Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Оценка лактата крови и плазмы инсулина во время высокой интенсивности тренировок, локтевой Вены катетеризации

5.8K просмотров

DOI:

10.3791/56890

18 мая 2018 г.

В этой статье

Краткое содержание

Здесь мы представляем протокол получить несколько образцов крови из локтевой Вены во время интервала высокой интенсивности обучения. Этот протокол может быть полезен для измерения крови метаболитов и эндокринными маркеры во время осуществления.

Аннотация

Измерение обмена веществ и эндокринной маркеров во время физической активности является значение для понимания физиологических последствий механизмов различных упражнений. Во время некоторых осуществление процедур (например, интервал высокой интенсивности упражнений), крови метаболитов и гормонального изменения в короткие периоды времени. В настоящем исследовании мы описываем метод catheterize локтевой Вены, который позволяет собирать несколько образцов крови во время физических упражнений. Инсулин и венозной лактат концентрации были измерены во время высокой интенсивности тренировок путем применения метода описано. Осуществление состояла из трех 30 s приступы высокой интенсивности упражнений, разделенных 4 мин восстановления. После последнего периода восстановления Wingate испытание. Образцы крови из локтевой Вены были получены до и после каждого 30 s схватки и до и после теста Wingate. В результате появилась возможность оценить плазмы инсулина и венозной крови лактат вариации в ходе учений.

Введение

Измерение обмена веществ и эндокринной маркеров во время физической активности является значение для понимания физиологических последствий механизмов различных упражнений. Во время некоторых упражнений условия (например, интервал высокой интенсивности упражнений (HIIE)) крови метаболитов и гормонального колебаться в относительно короткое время1,2,3.

Многие виды спорта (т.е., футбол, баскетбол и регби) состоят из коротких периодов высокой интенсивности упражнений, разделенных низкой интенсивных упражнений и/или пассивных периоды4,5. HIIE представляет сходство с вышеупомянутыми видами спорта и поэтому широко используется в качестве метода подготовки для спортсменов6. Кроме того из-за его сходства с спорта, HIIE использовалась как модель для изучения физиологии упражнение7. Забор крови имеет решающее значение для измерения физиологических параметров, и он часто используется для исследовательских целей и оценки физического состояния. Однако забора крови во время HIIE может быть технически сложным из-за короткий промежуток времени между образец коллекции. В качестве решения этой проблемы здесь мы представляем метод, чтобы получить образцы крови, локтевой катетеризации вен в короткие периоды времени, в то время как субъектов выполнять HIIE.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Все методы, описанные здесь были утверждены местным этическим Комитетом (Дошиша университет Этический Комитет: 15033) и в строгом соответствии с нормами, установленными в Хельсинкской декларации. Информированное согласие было получено от всех участников. Участники были мужских рекреационные спортсменов (возраст, 20.1 ± 1,2 года; вес, 69.7 ± 6,2 кг; Высота, 176.1 ± 5,8 см; тела жира 13.6 ± 1,5% и VO2Макс, 52,6 ± 6,6 мл/мин/кг11).

1. Создание осуществления протокола

Примечание: Настоящее исследование состояла из оценки крови гормональные и метаболитов динамики, забор крови из локтевой Вены во время HIIE протокол.

  1. Спросите вопрос для выполнения теплый вверх с 5 минут на велосипеде в велоэргометр при низкой интенсивности. После разминки Пусть предмет отдохнуть в течение 5 мин.
  2. Спросите тема для выполнения следующих HIIE в ногу велоэргометр цикла: три приступы 30 s высокой интенсивности упражнений, разделенных 4 мин отдыха (рис. 1).
    Примечание: 30 s схватках должно быть присвоено в равной интенсивности 90% мощности в среднем ранее выполненных теста Wingate. Обратитесь в другом месте8 для полного описания теста Wingate.
  3. Для расчета нагрузки 30 s приступы, используйте следующие уравнения:
    Работа = сила x расстояние (уравнение 1)
    Сила = масса x ускорение (уравнение 2)
    Работа = (массы x ускорение) x расстояние (уравнение 3)
    Примечание: В этой модели, масса рабочей нагрузки (кг), и ускорение-9,81 м/с2. Диаметр колес (1.622 м) находится на расстоянии. Потому что колесо вращается 3.7 вращение приурочен /peal, 3,7 x 1,662 находится на расстоянии за педаль вращение. Кроме того потому что педаль частота 90 об/мин1, мы должны умножить одну педаль расстояние 90.
    Работа = рабочей нагрузки x 9,81 x 3,7 x 1.622 x 90 (уравнение 4)
    Рабочая нагрузка = работа / (9.81 x 3,7 x 1.622 x 90) (уравнение 5)

2. катетеризации

Примечание: Вакутайнеров и труб должны быть помечены заранее, чтобы избежать потери времени.

  1. Оберните жгут на руке, отобранных для катетеризации. Чтобы сделать это, поместите резинкой на задней выбранной руку. Растяжение группы, сделать петлю с группой вокруг руки и связать резинку.
  2. Выберите видимый локтевой Вены и стерилизации кожи с этанолом или алкоголя.
  3. Вставьте наконечник Стерильный катетер в Вену на Примерный угол 15 ° с кожей.
    Примечание: Канюля должны быть вставлены из проксимальнее дистальной направлении. Если катетеризации является успешной, долговременной крови должны соблюдаться.
  4. Безопасный канюля с рукой и мягко удалить иглы.
    Примечание: Для поддержания угол иглы во время упражнения, хлопок ткани может использоваться между кожей и иглы. Исправьте эту структуру с помощью ленты.
  5. Подключите vacutainer с гепарином и аспирата для первого образца крови (примерно 2,5 мл). Сразу же после этого охладите кровь, поставив его в поле льда не более 40 минут. Помощник можно попросите помощи, если газов крови собирается быть проанализированы.
  6. Подключение трубки катетера и вставляют гепарина на всю длину трубки во избежание свёртывания крови. Закройте бабочки.
  7. С помощью ленты, стабилизируйте катетера. Убедитесь, что на данный момент, мобильность руку субъекта не соприкасаются с забора крови. Для подтверждения этого состояния, убедитесь, что положение иглы не зависит от каких-либо движения.

