Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Улучшение модели свинину инфаркт миокарда закрытой груди путем стандартизации процедур отбора проб крови и тканей

11K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/56856

⸱

12 марта 2018 г.

 ,  ,  ,  , 

В этой статье

Краткое содержание

Здесь мы показываем, протокол стандартизировать процедуры отбора проб установленным свинину модели острого инфаркта миокарда с целью увеличить ее поступательное значение в понимании повреждения миокарда ишемия/реперфузия патофизиологии и проверить роман наркотиков кандидатов.

Аннотация

Миокардиальной ишемии-реперфузии (I / R) травмы способствует почти половина из области некротические после инфаркта миокарда. На сегодняшний день, есть нет утвержденной наркотиков для предотвращения или сокращения миокарда я / R травмы. Изучение и понимание патофизиологических механизмов миокарда я / R травмы необходимо разработать успешного лечения. Большие эксперименты на животных являются важным шагом в трансляционной методов. Установлены и описаны себя и других свинину модель острого инфаркта миокарда. Мы стремились улучшить значение модели, сосредоточив внимание в деталях на методы отбора проб для использования в будущих экспериментах. Кроме того мы подчеркиваем небольшие, но важные шаги, которые могут повлиять на качество конечных результатов. Чтобы имитировать клинических положение миокарда я / R травмы, катетер перкутанеус коронарным вмешательством (PCI) был вставлен в левой передней нисходящей коронарной артерии (LAD) наркотизированных свиньи. ° ° °, Эта модель имитирует острого инфаркта миокарда и PCI лечения людей с возможностью точного определения области на риск а также некротические- и жизнеспособной ишемии тканей. Здесь была использована модель, чтобы исследовать эффект ингибитор бициклических пептидные FXIIa. Модели также могут быть изменены чтобы позволить больше реперфузии раз изучить позднее последствия инфаркта миокарда.

Введение

Ишемическая болезнь сердца, в частности острый инфаркт миокарда (MI), является основной причиной смерти в развитых странах 1. Сегодня стандартное лечение ми является перкутанеус коронарным вмешательством (PCI), лечение катетер шар. Одним из важных факторов, которые влияет на качество жизни и прогноз у пациентов после PCI-лечение острых ми является размер миокарда. Сокращение размера может иметь большое влияние на пациента выживания и прогноз 2. Миокарда ишемии/реперфузии (I / R) травмы имеет значительное влияние на размер миокарда, поэтому одна из главных целей в области сердечно-сосудистых исследований для предотвращения или сокращения миокарда я / R травмы 3. Точные механизмы I / R травмы находятся в стадии расследования 4. Активация плазмы каскады и эндотелиальных клеток являются отличительными чертами я / R травмы 5. Активация системы коагуляции является явно участвуют 6,7. Недавно была показана роль FXII, как ранние вверх по течению пептид, участвующих в контактная фаза активации коагуляционного каскада, в FXII выбить крысы модель мозга я / R травмы 8. Проверка этих результатов в свинину модели представляет собой важный шаг в клинической перевод. Таким образом, мы проводим тестирование ингибитор FXIIa Роман бициклических (80 кДа протеазы) в контексте миокарда я / R травмы в ходе экспериментального исследования.

Животные модели, которые имитируют клинической ситуации острой ми и PCI лечения, имеют важное значение для улучшения нашего понимания патофизиологии миокарда я / R травмы и опробовать новые методы лечения. Свиньи представляют собой хороший животных модель для клинических миокарда я / R травмы. Это не только потому, что их сердца очень похожи на человеческие сердца по анатомии и коронарное кровообращение, но они также показывают аналогичные патофизиологические реакции миокарда ишемии и реперфузии 9,10. Другие модели, такие как мыши и крысы не выполнить эти критерии и показывают существенные различия по сравнению с человеческого сердца 11,12, тогда как собаки например, имеют много больше залога коронарных сосудов по сравнению с людьми 13.

