После лечения иммуностимулирующее Наноматериал описаны экспериментальные процедуры для последующего извлечения лимфатической тканей для проверки активации лимфоидных дендритных клеток.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Иммуностимулирующее агент оценки: Лимфоидной ткани добычи и инъекций маршрут зависимых дендритные клетки активации
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Для оценки нового терапевтического агента для иммунотерапии или вакцинации анализ активации иммунных клеток в лимфатических тканей. Здесь, мы исследовали иммунологические эффекты иммуностимулирующим Роман липидов ДНК в виде наночастиц из администрации различных маршрутов в мышь: устные, интраназально, подкожно, зверолов, внутрибрюшинного и внутривенно. Эти инъекции непосредственно повлияет на иммунный ответ и уборки лимфатической ткани и анализ активации дендритных клеток (DC) в тканях, решающие части этих оценок. Извлечение лимфоузлов средостения (mLNs) важных, но довольно сложным из-за размера и расположения этого органа. Описана пошаговая процедура для уборки паховых лимфоузлов (iLN), млн и селезенки и анализа DC активации подачей cytometry.
Введение
Достижения в области иммунологии и наноматериалов привели к обилие потенциальных новых терапевтических стратегий для приложений в биомедицине, включая поставку наркотиков и иммуностимуляция. Оптимизация администрирования маршрут является одним из важнейших аспектов, влияющих на эффективность иммуностимулирующее агентов. Иммуностимулирующее наночастиц (ИНП), состоящий из ДНК является недавно разработанный нано иммунной адъюванта, самостоятельно собранные микрофазовую разделения из-за структуры амфифильных липидов ДНК1. Таким образом протоколы для INP, с участием администрации материала1 в естественных условиях че....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Все экспериментальные процедуры, включая животных обработки, жертву и орган изоляции были выполнены в строгом соответствии с правилами международного животное уход и использование Комитета в Шанхае клинический центр общественного здравоохранения и Асан медицинский центр. Протокол исследования был одобрен соответствующими комитетами по этике животных эксперименты в Шанхае общественного здравоохранения клинический центр (номер протокола мыши: SYXK-2010-0098) и Асан медицинский центр (2016-02-168).
1. Подготовка материала
Примечание: Нано адъюванта, INP, состоит из несущей собственн-собранные липидов ДНК, а именно U4T....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Для оценки соответствующих инъекции маршруты ИЯФ для активации лимфатической ткани DC, DC населения как линии была определена как –CD11c+ клетки в селезенке, iLN и млн и проанализированы уровни выражения co-stimulatory молекул. Лечение ИЯФ подкожной (s.c.) и инъекции внутривенные (и.в.) способствовало существенному увеличению CD40, CD80 и CD86 выражение в селезенке и iLN DCs (Рисунок 2B и 2 C). Зверолов.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
Многие достижения в области нанотехнологий и иммунологии были достигнуты благодаря терапевтических исследований лекарств и иммуностимуляция. Тщательный подбор метода инъекций известен имеет важное значение для иммуностимуляция, который был в центре внимания настоящего исследования.
Различные инъекции маршруты были оценены для естественно-нетоксичный и биологически на основе ДНК материала, ИЯФ (иммуностимулирующее наночастиц), чтобы определить, какой маршрут принесли лучшие результаты. Этот под.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторы не имеют ничего сообщать.
Благодарности
Это исследование было поддержано творческие материалы открытие программы через национальных исследований фонда из Кореи (NRF) финансируется министерством науки, ИКТ и будущего планирования (СР 2017M3D1A1039421) и морской биотехнологии программой, финансируемой Министерство океанов и рыболовства, Республика Корея и Грант (20150220).
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| <сильно>Материал | |||
| фосфатный буфер физиологический раствор | Corning | 21-040-CVR | Промывка органов |
| (PBS, pH 7,4) | |||
| раствор изофлурана | Aesica Queenborough limited | 26675-46-7 | Процесс анестезии |
| Туберкулиновый шприц 1 мл - | Junglim | N/A | Инъекция |
| 50 мл коническая трубка | S.P.L | 50050 | Процесс анестезии |
| 1 мл инсулинового шприца | (BD Ultra-FineTMII)_short игла | 324826 | внутримышечного введения |
| DMEM High Glucose | Hyclone | SH30081.01 | Хранение органов |
| Histopaque | Sigma-Aldrich | 10771 | FACS анализ |
| этилового спирта безводного 99,5 % | Daejung | 4022-4110 | Дезинфицирующее |
| средство<сильное>Оборудование | |||
| FineCycler C100 (Термоамплификатор) | |||
| FACS tube | FALCON | 2052 | FACS analysis |
| Автоматизированный высокопроизводительный проточный цитометр | BD (США), FACSВерсный | анализ |
Ссылки
- Park, H. Preparation of dodecynyl modified DNA nanoparticles with unmethylated CpG adjuvant and ovalbumin for immunostimulation. , Department of Chemistry. Pukyong National University, Master Thesis. (2016).
- Jin, J. O., Park, H., Zhang, W., de Vries, J. W., Gruszka, A., Lee, M. W., Ahn, D. R., Herrmann, A., Kwak, M.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
