RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
ru_RU
Menu
Menu
Menu
Menu
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Research Article
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Erratum Notice
Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice
Retraction Notice
The article Assisted Selection of Biomarkers by Linear Discriminant Analysis Effect Size (LEfSe) in Microbiome Data (10.3791/61715) has been retracted by the journal upon the authors' request due to a conflict regarding the data and methodology. View Retraction Notice
Устройство совместно потока инверсии фазы продемонстрировал сформировать капельки высокой вязкости монодисперсных выше 1 ССА, который трудно реализовать в капли микрофлюидика.
Поколение монодисперсных капель с высокой вязкостью всегда был вызов в микрофлюидика капли. Здесь мы демонстрируем фазы инверсии Сопредседатель потока устройства для создания единой капли высокой вязкости в низкой вязкость жидкости. Microfluidic капиллярного устройство имеет общую структуру совместного потока с его выходом, подключение к широкой трубки. Удлиненные капельки низкой вязкость жидкости сначала инкапсулированные высокой вязкости жидкости в структуре совместного потока. Как удлиненные капельки низкой вязкости потока через выход, который обрабатывается смоченных низкой вязкость жидкости, инверсии фазы затем индуцируется прилипание капелек низкой вязкостью до кончика выхода, что приводит к последующей обратной Инкапсуляция высокой вязкости жидкости. Размер результирующей капель высокой вязкости может корректироваться путем изменения соотношения скорость потока низкой вязкость жидкости к высокой вязкости жидкости. Мы продемонстрировать несколько типичных примеров поколения высокой вязкости капель с вязкостью до 11,9 Pas, как глицерин, мед, крахмал и полимерные решение. Этот метод обеспечивает простой и прямой подход к генерации монодисперсных высокой вязкости капельки, которые могут быть использованы в различных капелька-приложений на основе, например синтеза материалов, Доставка лекарств, assay клетки, биоинженерии и продовольствия Машиностроение.
Поколение капли становится ключевой технологией в различных приложений, таких как Доставка лекарств, материалов синтез, 3D подложке, клеток и продовольствия инженерных1,2,3,4 , 5 , 6. Microfluidic приборы с т-образного7,8, совместно поток1,9, или поток упор10,11 структуры широко используются для создания монодисперсных один эмульсии капельки. Выбор более вязкой непрерывной фазой будет способствовать формированию капель12, и вязкости непрерывной и рассеянных жидкости, обычно ниже 0,1 ПА в капли микрофлюидика13. Однако во многих приложениях, дисперсной фазы может иметь вязкость несколько сотен раз выше, чем у воды, например глицерина14, растворов, содержащих наночастицы15, белки16или полимеры17 , 18 , 19, хотя это трудно добиться монодисперсных капли прямо из высокой вязкости жидкостей в стабильной капает11 режим в microfluidic приборы, особенно для жидкостей с вязкостью η > 1 ПА·с14 ,17,18,19. Кроме того он был сообщил13,18 что типичный microfluidic методы для формирования капли требуют жидкости с относительно низкой вязкости и умеренной поверхностное натяжение для формирования единой капли в стабильной капает режим.
Для дисперсной фазы с вязкостью немного больше, чем 0,1 ПА, существует несколько возможных подходов для облегчения формирования капли с типичной т-образного перекрестка, Сопредседатель потока или потока упором microfluidic приборы: (1) снижение вязкости дисперсной Фаза путем разбавления в летучих растворителей11,20; (2) уменьшить коэффициент разошлись к непрерывное вязкость, увеличив вязкость непрерывной фазой1,11; (3) уменьшите расход дисперсной фазы чрезвычайно низкое значение, сохраняя непрерывный разогнали потока скорость соотношение 14,19. Однако эти подходы не практичным для жидкостей с гораздо более высокой вязкостью, как они будут значительно снизить темпы производства резко повышая потребление летучих растворителей или непрерывной фазой. В дополнение сообщалось, что некоторые решения высокой вязкости полимера с η > 1 ПА·с до сих пор не нарушал на капельки с подходами, упомянутые выше17,19.