Свинину острого инфаркта миокарда модель широко используется в сердечно-сосудистых исследований расследовать, ишемическая болезнь сердца, включая миокарда я / R травмы 14,,1516,17. Последний является воспалительные состояния, из-за которых минимизации воспалительной реакции, относящиеся к стернотомии или торакотомии, используемых в открытом грудной хирургии имеет важное значение. Закрытые грудь модели, с помощью клинических условиях ангиографии C-рука преодолевает эту проблему. Кроме того одним из наиболее важных моментов является наш протокол обеспечивает точное различие между ишемической (зона риска, AAR) и не ИБС областей левого желудочка (площадь не риску, НРУ) таким образом, чтобы размер infarct (ишемический некротических тканей, НИТ) можно следует точно определить. Наша цель этого документа заключается в четко определить воспроизводимые методологии свинины миокарда я / R травмы модель, в частности в отношении выборки ткани миокарда, что позволит обеспечить более точный анализ молекулярных механизмов я / R травмы и четкое представление о последствиях новых лекарств.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

1. животные:

Все животные были обработаны согласно руководящим принципам швейцарской национальных законов. Это исследование был одобрен Комитетом местных экспериментов на животных кантона Берн (разрешение нет. БУДЬТЕ 25/16).

Используйте большой белой свиньи обоих полов (~ 30 ± 5 кг). Разделить животных слепо на две группы, одна группа, получение ингибитор бициклических (80 кДа протеазы) FXIIa или лечения выбора и других неактивного элемента управления.

2. хирургическая процедура (рис. 1)