3. кровь сэмплинг

  1. Удаление гепарина с помощью vacutainer до тех пор, пока есть только кровь в катетер. Когда наблюдается крови воспоминаниях, соберите образца, как описано в пункте 2.5.
  2. После проб inject гепарина снова в катетер, трубка избежать коагуляции крови. После этого действия шаг 2.5 может быть повторен для нескольких образцов коллекции.
  3. После того, как последний пример собираются, тщательно снять трубку катетеризации и очистите кожу с алкоголем. Чтобы избежать возможных кровотечений, попросите предмет держать стерилизованные хлопка в месте, где был сделан катетеризации.
  4. После того, как кровь собирается в vacutainer трубы, тщательно пройти примерно 1,5 мл крови в 1,5 мл трубку и держать трубы на льду.
  5. Мера лактата крови из оставшихся крови с помощью детектора лактата. В тот же день получите плазмы крови (около 1,5 мл крови).
  6. Для разделения плазмы Центрифугуйте образцы крови за 5 мин на 5000 x g на 4 oC и отделить супернатант в новой 1,5 мл трубки.
  7. Повторите еще раз центрифугирования для очистки плазмы.
  8. После разделения плазмы хранения образцов-80 oC до анализа гормонов.
  9. Измерьте плазмы инсулин, используя набор ELISA как за производителя протокола (см. Таблицу материалы).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Как представитель результаты мы использовали этот протокол для измерения крови лактат и инсулина вариации по шести предметам во время HIIE в цикле эргометр. Пиковая мощность и средней мощности для теста Wingate были 732 ± ± 120 и 549 84 Вт, соответственно. Средняя мощность использовалась для расчета мощности (494 ± 75 Вт) в течение 30 s приступы HIIE.

Рисунок 2 показывает, что инсулин плазмы и крови...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

В этом исследовании вводили локтевой Вены, и образцы крови были успешно собраны во время высокой интервал упражнений. В качестве примера использования этой методологии образцы крови были проанализированы для крови лактат и (после разделения плазмы) для плазмы инсулина. Основным преимуществом этого метода является то, что позволяет коллекции образцов крови в короткие периоды времени. В то же время он имеет некоторые ограничения. К примеру ограниченное осуществление процедур, которые позволяют его использования; количество...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы не имеют ничего сообщать.

Благодарности

Авторы хотели бы признать д-р P. Karagiannis для чтения документа и профессор т. Hoyo его технической поддержки.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
ВелоэргометрMonarkMONARK Ergomedic 874 E
Катетер TerumoSR-FF2032
VacutainerTerumoPZ-D03
Трубка для катетераTerumoSP-PTW30L02
ГепаринTerumoPF-10HF10UA
Инсулин ИФА наборAbnovaELISA Kit KA0921

Ссылки

  1. Wahl, P., Mathes, S., Köhler, K., Achtzehn, S., Bloch, W., Mester, J. Effects of active vs. passive recovery during Wingate-based training on the acute hormonal, metabolic and psychological response. Growth Horm IGF Res. 23 (6), 201-208 (2013).
  2. Wahl, P., Mathes, S., Achtzehn, S., Bloch, W., Mester, J. Active vs. passive recovery during high-intensity training influences hormonal response. Int J Sports Med. 35 (7), 583-589 (2014).
  3. Nalbandian, H. M., Radak, Z., Takeda, M. Effects of active recovery during interval training on plasma catecholamines and insulin. J Sports Med Phys Fitness. , (2017).
  4. Stolen, T., Chamari, K., Castagna, C., Wislff, U. Physiology of Soccer. Sport Med. 35 (6), 501-536 (2005).
  5. Bangsbo, J. The physiology of soccer--with special reference to intense intermittent exercise. Acta Physiol Scand Suppl. 619, 1-155 (1994).
  6. MacInnis, M. J., Gibala, M. J. Physiological adaptations to interval training and the role of exercise intensity. J Physiol. 595 (9), 2915-2930 (2017).
  7. Emberts, T., Porcari, J., Dobers-Tein, S., Steffen, J., Foster, C. Exercise intensity and energy expenditure of a tabata workout. J Sports Sci Med. 12 (3), 612-613 (2013).
  8. Smith, J. C., Hill, D. W. Contribution of energy systems during a Wingate power test. Br J Sports Med. 25 (4), 196-199 (1991).
  9. Dotan, R., Bar-Or, O. Load optimization for the Wingate Anaerobic Test. Eur J Appl Physiol Occup Physiol. 51 (3), 409-417 (1983).
  10. Carrasco-Benso, M. P., et al. Human adipose tissue expresses intrinsic circadian rhythm in insulin sensitivity. FASEB J. 30 (9), 3117-3123 (2016).
  11. Hatfield, D. L., Nicoll, J. X., Kraemer, W. J. Effects of Circadian Rhythm on Power, Force, and Hormonal Response in Young Men. J Strength Cond Res. 30 (3), 725-732 (2016).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Теги