Есть также несколько улучшение конструкции microfluidic устройств, которые ввести третий этап жидкости в систему, которая облегчает поколения капель высокой вязкости. Инновации включают: пузыри, познакомил нарезать смывающий потока капельки21, несмешивающихся chaperoning жидкости с умеренной вязкости, представил как средний участок между dipsersed фазы и непрерывной фазой18, и микрореакторы, представил для создания высокой вязкости капельки из двух маловязкие прекурсоров21,22,-23. Однако как один больше жидкости участвует в процессе, система становится более сложной, и устройства обычно работают в гораздо короче режима потока, чем типичный устройства для генерации одного эмульсии капельки.
Для создания монодисперсных капельки непосредственно из высокой вязкости жидкости с η > 1 ПА·с, контролируемой поверхности фаза инверсии методы были расследованы24. Поколение низкой вязкости капельки гораздо проще, чем высоковязкое капель12, удлиненные маловязкие капельки в непрерывной фазе высокой вязкости сначала создаются с использованием типичного потока со структуры, а затем разбиты должного для изменения поверхности смачиваемости вниз по течению структуры совместного потока. Выпущенные низкой вязкость жидкости обратно инкапсулирует течению высокой вязкости жидкости в капельки так что инверсии фазы завершения. Согласно механизму инверсии фазы монодисперсных высокой вязкости капельки могут быть созданы на основании типичной Сопредседатель потока устройства, в то время как выход устройства совместно потока угощали смоченных низкой вязкость жидкости, а затем подключен к широкой трубки24 ,25.
1. производство фазы инверсии Сопредседатель потока капиллярного устройство для наблюдения за процесс создания капель водного раствора, высокой вязкости с диаметром ~ 500 мкм.
Примечание: Площадь наружной трубы, используемые здесь предназначен для снятия изображений процесса формирования капель высокой вязкости. Если нет необходимости принимать изображения, упрощенная версия устройства могут быть сделаны согласно протоколу шаг 2.
2. Сделайте фазы инверсии, Сопредседатель потока капиллярного устройства для изготовления водных капель высокой вязкости с диаметром ~ 500 мкм.
Примечание: Устройство, сделанное здесь это упрощенная версия устройства в протокол шаг 1.
3. Сделайте фаза инверсии Сопредседатель потока капиллярного устройства для наблюдения за процесс создания водных капель высокой вязкости с диаметром ~ 200 мкм.
Примечание: Устройство, сделанное здесь это уменьшенная версия устройства протокола шаг 1, чтобы сделать небольшие капельки.
4. наблюдение за поколение капель глицерина в парафин жидкий
Примечание: Для снятия изображений показано в цифры 1B - D, используйте устройство, подготовленный в протокол шаг 1; для снятия изображений, показанный на рисунке 3, используйте устройство, подготовленный в протокол шаг 3.
5. генерации и сбора капель глицерина в жидкий парафин с упрощенной устройством, подготовленный на шаге 2.
Примечание: Это для принятия изображений капель глицерина, сформировавшейся под различными потока оценить соотношение Qo/Q,wи измерение соответствующий размер вариации капель для точек данных на рисунке 2.
6. генерировать других высоковязких капельки, парафин жидкий, с помощью устройства совместно потока фазы инверсии.
Примечание: Это для изображения на рисунке 4. Все фазы Низковязкие масла, используемых в экспериментах так же, как используется в протоколе шаг 4.1.2.