  1. Анестезия и подготовка животного:
    1. Быстро животных за 12 ч до начала эксперимента.
    2. Предварительно лечить животное с 20 мг/кг кетамин и 2 мг/кг Ксилазина через внутримышечной инъекции в горловину, используя шприц 10 мл. Запишите вес животного и секс.
    3. Вызвать обезболивание путем инъекций 0,5 мг/кг мидазолама и 0,05 мг/кг Atropin в аурикулярной Вену. Интубировать животное с эндотрахеальной трубки.
    4. Поддержание анестезии путем механической вентиляции с помощью искусственного дыхания (O2/air 1:3, Севоран 1,5%), 7-8 мм сократимость трубки и фильтр. Отрегулируйте фракция вдохновили кислорода (FiO2) до 35% и дыхательный объем до 6-10 мл/кг.
    5. Глубины анестезии оценивается как адекватные в отсутствие мотор или вегетативных реакций на щипал нос. Глазной рефлексов и челюсть тон осуществлялся непрерывно также ориентации челюсть расслабленной тон и отсутствие глазной рефлексов. Температура ядра постоянно контролируется и поддержание normothermia (38-38,5 ° C) было обеспечено с пассивной потепления (изоляция одеяла и теплой бутылки).
    6. Рассечь свободный, как описано в Koudstaal и его коллеги шаги 3-1-3-318, сонной артерии с обеих сторон и их иглу с оболочкой 7F. Иглу слева яремной вены с 7F оболочкой для забора венозной крови.
    7. Администрировать болюс дозе 250 мкг фентанила анальгетик через Центральный венозный линии следуют 250 мкг/ч как постоянное внутривенное вливание, используя Насос инфузионный. Мониторинг температуры тела, частоты пульса и ритм с 3-ведущий Электрокардиограмма (ЭКГ), артериальной и Центральное венозное давление в течение всего эксперимента.
    8. С помощью стандартной пробирки, вывести следующие базовые образцы крови от линии венозного: 5 мл citrated плазмы и 2.9 мл плазмы ЭДТА в соответствующие трубы. Центрифуга сразу на 2000 x g 15 мин при 4 ° C. Возьмите 2.9 мл крови в сыворотке трубку и позволяют свертывается на 30 минут при комнатной температуре до центрифугирования, как описано выше.
    9. Аликвота 200 мкл плазмы или сыворотки в 500 мкл трубки и хранить все образцы в-80 ° C для дальнейшего анализа.
    10. Вывести 0,5 мл крови из артериальной линии с помощью специальных крови газового анализа (BGA) шприцы для измерения BGA с помощью BGA машины в соответствии с инструкциями производителя.
    11. Вывести 0,5 мл крови из вен линии, используя стандартный 2 мл шприц и немедленно передать его в Закон патрон иглой 30 G. Вставьте заполненный картридж в акт машина для измерения время свертывания согласно инструкциям производителя. Смотрите Рисунок 2 для моментов времени.
    12. Позволяют животное, чтобы стабилизировать за 20 мин до начала эксперимента ми и администрировать 5000 МЕ нефракционированного гепарина в венозный линии, используя шприц 2 мл.
    13. Монитор действовать каждый 30-45 мин, как упомянуто в 2.1.11. Внутривенно вводить 2500 МЕ нефракционированного гепарина, если акт < 180 s.
  2. Инфаркт миокарда эксперимент
    1. Используйте стандартное оборудование рентгеноскопии рук C (программа коронарной ангиографии, угол 0°, 12 кадров в секунду, ~ 70 кв) - или же выделенный ангиографии системы - для выполнения коронарного вмешательства.
    2. Используйте флюорографическая руководство чтобы вставить катетер давления (5F, 120 см) через ранее установленный оболочка в левой сонной артерии. Продвиньте его в левый желудочек. Подключение давления катетер для приобретения системы для записи левого желудочка давления. Система сбора необходимо непрерывно вычисления и запись сердечного ритма, разработали давление, dP/dt максимум (сократимости левого желудочка) и dP/dt минимальный (релаксация левого желудочка) в течение всего эксперимента. Запись исходных значений для 10 мин.
    3. Вставьте 6F (100 см, EB3.75) руководящих катетер через оболочке ранее помещены в правой сонной артерии. Заранее его левой коронарной артерии для достижения левой передней нисходящей коронарной артерии (LAD) под руководством X-ray. Придать контрастного вещества с помощью 20 мл шприца через руководящие катетер для выполнения базовых коронарной ангиографии.
      Примечание: Инъекции контрастного вещества было сделано путем ручного давления но выделенной мощности инжекторная система может также использоваться.
    4. Оцените размер парень на рентгеновского монитора выберите соответствующий размер катетера перкутанеус коронарным вмешательством (PCI). Использование PCI шары с длиной 15-25 мм и диаметром от 2 до 3,5 мм в зависимости от размера лад. Соберите PCI катетера и коронарного проволочного проводника (F 014/J, 175 см). Соедините катетер PCI с устройством инфляции, предварительно заполнены с контрастным веществом.
