоэктомии 7,11 и фармакологических агентов 8,12,13. BMD и ориентировочного общего здоровья костей и риска сохранения перелом кости микро архитектуры в конкретных местах скелета, а именно проксимального отдела голени, бедра и поясничных позвонков, и поэтому основные меры при количественной оценке ответов на вмешательство.
В естественных условиях приобретения изображений µCT включает двухмерных рентгеновских прогнозы, приобретается на разных углов, как источник рентгеновского излучения и детектор вращаться вокруг животного под расследование 14,15. Качество конечного изображения зависит от многих факторов, включая, но не ограничиваясь: выбранные параметры приобретения (т.е., пространственное разрешение, рентген напряжения, тока, шаг вращения, прикладной фильтр, выдержка), ограничения µCT сканер (то есть, на основе сканера артефактов, таких как пыль или кольцо артефакты вызывающие полос или частичный объем эффекты) и правильного позиционирования и сдержанность животного. Первые два из этих факторов может быть манипулирован в некоторой степени пользователя, в зависимости от конкретных сканирование машины, цели исследования и исправления, которые необходимо оптимизировать функции сканера или обработки изображений. Последний из этих факторов, надлежащего позиционирования грызунов до начала сканирования, может быть достигнуто независимо от ограничений на основе сканера или приобретения параметры, которые выбраны для достижения цели, конкретные исследования. В то время как многие публикации, с участием в vivo изображений были опубликованы в литературе 14,,1516,17, стиль классический рукопись такова, что подробная «как» информация не могут быть включены. Таким образом цель этой статьи и видео руководство является заполнить этот пробел. Здесь мы стремимся проинструктировать пользователей в vivo µCT сканеров как анестезировать крыса и позиции и сдерживать задних конечностей для получения высокого качества изображений, которые могут быть проанализированы, чтобы более точно подсчитать результаты кости микро-архитектуры.
Предотвращая препятствия рентгеновского пучка через объекты, за исключением задних конечностей необходимы для количественной оценки наиболее точные BMD и микро архитектуры значения костей. Как рентгеновские лучи проходят через объекты и тканей различной толщины и плотности, некоторые из рентгеновских снимков, (т.е. ослабленный) поглощается материалы, они проходят через. Поскольку плотность измеренной массы образца зависит от его толщины и присутствие и толщины окружающих тканей, важно, что калибровка фантомы, используемый для определения БМД проверяются таким же образом. Таким образом если рентгеновского пучка пройти через объекты (то есть, хвост), до или после прохождения через области интереса, эти объекты будут поглощать некоторые из рентгеновского энергий и будет вмешиваться с изображением передачи приобретенных. Кроме того эти сканы будет очень трудно имитировать при сканировании призраки, которые должны напоминать образец сканирования. В результате эти затухания различия приводят к неточности в оценке измерений про кости. Таким образом для простоты и точности, лучше ограничить количество препятствий между источник рентгеновского излучения, региона интерес и рентгеновский детектор.
Продольная Оценка структуры кости от вмешательства в доклинических моделях связаны неоднократные наркоза животного, чтобы ограничить их передвижение при сканировании протоколы. Существует несколько методов общей анестезии для того, чтобы подавить животных, проходят проверку µCT, включая инъекционные и вдыхаемые анестезия 1,2,4,5,6, 12. в отличие от вдыхаемые анестетики, таких как изофлюрановая, неоднократные наркоз, используя инъекционные анестетики вызывают снижение веса тела, хирургические терпимости и значительные изменения в других физиологических параметров в грызунов, специально крысы и морских свинок, предлагая значительные противопоказания для повторил использования 18,19,20. В то время как изофлюрановая является крайне неустойчивым и позволяет для быстрой индукции и восстановления, инъекции анестетиков производят различные уровни анестезии и время под наркозом зависит от штамма, секс, состав тела, постился государства и суточного цикла животное. Инъекционные анестетики также создают дополнительные препятствия для их использования, как высоко они регулируются национальными руководящими органами. Ингаляционная анестезия однако, включает прямую поставку в дыхательной системы; Этот метод позволяет быстрее индукции и восстановления время и лучший контроль длины и глубины анестезии19,20. Ограничения для ингаляционной анестезии метод связано его требование для испарения специализированное оборудование и некоторые изменения частоты сердечных сокращений и артериального давления во время индукции, поддержания и восстановления 18,19.