Microfluidic капиллярного устройство с фазы инверсии, структура совместного потока был разработан для создания монодисперсных водные капельки высокой вязкости, как показано на рисунке 1A. На рисунке 1, водной фазе высокой вязкости было глицерин, который имеет вязкость ηw = 1.4 Pas; этапа Низковязкие масла был жидкий парафин, который имеет вязкость ηo = 0,029 Pas; поверхностное натяжение между двумя этапами был γ = 27,7 МН/м. В среднем трубки капельки удлиненные масла может быть инкапсулирована глицерина в хорошо контролируемых капает режим9,13, потому что вязкость глицерина гораздо выше, чем у жидкого парафина и капиллярной чисел, Ca , принятых на обоих этапах, как низко как 10-4- 10-2, где Ca = ηU/γ, U = Q/A -средняя скорость жидкости, и A – площадь Креста раздел канала. Как капельки удлиненные нефти текла из выхода средней трубки в широкой наружной трубки, как показано на рисунке 1B, капельки масла сломал в гидрофобных оконечности среднего трубки и обратно инкапсулированные крышку вниз по течению глицерина, так что были получены высокой вязкости глицерина капель, как показано на рисунке 1 c. Поскольку размер капель и расстояние между двух прилегающих нефти капельки сохраняются неизменными, сформированные глицерина капель будет монодисперсных24,25. Изображения в Рисунок 1B-C были получены с помощью устройства шаг 1, и следующий экспериментальный протокол шаг 4. Капель глицерина, приданный Qo = 30 uL/мин и Qw = 10 uL/мин показаны на рис. 1 d, которой капли имеют средний диаметр 521 мкм и коэффициент вариации (CV) из размер капель, определяется как деления размера капли среднего, стандартного отклонения был CV = 0,9%, что указывает на капли были монодисперсных.
Размер капель высокой вязкости можно регулировать, изменяя соотношение Qскорость потокаo/w Qс фиксированной Qw. Набор типичных экспериментальные результаты, полученные из экспериментов, после шага 5 протокол с устройством протокола шаг 2, показано на рисунке 2. Как Qбыло зафиксированоw , размер капель, сократилось с увеличением Qo. Дальнейшее увеличение соотношения скорость потока может иметь небольшие капельки доходность, однако объёмная капель бы сократились, соответственно и там было бы резкое увеличение общего сопротивления и внутриглазное давление внутри устройства. Таким образом в пределах потока оценить соотношение на рисунке 2, размер капель был сопоставим с внутренний диаметр трубы среднего.
Размер капли можно далее сократились, когда используется устройство с меньше трубы. Типичные результаты эксперимента, после шага 4 протокол с устройством от протокола шаг 3, показано на Рисунок 3, где средняя трубка была и.д. = 200 мкм.
То же устройство от протокола шаг 2 может использоваться для создания монодисперсных капельки из различных высоковязких жидкостей, которые имеют вязкость выше чем глицерин. Типичные результаты монодисперсных капель меда (11 Pas), раствора крахмала (8,5 Pas) и раствор полимера (2,5 Pas) показано на рисунке 4. Подготовка жидкостей на рисунке 4 подробно в протокол шаг 6.

Рисунок 1: поколение высокой вязкости глицерина капель в низкой вязкости жидкий парафин с помощью устройства совместно потока фазы инверсии. (A) схема устройства совместно поток фазы инверсии. (B) наблюдения поколения капель глицерина от нефти в глицерин пули поток в середине трубки одного эмульсии глицерина в нефти в наружной трубы. (C) время последовательности изображений инверсии фазы процесса. (D) монодисперсных капель глицерина и распределение размеров капель. Средний диаметр капель-521 мкм и CV = 0,9%. Перепечатано с разрешения [24]. Авторское право 2017 американского химического общества. Масштаб гистограммы являются 500 мкм. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Рисунок 2: изменение размера капли с изменением соотношения скорость потока QO/QW Qв то время какW = 2 мкл/мин Для каждой точки данных измеряются 30 капель, и средний диаметр сообщается. Как погрешностей стандартное отклонение меньше, чем символ, используемый в сюжет, они здесь не показаны. Перепечатано с разрешения [24]. Авторское право 2017 американского химического общества. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Рисунок 3: меньше капли глицерина, генерируется из устройства с средние трубы и.д. = 200 мкм. (A) наблюдения поколения капель глицерина в наружной трубки устройства. (B) результирующей монодисперсных глицерина капель со средним диаметром 212 мкм и CV = 1,9%. Перепечатано с разрешения [24]. Авторское право 2017 американского химического общества. Масштаб гистограммы являются 200 мкм. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.