      Примечание: Лад диаметр может измеряться непосредственно на откалиброванный монитор с помощью линейки и размер PCI шар затем выбирается соответственно.
    5. Вставьте собранный системы из 2.2.4 в Люмене руководящих катетера. Заранее проволочного проводника в лад, до тех пор, пока она выходит за рамки второй диагональной ветви парень.
    6. Используйте флюорографическая руководство для продвижения PCI катетер, пока он не достигнет примерно в середине парень. Выберите лад блокировки сайта в зависимости от анатомии coronaries, обычно после второго, иногда после первой диагональной ветви (рис. 3) для того чтобы иметь аналогичный процент AAR левого желудочка (LV).
      Примечание: Выбор блокировки сайта зависит от Длина диагонали ветвей и, таким образом, области ткани, который снабжается кровью через соответствующего подразделения. В случае продолжительной отделенные первый диагональной ветви блокировки сайта будет только после этого. В случае короче первый диагональной ветви блокирование осуществляется после второй диагонали.
    7. Извлеките проволочный проводник, а затем увеличить давление в устройстве инфляции в 7-10 бар, чтобы надуть шар PCI катетера и побудить ишемии миокарда, за 1 ч. постепенно увеличивать FiO2 до 50-60% от 15 до 40 мин ишемии. Держите дыхательный объем 6-10 мл/кг.
      Примечание: Эта процедура будет уменьшить возникновение экстрасистолы и уменьшить частоту вентрикулярные.
    8. Запись видео последовательности s 5-10 при инъекции контрастного вещества через руководящие катетер иметь Ангиограмма шар PCI катетер на месте только после запуска ишемии; Повторяйте после ишемии для проверки полной окклюзии лад, дистальнее шар PCI катетер в 10 минут.
    9. Мониторинг животных тесно для немедленно выявлять и лечить (2.2.10) сердечных аритмий. Экстрасистолы обычно происходят и увеличение частоты (> 3 / мин) от 20 до 40 мин после индукции ишемии миокарда. Если это происходит, мягко массаж шеи с обеих сторон под щеку. В большинстве случаев это будет достаточно для восстановления регулярного сердцебиение, вероятно, стимуляция блуждающего нерва барорецепторов, расположенный на общей сонной артерии.
    10. Если нарушения ритма сердца прогрессировать в фибрилляции желудочков, используйте внешний, двухфазный дефибриллятор восстановить синусовый ритм. Примените 5-10 компрессии грудной клетки с помощью дефибриллятора колодки непосредственно перед нанесением удара для того чтобы заполнить coronaries с кислородом кровь и затем шок с 150 J (для животных 30 кг).
    11. При необходимости повторите операцию и увеличение энергии до 175 J после 3rd шока. Используйте параметры повышенной энергии для тяжелее животных.
    12. Пять минут до конца времени ишемии повторить проб крови, упомянутых в 2.1.8-2.1.13. Придать испытываемого вещества (либо бициклические ингибитор FXIIa или управления 4 мг/кг, это делать это вслепую) внутривенно через Центральный венозный линии и скрытой линии с 20 мл физиологического раствора.
    13. Снимать один образец цитрат плазмы (как упомянуто в 2.1.8 и 2.1.9) 4 мин после парентерального введения вещества в 2.2.12.
    14. Выполните Ангиограмма (2.2.3) для подтверждения лад окклюзии, затем дефлирования шар катетер PCI и удалите этот катетер из руководящих катетер. Подтвердите перфузии лад дистального прикуса сайт, Ангиограмма сразу же после дефляции и удаления шара катетера PCI, 10 мин после этого, когда признаки ишемии миокарда были видны на ЭКГ для более чем 5 минут и непосредственно перед повторной окклюзии отрока.
    15. Разрешить реперфузии ишемии миокарда 2 h. Взять образцы сыворотки и плазмы в 10, 30, 60 и 115 мин реперфузии (2.1.8 и 2.1.9). Монитор BGA в 60 и 115 мин (2.1.10).
    16. Снова вставьте PCI катетер вместе с проволочного проводника в точно то же положение, как используется для ишемии. Надуть шар PCI катетер как раньше и подтвердите лад окклюзии, Ангиограмма (2.2.3). Удаление катетера давления из левого желудочка и остановить запись.
    17. Придать 100 мл 2% синий Эванс в фосфат буфер солевой раствор (PBS, рН 7,4) в Центральный венозный линии. Около 30 s позже, когда вся животное становится синим, придать 40 мл 20% KCl, чтобы усыпить животных. Смерть была подтверждена отсутствие сигналов ЭКГ и импульсных волн.

3. Определение выборки методы

  1. Извлечение, разбор и выборки сердца (рис. 4)
    1. Выполните стернотомии подвергать сердце. Следуйте ранее описанный Koudstaal и коллеги, шаги 8-2 и 8-318протокола. Разрежьте, перикарда при осмотре отклонений, которые могли бы вытекать из более ранних перикардит и исключить животное от дальнейшей оценки.
    2. Выкачать и удаление PCI, а также руководящих катетер. Акцизный сердца для дальнейшего анализа. Cut верхней полой вены и удаление крови с помощью всасывающий насос, а затем вырезать всех крупных сосудов, соединяющий сердце с телом.
    3. Промойте сердце внутри и снаружи с комнатной температуре физиологического раствора. Весят всего сердца.
    4. В течение 30-40 мин, сердце нарезать ломтиками около 3-5 мм от вершины к сосцевидными связки митрального клапана, перпендикулярно длинной оси, используя острый нож.
    5. Будьте внимательны и всегда место сердце в ту же ориентацию с брюшной стороной вверх, чтобы сохранить ориентацию вырезать образцы (рис. 5).
    6. Фотография ломтики сердца с помощью цифровых однообъективных зеркальный фотоаппарат.
    7. Отрежьте правого желудочка (отменить как не требуется). Сфотографировать ломтики левого желудочка и взвесить все срезы для общего веса левого желудочка.
    8. Различия между голубой Эванс позитивные и Эванс синий негативные ткани во всех разделах. Вскрыть ломтики отделить ишемического (Эванс синий негативные) от не ИБС ткани (синий Эванс положительным) с помощью скальпеля.
    9. Сначала проанализируйте Эванс синий негативные секций (ишемические области риска, AAR). Взвесить все их и поместить их всех в пластиковый контейнер.
    10. Обложка ломтики полностью с 100-150 мл (по данным Размер сердца) илидами tetrazolium хлорида раствор (2 g TTC, 16 g декстрана, молекулярный вес 48000-90000, 200 мл PBS, свежеприготовленные) так, что части сердца может свободно перемещаться внутри своего решения. Обложка контейнера и проинкубируйте 20 минут при 37 ° C во время нежно тряска.
    11. Во время этой 20 мин время инкубации весят Эванс синий позитивные штук (площадь не риску, НРУ), взять пробы для врезать ткани-Tek (выбрать наиболее дистальной части от травмы) и хранить при температуре-80 ° C для дальнейшего анализа. Перевести остальные на 4% раствор формальдегида и хранить при комнатной температуре для разделов гистологии.
    12. Удаление части AAR от TTC решения. Красный окрашенные ткани является жизнеспособным ишемии тканей (ВИТ) и -окрашенных тканей является ишемическая некротических тканей (НИТ). Вырезать 2 мелкие кусочки (блоки 2-3 мм) от так NIT и Вит, встраивать их в ткани - Tek хранения при температуре-80 ° C для дальнейшего анализа. Эти образцы должны иметь одинаковый вес.
    13. Исправьте остальные части (производный от AAR все срезы) путем закрепления их в контейнере из пенопласта и полностью охватывающих с 4% раствор формальдегида для 24 ч при комнатной температуре в зонта. Куски должен оставаться плоской для фотографической документации на следующем шаге.
    14. На следующий день фотография обе стороны куски с высоким разрешением камеры с же масштаб и расстояние от ткани (же увеличение). Добавьте автоматический масштаб баров для всех изображений. Все бары должны иметь одинаковую длину.
      Примечание: С высоким разрешением камеры должен быть подключен к программное обеспечение, которое автоматически добавляет линейку шкалы для каждой фотографии.
  2. Расчет AAR и размер infarct
    1. % AAR левого желудочка = (вес AAR в g / вес левого желудочка в g) * 100.
    2. Используйте программное обеспечение ImageJ вычислить площадь поверхности AAR и NIT (обе стороны каждого куска) на основе фотографии.
    3. Отрегулируйте линейки шкалы, выбрав бар длина шкалы, используя прямой линии от инструмент «угол». Выберите в меню Анализ > задать масштаб и вставить известные расстояние и единицы линейки шкалы. Выберите «глобальный» так же масштабе будет применяться ко всем изображениям.
    4. Марк всей поверхности ткани, используя инструмент выделения свободной рукой для вычисления AAR. Будьте осторожны, чтобы не включать на стороне (высота) ткани и/или жировой ткани (рис. 6-C).
    5. Значение измерения, выбрав «область» и «отображать метку «от анализ > меню задать измерения. Измерить площадь поверхности от анализ > мера.
    6. Повторите шаг 3.2.5 меру NIT (Марк только-окрашенных тканей). Примечание: Не включать жировой ткани (рис. 6 D) в расчет NIT. Повторите шаг на другой стороне ткани.
    7. Рассчитайте средний AAR и НИТ для каждый кусок ткани.
    8. Использовать значения, полученные из 3.2.7 для вычисления NIT в процентном отношении НИТ AAR AAR:% = (Σ средняя площадь поверхности NIT2см / Σ средняя площадь поверхности AAR см2) * 100.
    9. Две разные исследователи должны повторять выше метода. Приемлемые погрешность — < 10%.
  3. Ишемия маркеры
    1. Использовать образцы плазмы ЭДТА, которые были ранее сохранены на-80 ° C (2.1.9) для измерения уровня сердца тропонин-описанным ранее с помощью пробирного Luminex тип single-plex 19.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Одно животное преждевременно умер до отправления FXIIa ингибитор или управления пептид из-за технической ошибки (резкое падение артериального давления во время ишемии, перед добавлением испытываемого вещества). Одно животное был исключен из группы ингибиторов FXIIa, потому что не ишемии/реперфузии травмы наблюдалась вследствие ненормального анатомии левой передней нисходящей артерии (лад). Большая часть левого желудочка, включая вершины, был увлажненную диакритический артерии в этом живот...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Миокарда я / R травмы имеет значительное влияние на размер окончательного инфаркте, которая непосредственно переводится на прогноз пациента после острого инфаркта миокарда3. Понимание патофизиологии миокарда я / R травмы является первым шагом, чтобы уменьшить или предотвратить его. Миокарда я / R травмы является острый состояние, которое возникает непосредственно после реперфузии окклюзии сосудов. Я / R травма приводит к активации врожденного иммунного ответа и клеточных повреждений происходит на ...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы заявляют никакого конфликта интересов.