Рисунок 4: типичные примеры капелек высокой вязкости, созданных из разных решений. Перепечатано с разрешения [24]. Авторское право 2017 американского химического общества. (A) мед капли со средним диаметром 612 мкм и CV = 0,7%. (B) крахмал капельки со средним диаметром 600 мкм и CV = 0,9%, капельки полимер ПВА-124 (C) со средним диаметром 773 мкм и CV = 0,7%. Все бары масштаба являются 1.0 мм. пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Авторы не имеют ничего сообщать.
Устройство совместно потока инверсии фазы продемонстрировал сформировать капельки высокой вязкости монодисперсных выше 1 ССА, который трудно реализовать в капли микрофлюидика.
Эта работа была поддержана Фонд национального естественных наук Китая (№ 51420105006 и 51322501). Мы благодарим Даниэля за его полезным обсуждение идеи высокой вязкости.
| VitroTubes стеклянная трубка | VitroCom | 8240 | квадратная - миниатюрная полая стеклянная трубка, внутренний диаметр = 0,4 мм, наружный диаметр = 0,8 мм |
| стеклянная трубка VitroTubes | VitroCom | CV2033 | круглая - миниатюрная полая стеклянная трубка, внутренний диаметр = 0,2 мм, внешний диаметр = 0,33 мм |
| стеклянная трубка VitroTubes | VitroCom | CV1017 | круглая - миниатюрная полая стеклянная трубка, внутренний диаметр = 0,1 мм, внешний диаметр = 0,17 мм |
| стеклянная трубка VitroTubes | VitroCom | Q14606 | Квадратная - Миниатюрная полая стеклянная трубка, Внутренний диаметр = 1,05 мм + 0,1 / -0, Наружный диаметр = 1,5 мм |
| Стандартные стеклянные капилляры | WPI | 1B100-6 | Круглая стеклянная трубка, Внутренний диаметр = 0,58 мм, Внутренний диаметр = 1,00 мм |
| Глицерин | Синофарм Химический реактив Пекин | 10010618 | |
| Парафин Жидкий | Химический реактив Синофарм Пекин | 30139828 | |
| Поли(виниловый спирт), PVA-124 | Sinopharm Химический реагент Beijing | 30153084 | |
| span 80 | Sigma-Aldrich | 85548 | |
| Крахмал | Sigma-Aldrich | S9765 | |
| Трихлор(октадецил)силан | Sigma-Aldrich | 104817 | |
| толуидиновый синий O | Sigma-Aldrich | T3260 | |
| Мед | целомудренное дерево мед, обыкновенный продукты питания, приобретенные в супермаркете | ||
| DEVCON 5 Minute Epoxy | ITW | Эпоксидный клей | |
| Тупой наконечник Дозирующие иглы из нержавеющей стали (замок Люэра) | Игла Suzhou Lanbo, Китай | LTA820050 | 20G x 1/2" |
| Вольфрам/карбид Scriber | Ullman | 1830 | Для резки стеклянных трубок |
| Предметные стекла | Парус Марка | 7101 | 76,2 мм x 25,4 мм, Толщина 1 - 1,2 мм |
| Полиэтиленовые трубки | Scientific Commodities | BB31695-PE/5 | I.D. = 0,86 мм, Наружный диаметр = 1,32 мм |
| Шприцевые насосы | Более длинный насос, Китай | LSP01-1A | 3 насоса, необходимые для экспериментов |