Благодарности

Авторы хотели бы отметить профессор Кристиан Heinis ингибитор FXIIa и соответствующего элемента управления. Мы также выражаем благодарность Ольгики Beslac, д-р Даниэль Mettler и Кей Nettelbeck от блока экспериментальной хирургии, Департамент биомедицинских исследований, Университет Берн для технической поддержки. Селин Guillod и Маттиас Rausch от Департамента для диагностики, Interventional и педиатрической рентгенологии, больницы университета Берн, Inselspital оказали поддержку с рентгеновского оборудования и техники. Этот проект финансировался Швейцарский Национальный научный фонд проекта № 320030_156193. Мы хотели бы также поблагодарить г-н Reto Haenni от коммуникации и маркетинга, госпиталь университета Берн, Inselspital для видеозаписи наш эксперимент.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
ABL 90 Flex, анализатор газов кровиРадиометр-анализгазов крови (BGA)
ACT PlusMedtronic-Активированноевремя свертывания
крови AtropinSintetica-AtropinumSulfas, 0,5 мг/мл
Balance (20-500 кг)NAGATA Scale, TiwanHTB/HTRМожно использовать альтернативные продукты
Баланс (21-4200 г)Mettler toledo, ШвейцарияMS4002SDRМожно использовать альтернативные продукты
Пробирки для забора крови: ЭДТА, цитрат и сывороткаS-Monovette, Nuembrecht, Германия05.1167.001,
05.1071.001
и
05.1557.001 соответственно
Альтернативные продукты могут быть использованы
BV Pulsera мобильная С-дугаPhilips-Альтернативныепродукты могут быть использованы
CentrifugeLabcare, ВеликобританияALC PK120RМожно использовать альтернативные продукты
Дефибриллятор Lifepak 12Medtronic-Альтернативныепродукты можно использовать
Dextran от Leuconostoc mesenteroidesSigma-Aldrich, ГерманияD3759Average M.wt 48000-90000
Цифровая однообъективная зеркальная камераSony, ТаиландDSLR-A500/A550Альтернативные продукты можно использовать
Препарирующие щипцыВ качестве альтернативы можно использовать
дилатационный катетер EMPIRA RX PCICordis, Johnson&; Johnson, США85R15300SДиаметр 3 мм, длина 15 мм, Альтернативные продукты могут быть использованы
EMPIRA RX PCI дилатационный катетерCordis, Johnson& Johnson, США85R15350SДиаметр 3,5 мм, длина 15 мм, Альтернативные продукты можно использовать
Evans BlueSigma-Aldrich, ГерманияE2129Toxic
Fabius GS респиратор премиум-классаDrä ger, Lü beck, Германия-Анестезиологическая рабочая станция, Альтернативные продукты могут быть использованы
ФентанилИнзельпитал ISPI-Фентанил 2500 мкг/50 мл
Институт патологии формальдегида, Бернский университетSI148701Альтернативные продукты могут быть использованы
ингибитором FXIIaПредоставлено лабораторией профессора Кристиана Хейниса в EPFLНовый бициклический пептид
Galeo, коронарный проводникBiotronik, Германия125497Альтернативные продукты могут быть использованы
Руководство катетерBoston Scientific, Флорида, США34356-066F (100 см, EB3.75). В качестве альтернативы можно использовать
гепарин натрияDrossapharm, Базель,Швейцария-Liquemin, 25000 ед./5 мл
Высококлассная электрохирургияBOWA,Германия ARC 400Электрический источник для отсасывания крови. Альтернативные продукты можно использовать
Hydro-Guardmini дыхательный фильтрIntersurgical, Литва1745000Фильтры
Image JНациональный институт здравоохранения, США1.47vАльтернативные продукты можно использовать
Надувное устройство, Atrion QL2530Atrion медицинское изделие, Алабама, США96402Альтернативные продукты можно использовать
IntelliVue MP 70Philips, Boeblingen,Германия-Монитор (ЭКГ, частота сердечных сокращений, предпосылка крови и температура тела). В качестве альтернативных продуктов можно использовать
KClSinteticaSA-Potassiumchloride 15%
КетаминVetoquinol-Narketan, 1мл/100мг
LR-ACTMedtronic402-01ACT специальные шприцы
MidazolamRoche-Dormicum, 5мг/мл
Монополярный скальпельМожно использовать альтернативные продукты
ИглодержательМожно использовать альтернативные продукты
камеры высокого разрешения, PathStand Macro Imaging Stand для GrossingSpotimaging, разрешение США1080 p HD. Альтернативные продукты могут быть использованы
PBSСобственная подготовка-Альтернативныепродукты могут быть использованы
Периферическая венозная канюля, 18 GАльтернативные продукты могут быть использованы
PowerLab 4/35 система сбора данных Adinstruments, Spechbach, Германия-Rotamax120T
Heidolph, Германия544-41200-00Shaker. В качестве альтернативы можно использовать
Rü schelit-Super Safety Clear TubeTeleflex, Дублин, Ирландия112480Трубки для воздушных путей, Альтернативные продукты можно использовать
Безопасные шприцы для аспиратораPico Радиометр956-622BGA специальные шприцы
Физиологический растворSintetica Bioren-NaCl0,9%. В качестве альтернативы можно использовать
Sevorane 1,5%AbbVie AG-Sevorane250ml 100%
SheathCordis, Johnson& Johnson, США504-607 AAVANTI +/7 F, Альтернативные продукты могут быть использованы
Space Infusion pumpB.Braun Medical AG,Германия-Для инфузии фентанила. Альтернативные продукты могут быть использованы
SPR-350 (катетер Миллара)Adinstruments, Техас, США840-8166MIKRO-TIP, 5F, 120 см
Стернотомическая пилаАльтернативные продукты могут быть использованы
Шовные материалыETHICON, Johnson& Джонсон, СШАY3110HМонокрил 3-0 SH-1 Плюс. Альтернативные продукты могут быть использованы
Шприцы (20, 10 и 5 мл)CODAN,Baar, Швейцария62.7602,
62.6616,
62.5607
соответственно
Используются для внутримышечного введения анестезирующих материалов или непосредственно в центральную венозную линию. Также следует ввести гепарин или FXIIa или соответствующий контроль. Альтернативные продукты могут быть использованы
РазбрасывательАльтернативные продукты могут быть использованы
Tissue-tekSAKURA, Нидерланды4583O.C.T. compound
Сосудистые щипцыАльтернативные продукты могут быть использованы
Xenetix 300 контрастное средствоGuerbet, Zü богатый,Швейцария-Лобитридол, 300 мг йодида/мл
КсилазинВетохинол-Ксилапан, 20 мг/1 мл
2,3,5-трифенилтетразолия хоридSigma-Aldrich, АвстрияT8877
500 μ L-образные пробирки (eppendorf)Trefflab, Швейцария96.08185.9.03Можно использовать альтернативные продукты
грудной клетки

Ссылки

  1. Mozaffarian, D., et al. Heart Disease and Stroke Statistics-2016 Update. Circulation. 133, e338-e360 (2016).
  2. Miller, T. D., et al. Infarct size after acute myocardial infarction measured by quantitative tomographic 99mTc sestamibi imaging predicts subsequent mortality. Circulation. 92, 334-341 (1995).
  3. Ovize, M., et al. Postconditioning and protection from reperfusion injury: where do we stand? Position Paper from the Working Group of Cellular Biology of the Heart of the European Society of Cardiology. Cardiovasc Res. 87, 406-423 (2010).
  4. Neri, M., Riezzo, I., Pascale, N., Pomara, C., Turillazzi, E. Ischemia/Reperfusion Injury following Acute Myocardial Infarction: A Critical Issue for Clinicians and Forensic Pathologists. Mediators Inflamm. 2017, 1-14 (2017).
  5. Yang, Q., He, G. -W., Underwood, M. J., Yu, C. -M. Cellular and molecular mechanisms of endothelial ischemia/reperfusion injury: perspectives and implications for postischemic myocardial protection. Am J Transl Res. 8, 765-777 (2016).
  6. Massberg, S., et al. Platelet-Endothelial Cell Interactions During Ischemia/Reperfusion: The Role of P-Selectin. Blood. 92, 507-515 (1998).
  7. Wang, J., et al. Antithrombin is protective against myocardial ischemia and reperfusion injury. J Thromb and Haemost. 11, 1020-1028 (2013).
  8. Hopp, S., et al. Targeting coagulation factor XII as a novel therapeutic option in brain trauma. Ann Neurol. 79, 970-982 (2016).
  9. Crick, S. J., Sheppard, M. N., Ho, S. Y., Gebstein, L., Anderson, R. H. Anatomy of the pig heart: comparisons with normal human cardiac structure. J Anat. 193 (Pt 1), 105-119 (1998).
  10. Heusch, G., Skyschally, A., Schulz, R. The in-situ pig heart with regional ischemia/reperfusion - ready for translation. J Mol Cell Cardiol. 50, 951-963 (2011).
  11. Poirier, P. Exercise, heart rate variability, and longevity: the cocoon mystery? Circulation. , 2085-2087 (2014).
  12. Milani-Nejad, N., Janssen, P. M. L. Small and large animal models in cardiac contraction research: advantages and disadvantages. Pharmacol Ther. 141, 235-249 (2014).
  13. Bloor, C. M., White, F. C. Functional development of the coronary collateral circulation during coronary artery occlusion in the conscious dog. Am J Pathol. 67, 483-500 (1972).
  14. Banz, Y. Locally targeted cytoprotection with dextran sulfate attenuates experimental porcine myocardial ischaemia/reperfusion injury. Eur Heart J. 26, 2334-2343 (2005).
  15. Krombach, G. A., Kinzel, S., Mahnken, A. H., Günther, R. W., Buecker, A. Minimally Invasive Close-Chest Method for Creating Reperfused or Occlusive Myocardial Infarction in Swine. Invest Radiol. 40, 14(2005).
  16. Suzuki, Y., Lyons, J. K., Yeung, A. C., Ikeno, F. In vivo porcine model of reperfused myocardial infarction: in situ double staining to measure precise infarct area/area at risk. Catheter Cardiovasc Interv. 71, 100-107 (2008).
  17. McCall, F. C., et al. Myocardial infarction and intramyocardial injection models in swine. Nat Protoc. 7, 1479-1496 (2012).
  18. Koudstaal, S., et al. Myocardial infarction and functional outcome assessment in pigs. J Vis Exp. , e51269(2014).
  19. Kamat, P., et al. Dexrazoxane Shows No Protective Effect in the Acute Phase of Reperfusion during Myocardial Infarction in Pigs. PLoS One. 11, e0168541(2016).
  20. Carden, D. L., Granger, D. N. Pathophysiology of ischaemia-reperfusion injury. J Pathol. 190, 255-266 (2000).
  21. Pérez de Prado, A., et al. Closed-chest experimental porcine model of acute myocardial infarction-reperfusion. J Pharmacol Toxicol Methods. 60, 301-306 (2009).
  22. Lown, B., Levine, S. A. The carotid sinus. Clinical value of its stimulation. Circulation. 23, 766-789 (1961).
  23. Regueiro-Purriños, M., et al. Ventricular Arrhythmias and Mortality Associated with Isoflurane and Sevoflurane in a Porcine Model of Myocardial Infarction. J Am Assoc Lab Anim Sci. , (2011).
  24. Roberts, L. N. Evans blue toxicity. Can Med Assoc J. 71, 489-491 (1954).
  25. Ellenbroek, G. H. J. M., et al. Primary Outcome Assessment in a Pig Model of Acute Myocardial Infarction. J Vis Exp. , e54021(2016).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Ишемически-реперфузионное повреждениесвиная модельчрескожное коронарное вмешательствопередняя нисходящая артерияпроцедуры забора тканейметоды забора кровиокрашивание красителем Эванс Блюинкубация в растворе ТТХопределение размера инфаркта